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[病例529]山东海阳行村有一口南美白对虾半精养高位池，池塘面积1亩，放苗3-4万尾，水深0.8～1m，没有充氧设备（图1）。养殖水源主要来自大菱鲆养殖棚排出的“废水”，2019年8月中旬虾规格约30尾/斤。
8月17-19日，天气一直多云，正常投喂，未发现虾异常。
8月20日，晴，气温明显升高。下午五点塘主电话反映池塘内忽然发现死虾，死亡4斤左右，希望到现场处理。傍晚六点左右，利洋技术员到达现场，观察死虾肌肉白浊（图2），尾扇（图3）和游泳足（图4）内有气柱。池塘水色较浓，呈黑褐色，哈希溶氧仪检测水中溶解氧含量“爆表”（图5）。
带水样和虾样回店做进一步检测，镜检虾尾扇（图6）和游泳足（图7）内有大量气柱，无其它明显病灶，快速水质测试盒测得水体pH值9.0，亚硝酸盐0.07mg/L。
根据症状和水质情况初步诊断对虾突发死亡可能是气泡病引起，马上加大换水量，降低藻类丰度；使用“永乐碘”1瓶/亩，防止继发细菌感染，加重死亡；外用抗应激产品减少应激。
8月21日，多云，捞死虾2斤左右，都不是新鲜死亡的虾。
8月22日，多云，客户反映没有新增死虾。
之后，对虾没有出现异常，恢复正常。
分析：1、发病池塘面积小，水浅，大菱鲆养殖排出的水有很多残饵、粪便等，导致对虾池“肥料”较足，加上天气较好，藻类大量繁殖，水中溶解氧严重过饱和，引发对虾急性气泡病死亡。
2、对虾急性气泡病以中小规格对虾发病为主，像这样大规格虾发病死亡比较少见，因为处理及时，没有造成大量损失。（利洋水产药店行村店林琳童2019.11.28）
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[每周一例]池塘总硬度高引起南美白对虾“长毛”
[病例535]福建福州福清市江镜镇俞老板，有一南美白对虾养殖土塘（图1），面积2亩，水深80公分左右，最深处可达1米。2019年5月初，放养虾苗20万尾，至11月初对虾规格约35尾/斤。
11月8日，晴，上午10点30分客户带水、虾上店检查，使用水质简易试剂盒测得池塘水质指标：pH值8.8，氨氮0，亚硝酸盐0.1mg/L，总硬度1800mg/L。镜检水中以裸藻为主，少量硅藻和绿藻。病虾体表手感粗糙，其头胸甲、附肢等部位均有白色物质附着（图2、图3），镜检鳃部和附肢等均可见不透明沉淀物（图4），当地俗称“长毛”。客户反映：昨天并未出现这种情况，今天上午对虾体质差，摄食慢，有少量趴边，体表均大量附着白色物质，增氧机的固定绳上也有附着。据了解，在江镜河区、农场芦华区等区域，也有许多池塘出现类似的情况。
当天上午使用“碧水安（加强型）1kg”3亩/瓶，下午使用“氧速保”8亩/瓶，同时配合使用“利菌多Ⅲ”6亩/瓶＋“三环活力源（净水型）”3亩/包。
11月10日，客户反映：对虾表面附着的白色物质均已消失，附肢沉淀物明显减少（图5），池塘中白色物质也基本消失。
分析：1、福清地区水体总硬度高，加之近半年来当地降水量小，多数池塘水质较浓，遇到大晴天后，藻类光合作用强，使得水中碳酸根离子增加，与钙、镁离子形成沉淀，附着对虾体表后形成“白毛”。
2、“碧水安”为多元有机酸，可与碳酸盐沉淀反应，有效溶解白色沉淀；“氧速保”可清洗虾身，促进蜕壳，增加“白毛”的处理效果；“利菌多Ⅲ”+“三环活力源（净水型）”富含大量有益菌，可有效控制藻类数量，降低pH值，减少碳酸根形成。（利洋水产药店江镜店靳坤坤提供2020.03.12）
