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[病例525]广东珠海斗门区横山一南美白对虾养殖池塘（图1），池塘面积6.5亩，水深1.5米，水源为地下水，盐度为2‰-3‰，配备6台1.5kW叶轮式增氧机。2019年6月26日，放养“一代苗”39万尾。
进入三伏天以后，连续有10-15天闷热，7月30日左右，发现有白便漂浮于水面。出现白便前增氧机附近水浑，池塘边上水较肥，虾规格约100尾/斤。
8月2日，下雨，泼洒1瓶“优肽”，1kg“低聚糖500”拌料60-80斤料内服，连续5天。
8月4日，水浑浊度下降，逐渐变肥，由于下雨降温，连续3天浮便少一些，但仍有浮便。
8月5日，开始升温，白便又增多，虾吃料减慢。
8月6日，持续高温，白便继续增加，早上虾吃料明显变慢。抛网刮虾观察，有10%-20%的虾出现异常症状。肉眼观察健康虾肠胃都饱满（图2）；轻微发病的虾空肠不空胃（图3）；发病严重的虾空肠空胃，体色发黄或微红（图4），零星几尾出现“白肠”，肠道有白色粪便（图5）。解剖见：健康虾肝胰腺形状完好，与周围组织界限清晰；发病虾肝胰腺发白，不成型、“一汪水”的样子。
从池塘取虾样44尾，其中肉眼观察健康虾13尾，轻微发病虾13尾，严重发病虾18尾。分别从虾样的肝胰腺、肠、胃组织分离细菌，划线接种于胰蛋白胨大豆琼脂培养基（TSA培养基），室温条件下培养24h；取鳃、肌肉、肝胰腺组织，用95%酒精固定，送实验室进行PCR检测；取肝胰腺、肠组织用波恩氏液固定做组织病理切片观察。
结果显示：培养24h后，接种肠胃组织的培养基长出大量的优势菌落，接种肝胰腺组织的培养基几乎无菌落长出（图6）。普通PCR检测健康虾样组肝肠胞虫（EHP）的检出率为30%，轻微发病虾样组为69%，严重发病虾样组为94%；白斑综合征病毒（WSSV）、传染性皮下及造血器官坏死病毒（IHHNV）、虾血细胞虹彩病毒（SHIV）均呈阴性。观察虾样从健康到严重发病的组织病理变化为：肝胰腺组织由正常或轻微萎缩到严重萎缩；腺管崩解、腺管间细胞增生数量由少到多；肝胰腺组织中观察到肝肠胞虫数量由零星可见至大量可见（图7）；肠道组织未见明显变化，部分轻微增生，部分肠上皮增生，有的虾肠腔内有疑似肝胰腺脱落的肝肠胞虫（图8）。多数对虾肌肉、肝脏、心脏等组织可见大小不等的气泡。
8月16日，连续几天均为高温天气，虾吃料慢，死虾增多，但白便现象增加不明显；塘主担心继续养殖死亡量更大，提前卖虾。
分析：1、本病例根据外观症状人为把检查的对虾分成三组即健康、轻微发病、严重发病，普通PCR检测结果肝肠胞虫（EHP）的检出率与健康状况密切相关；组织病理切片观察肝胰腺内肝肠胞虫的数量变化和病变严重程度也密切相关，说明肝肠胞虫感染与对虾发病有相关关系，感染率越高或强度越大，发病越严重。
2、本次调查的白便虾与之前调查的白便虾组织病变特征有所不同（见【病例218-220】），肠道组织并没有出现明显的细胞增生，水面漂浮的白便也不多，提示虾肝肠胞虫可能可以引起南美白对虾发生“白便”，但并不引起肠道病变，也没有引起严重的白便症状，更主要的是对肝脏的直接损伤。
3、本案例细菌分离培养结果与之前研究结果都显示白便虾肝胰腺鲜有细菌分离培养出来，肠胃组织中的细菌无明显的规律性，细菌在本案例中起到的作用还不明确。（研究所一室戚瑞荣刘健全技术部唐绍林王林锁张吉鹏2019.10.31）
今年市场普遍反映白便严重，造成大量养不成的情况。我们起初是抱着调查白便的目的去调查，药店也认为是池塘发生了白便，实际结果很少的白便虾，水面很少的白便，不是以前调查的典型的白便病理特征，通过实验室检测和病理观察而是肝肠胞虫造成的危害。
因为本次调查彻底颠覆了我们对肝肠胞虫危害的认知，会连续发3个调查相关病例，有不同的亮点，揭示其在目前对虾养殖中的危害，对我们认识目前土池塘“白便”高发、养不成功的原因，以及今后如何健康养殖有参考价值。
组织病理切片观察见到“多数对虾肌肉、肝脏、心脏等组织可见大小不等的气泡”，气泡病（已经发生了形态结构的变化，可以称为病）已经成为对虾养殖的常态，严重程度不同、发生频率不同，对具体的案例的危害程度不同，在这个案例中起到什么作用，难以确定，可能加重了肝肠胞虫病对虾（体弱、身软、瘪瘪瞎瞎、干干巴巴）死亡。
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[每周一例]南美白对虾肝肠胞虫（EHP）和肝胰腺细小病毒（HPV）混合感染