[每周一例]南美白对虾感染肝肠胞虫（EHP）,零星死亡
[病例526]广东中山阜沙黄老板养殖南美白对虾，池塘面积5.5亩（图1），水深1.5米，2019年8月4日放“一代苗”50万尾，之后过塘出苗25万尾，余下约有14万尾。分塘后早期养殖一直有死虾，每天1-2尾。10月中旬虾规格80～90尾/斤。
10月13日至14日，降温，连续两天吹北风，未见明显倒藻。
10月15日，在下风口发现有少量白便（图2），早晨见底罾死虾增多至7-8尾，对虾吃料没有减少，每日3餐共计45斤。
10月17日至18日，拌料内服“氟苯尼考”+“营养快线”，连续2天。
10月18日，到塘头从料罾取15尾肠胃饱满的正常虾（图3），抛网取13尾肉眼见外观异常的虾，即空肠或空胃，部分肠胃也较满但手摸虾体发软，瘦弱，活力差，似棉花虾的前期症状（图4）。分别从虾样的肝胰腺组织分离细菌，划线接种于胰蛋白胨大豆琼脂培养基（TSA培养基），室温条件下培养48h；取虾样的鳃、肌肉、肝胰腺组织，用95%酒精固定，送实验室进行PCR检测；取肝胰腺、肠组织用波恩氏液固定做组织病理切片观察。
结果显示：培养48h后，接种肝胰腺组织的培养基有少量菌落长出（图5），经鉴定多为希瓦氏菌属、弧菌属。槽式PCR检测正常虾样组肝肠胞虫（EHP）的检出率为60%（9/15），异常虾样组为77%（10/13）；正常虾样组白斑综合征病毒（WSSV）检出1尾阳性，异常虾样组2尾阳性；肝胰腺细小病毒（HPV）、传染性皮下及造血器官坏死病毒（IHHNV）、虾血细胞虹彩病毒（SHIV）均呈阴性。
病理组织切片观察显示正常虾样肝胰腺组织均不同程度自溶，可见有肉芽肿20%（3/15）及虾肝肠胞虫13.3%（2/15），肝肠胞虫位于肉芽肿坏死灶内和上皮细胞胞质内；肠道组织多数正常，仅有一尾虾肠腔内有大量脱落细胞（图6）；异常虾样肝胰腺组织严重萎缩，大量腺管崩解、腺管间细胞增生，可见有肉芽肿61.5%（8/13）及虾肝肠胞虫53.8%（7/13），部分样品肉芽肿坏死灶内除有肝肠胞虫，还有大量细菌；肠道组织多数正常，部分组织增生，上皮脱落（图7）。
10月下旬开始每天用“营养快线”（多种维生素等）+“LY-生命素”拌料保健，同时加强改底、增氧。
11月上旬回访，池塘一直每天有少量几尾死虾，与其它池塘比较吃料没有明显异常。
分析：1、本案例南美白对虾虽然没有表现出吃料明显减慢，也没有发生严重死亡，但部分严重感染肝肠胞虫的虾瘦弱、发软，肝脏形成肉芽肿（坏死），零星死亡，异常天气或水质剧烈变化时，死亡量增加。
2、组织病理切片显示对虾肝胰腺有大量肉芽肿，是虾体本身启动的防御机制，肉芽肿灶心内有大量肝肠胞虫，部分肉芽肿内有大量细菌，说明发病虾肝胰腺坏死（肉芽肿）与感染肝肠胞虫或继发细菌感染有关。（利洋公司技术部王林锁张吉鹏唐绍林利洋水产药店阜沙店黄一明李明响提供2019.11.7）
[每周一例]“白便”南美白对虾感染虾肝肠胞虫，“慢食”、死亡
[病例525]广东珠海斗门区横山一南美白对虾养殖池塘（图1），池塘面积6.5亩，水深1.5米，水源为地下水，盐度为2‰-3‰，配备6台1.5kW叶轮式增氧机。2019年6月26日，放养“一代苗”39万尾。
进入三伏天以后，连续有10-15天闷热，7月30日左右，发现有白便漂浮于水面。出现白便前增氧机附近水浑，池塘边上水较肥，虾规格约100尾/斤。
8月2日，下雨，泼洒1瓶“优肽”，1kg“低聚糖500”拌料60-80斤料内服，连续5天。
8月4日，水浑浊度下降，逐渐变肥，由于下雨降温，连续3天浮便少一些，但仍有浮便。
8月5日，开始升温，白便又增多，虾吃料减慢。
8月6日，持续高温，白便继续增加，早上虾吃料明显变慢。抛网刮虾观察，有10%-20%的虾出现异常症状。肉眼观察健康虾肠胃都饱满（图2）；轻微发病的虾空肠不空胃（图3）；发病严重的虾空肠空胃，体色发黄或微红（图4），零星几尾出现“白肠”，肠道有白色粪便（图5）。解剖见：健康虾肝胰腺形状完好，与周围组织界限清晰；发病虾肝胰腺发白，不成型、“一汪水”的样子。
从池塘取虾样44尾，其中肉眼观察健康虾13尾，轻微发病虾13尾，严重发病虾18尾。分别从虾样的肝胰腺、肠、胃组织分离细菌，划线接种于胰蛋白胨大豆琼脂培养基（TSA培养基），室温条件下培养24h；取鳃、肌肉、肝胰腺组织，用95%酒精固定，送实验室进行PCR检测；取肝胰腺、肠组织用波恩氏液固定做组织病理切片观察。
结果显示：培养24h后，接种肠胃组织的培养基长出大量的优势菌落，接种肝胰腺组织的培养基几乎无菌落长出（图6）。普通PCR检测健康虾样组肝肠胞虫（EHP）的检出率为30%，轻微发病虾样组为69%，严重发病虾样组为94%；白斑综合征病毒（WSSV）、传染性皮下及造血器官坏死病毒（IHHNV）、虾血细胞虹彩病毒（SHIV）均呈阴性。观察虾样从健康到严重发病的组织病理变化为：肝胰腺组织由正常或轻微萎缩到严重萎缩；腺管崩解、腺管间细胞增生数量由少到多；肝胰腺组织中观察到肝肠胞虫数量由零星可见至大量可见（图7）；肠道组织未见明显变化，部分轻微增生，部分肠上皮增生，有的虾肠腔内有疑似肝胰腺脱落的肝肠胞虫（图8）。多数对虾肌肉、肝脏、心脏等组织可见大小不等的气泡。
8月16日，连续几天均为高温天气，虾吃料慢，死虾增多，但白便现象增加不明显；塘主担心继续养殖死亡量更大，提前卖虾。
分析：1、本病例根据外观症状人为把检查的对虾分成三组即健康、轻微发病、严重发病，普通PCR检测结果肝肠胞虫（EHP）的检出率与健康状况密切相关；组织病理切片观察肝胰腺内肝肠胞虫的数量变化和病变严重程度也密切相关，说明肝肠胞虫感染与对虾发病有相关关系，感染率越高或强度越大，发病越严重。
2、本次调查的白便虾与之前调查的白便虾组织病变特征有所不同（见【病例218-220】），肠道组织并没有出现明显的细胞增生，水面漂浮的白便也不多，提示虾肝肠胞虫可能可以引起南美白对虾发生“白便”，但并不引起肠道病变，也没有引起严重的白便症状，更主要的是对肝脏的直接损伤。
3、本案例细菌分离培养结果与之前研究结果都显示白便虾肝胰腺鲜有细菌分离培养出来，肠胃组织中的细菌无明显的规律性，细菌在本案例中起到的作用还不明确。（研究所一室戚瑞荣刘健全技术部唐绍林王林锁张吉鹏2019.10.31）
今年市场普遍反映白便严重，造成大量养不成的情况。我们起初是抱着调查白便的目的去调查，药店也认为是池塘发生了白便，实际结果很少的白便虾，水面很少的白便，不是以前调查的典型的白便病理特征，通过实验室检测和病理观察而是肝肠胞虫造成的危害。
因为本次调查彻底颠覆了我们对肝肠胞虫危害的认知，会连续发3个调查相关病例，有不同的亮点，揭示其在目前对虾养殖中的危害，对我们认识目前土池塘“白便”高发、养不成功的原因，以及今后如何健康养殖有参考价值。