[病例527]广东省中山市阜沙镇一南美白对虾养殖池塘（图1），面积11亩，水深1.6米，2019年7月28日放南美白对虾虾苗34万尾，放草鱼20余尾。10月初对虾规格约65尾/斤。
10月初以前南美白对虾一直吃料稳定，每天正常加料1～2斤，时不时看到“罾尾”有1-2尾虾的肝胰腺萎缩，空肠空胃。
10月8日开始慢料，在底罾忽然发现死亡4-6尾，抛网观察虾较多空肠空胃，怀疑缺氧，马上刮虾销售，卖虾2600斤，刮虾时发现虾体质较弱，网没有插电也容易上网。
卖虾后池塘估计还剩余800～1000斤虾，继续养殖。但吃料一直加不上去，保持10多斤料的量，晚上一直有小规格的虾爬边。
10月18日抛网检测池塘剩下的虾多数体色偏黄，肠道细，肝胰腺上白膜发黄，有些肝胰腺不同程度萎缩；约1/3的虾肠胃不饱满或空肠或空胃，有的肝萎缩或肠道有水气，有的瘦软，虾无力或活力差；下风口有少量白便（图2）。
取虾30尾虾，其中15尾外观较健康（图3），15尾外观异常的虾（图4），接种肝胰腺划线于胰蛋白胨大豆琼脂培养基（TSA），室温条件下培养24h；取肝胰腺用95%酒精保存，送实验室做PCR检测肝肠胞虫和病毒；取肝胰腺和肠组织固定于波恩氏液中用以做组织切片进行组织病理观察。
结果显示：常温下细菌培养48h后，健康虾组1/15尾虾肝胰腺长出较多的细菌，异常虾组4/15尾虾肝胰腺长出菌落，利用副溶血弧菌特异性基因tlh鉴定为副溶血弧菌阳性（图5）。槽氏PCR检测结果显示，健康虾组中虾肝肠胞虫（EHP）检出率为20%（3/15），异常虾组为46.7%（7/15）；健康虾组白斑综合征病毒（WSSV）阳性率为6.7%（1/15），异常虾组为阴性；传染性皮下及造血组织坏死病毒（IHHNV）、虾血细胞虹彩病毒（SHIV）均为阴性。
组织病理切片观察结果，健康虾肝胰腺组织均有不同程度的自溶，但仍可见有肉芽肿26.7%（4/15）及虾肝肠胞虫20%（3/15），肝肠胞虫位于肉芽肿坏死灶内和腺管上皮细胞胞质内；另外，腺管内观察到肝胰腺细小病毒（HPV）包涵体13.3%（2/15）；肠组织未见显著异常（图6）。异常虾肝胰腺组织病变严重，腺管严重萎缩，大量崩解，腺管间大量的细胞增生，可见处于不同时期的肉芽肿78.6%（11/15）及虾肝肠胞虫57.1%（8/15），有些肉芽肿灶心已呈干酪样坏死；还观察到大量的肝胰腺细小病毒（HPV）包涵体50%（7/15）；肠道组织多数正常，部分上皮脱落，其中一尾虾肠腔内有大量的虾肝肠胞虫（图7）。
11月4日，近期一直每天在底罾有少量几尾死亡，降温，卖虾。
分析：1、本病例南美白对虾感染虾肝肠胞虫后表现出吃料差，外观瘦弱、干瘪，活力差等症状，平时零星死亡，蜕壳期或缺氧、天气或水质剧变后死亡量增加（参见【病例】525-526）。虾肝肠胞虫（EHP）PCR检出率越高、组织病理观察病变越严重，对虾发病越严重。
2、组织病理观察发现，除了在肉芽肿坏死灶的灶心有大量的虫体聚集，也有大量HPV包涵体的出现，据资料HPV主要危害幼虾，本病例对虾规格较大，发病对虾HPV包涵体数量比“正常虾”多，说明可能HPV和虾肝肠胞虫共同引起肝胰腺萎缩和坏死。（研究所一室戚瑞荣李德意卢恩秋，技术部唐绍林张吉鹏王林锁提供2019.11.14）
[每周一例]成功处理南美白对虾“黄身”
[病例533]广东省台山市都斛镇金星村，有一口10亩的南美白对虾养殖池塘（图1），平均水深1.1米，4台1.5kW的叶轮式增氧机。2019年7月3日放高抗苗26万尾。
8月6日，晴。上午塘头服务，客户反映：虾一直加不上料，有时候料台里能看到几只发黄的虾，不知道怎么回事。遂抛网看虾，体色较黄的虾占到2成，其它虾也是体色微黄，未发现其它明显病症（图2）。用水质快速检测盒测得水体：pH值8.2，氨氮0.4mg/L，亚硝酸盐0.2mg/L（图3）。建议使用“福地安Ⅱ”连续改底3-5天，2瓶/次。
8月10日，晴。客户反映：连用了4天的“福地安Ⅱ”，虾吃料越来越快了，吃料时间由2.5小时缩短到1.5小时。抛网看虾，虾体色也都变透亮了（图4）。客户很认可其效果，打算其它三个塘也使用相同方法连续改底2-3次。
分析：1、台山都斛地区通常养殖一批虾出虾后均不做干塘处理，杀蓝藻和野杂鱼虾后接着放苗，放苗后因为喂料少也很少改底。因此，第二批虾养殖前期，塘底还原化、酸化比较严重，易造成虾步足、游泳足以及虾体发黄。
2、“福地安”为弱氧化性底质改良剂，刺激性小，少量多次使用能有效提高池塘氧化还原电位，减轻塘底还原化、酸化，改善虾体发黄，起到明显效果。（利洋水产药店都斛店徐磊提供2020.2.27）
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