组织病理切片观察见到“多数对虾肌肉、肝脏、心脏等组织可见大小不等的气泡”，气泡病（已经发生了形态结构的变化，可以称为病）已经成为对虾养殖的常态，严重程度不同、发生频率不同，对具体的案例的危害程度不同，在这个案例中起到什么作用，难以确定，可能加重了肝肠胞虫病对虾（体弱、身软、瘪瘪瞎瞎、干干巴巴）死亡。
[每周一例]疑似气泡病引起小龙虾肌肉发白
湖北省洪湖市螺山镇螺山村有一口18亩的稻田养虾池，四周环沟，做有内埂，沟中水深1.5米，坂田水深0.5米，埂子上长满水花生、水游草，1台4寸的抽水泵，小龙虾自繁自育，养小龙虾苗。
2019年6月10日停止起捕虾苗，虾苗状态正常。
6月18日，小雨转大雨，22-30℃，死亡10余尾。
6月19日，小雨转阴，19-26℃，死亡10余尾。
6月20日，多云，16-26℃，死亡10余尾。
6月21日，多云，15-22℃，死亡10余尾。下午2点客户上店反映，今天开始起捕虾苗，发现虾苗肌肉发白，贩子不收，水色偏绿，每天投料1包。用简易测试盒检测水质指标：pH值8.3，亚硝酸盐0，氨氮0，总碱度100mg/L，溶解氧未检测;镜检水样有大量蓝藻;将客户带来的病虾随机挑选5只(规格80尾/斤)，取肝胰腺、肌肉、肠等组织用波恩氏液固定做组织病理切片观察。
6月25日，使用3瓶“优肽(冻干粉)”，据客户反映小龙虾死亡量一直不大，22日-25日每天死亡10余尾，每天投喂1包料，吃料正常。
6月30日，回访，塘口已经降水位，开始种水稻，沟里水色依然发绿，没有看到死亡上浮的小龙虾。
组织病理切片结果显示：肌肉组织均可观察到气泡或者气柱，肌束萎缩，肌纤维弯曲、断裂，组织较杂乱，肝胰腺组织腺管轻微萎缩，肠较正常。
分析：1、一般6、7月份雨后，小龙虾出现这种肌肉发白的情况较多，肌肉发白的严重程度不同，一段时间后池塘这类发白虾的数量会减少，一般不会出现明显直接大量死亡。
2、水位浅、坡位置多，水肥、水浓、蓝藻暴发，水环境差、水草开始明显腐烂等的池塘易发;通过病理组织切片观察，发病小龙虾的肌肉组织均可见气泡或气柱，结合流行病学特征，怀疑小龙虾肌肉发白是气泡病引起。
[每周一例]南美白对虾肝肠胞虫（EHP）和肝胰腺细小病毒（HPV）混合感染
[病例527]广东省中山市阜沙镇一南美白对虾养殖池塘（图1），面积11亩，水深1.6米，2019年7月28日放南美白对虾虾苗34万尾，放草鱼20余尾。10月初对虾规格约65尾/斤。
10月初以前南美白对虾一直吃料稳定，每天正常加料1～2斤，时不时看到“罾尾”有1-2尾虾的肝胰腺萎缩，空肠空胃。
10月8日开始慢料，在底罾忽然发现死亡4-6尾，抛网观察虾较多空肠空胃，怀疑缺氧，马上刮虾销售，卖虾2600斤，刮虾时发现虾体质较弱，网没有插电也容易上网。
卖虾后池塘估计还剩余800～1000斤虾，继续养殖。但吃料一直加不上去，保持10多斤料的量，晚上一直有小规格的虾爬边。
10月18日抛网检测池塘剩下的虾多数体色偏黄，肠道细，肝胰腺上白膜发黄，有些肝胰腺不同程度萎缩；约1/3的虾肠胃不饱满或空肠或空胃，有的肝萎缩或肠道有水气，有的瘦软，虾无力或活力差；下风口有少量白便（图2）。
取虾30尾虾，其中15尾外观较健康（图3），15尾外观异常的虾（图4），接种肝胰腺划线于胰蛋白胨大豆琼脂培养基（TSA），室温条件下培养24h；取肝胰腺用95%酒精保存，送实验室做PCR检测肝肠胞虫和病毒；取肝胰腺和肠组织固定于波恩氏液中用以做组织切片进行组织病理观察。
结果显示：常温下细菌培养48h后，健康虾组1/15尾虾肝胰腺长出较多的细菌，异常虾组4/15尾虾肝胰腺长出菌落，利用副溶血弧菌特异性基因tlh鉴定为副溶血弧菌阳性（图5）。槽氏PCR检测结果显示，健康虾组中虾肝肠胞虫（EHP）检出率为20%（3/15），异常虾组为46.7%（7/15）；健康虾组白斑综合征病毒（WSSV）阳性率为6.7%（1/15），异常虾组为阴性；传染性皮下及造血组织坏死病毒（IHHNV）、虾血细胞虹彩病毒（SHIV）均为阴性。
组织病理切片观察结果，健康虾肝胰腺组织均有不同程度的自溶，但仍可见有肉芽肿26.7%（4/15）及虾肝肠胞虫20%（3/15），肝肠胞虫位于肉芽肿坏死灶内和腺管上皮细胞胞质内；另外，腺管内观察到肝胰腺细小病毒（HPV）包涵体13.3%（2/15）；肠组织未见显著异常（图6）。异常虾肝胰腺组织病变严重，腺管严重萎缩，大量崩解，腺管间大量的细胞增生，可见处于不同时期的肉芽肿78.6%（11/15）及虾肝肠胞虫57.1%（8/15），有些肉芽肿灶心已呈干酪样坏死；还观察到大量的肝胰腺细小病毒（HPV）包涵体50%（7/15）；肠道组织多数正常，部分上皮脱落，其中一尾虾肠腔内有大量的虾肝肠胞虫（图7）。
11月4日，近期一直每天在底罾有少量几尾死亡，降温，卖虾。
分析：1、本病例南美白对虾感染虾肝肠胞虫后表现出吃料差，外观瘦弱、干瘪，活力差等症状，平时零星死亡，蜕壳期或缺氧、天气或水质剧变后死亡量增加（参见【病例】525-526）。虾肝肠胞虫（EHP）PCR检出率越高、组织病理观察病变越严重，对虾发病越严重。
2、组织病理观察发现，除了在肉芽肿坏死灶的灶心有大量的虫体聚集，也有大量HPV包涵体的出现，据资料HPV主要危害幼虾，本病例对虾规格较大，发病对虾HPV包涵体数量比“正常虾”多，说明可能HPV和虾肝肠胞虫共同引起肝胰腺萎缩和坏死。（研究所一室戚瑞荣李德意卢恩秋，技术部唐绍林张吉鹏王林锁提供2019.11.14）
[每周一例]罗氏沼虾、南美白对虾混养塘发病，检出虾血细胞虹彩病毒
[病例03]福建省漳州市龙海市浮宫镇一南美白对虾、罗氏沼虾混养池塘，面积5.5亩，平均水深1m，配备1台1.5kW的叶轮式增氧机、3台0.75kW水车式增氧机。2018年9月15日一次性放罗氏沼虾16万尾，18日一次性放南美白对虾(二代苗)25万尾。10月30日盖冬棚。养殖到2019年1月12日，罗氏沼虾平均规格达45尾/斤、南美白对虾平均规格达120尾/斤。
2018年11月15日，南美白对虾开始出现问题，少量虾到水面吃泡沫，游水。
2019年1月份以来，该地区以阴雨天、雾天为主。
1月5日，养殖户查料时从料台中发现有南美白对虾偷死虾，随后南美白对虾开始大量偷死，两天后罗氏沼虾开始出现偷死，截止1月12日，南美白对虾偷死40斤左右，罗氏沼虾偷死30斤左右。发病期间，用过多种改底、调水及消毒药，效果均不明显，养殖户开始陆续抓虾。
1月12日下午1点到该养殖池塘现场调查，当天死亡南美白对虾约5斤，罗氏沼虾约3斤。测定水温22.7℃，水质指标：pH值8.7、氨氮测不出、亚硝酸盐0.05mg/L、溶解氧6.75mg/L。从塘中的料台取4尾罗氏沼虾及6尾南美白对虾，外观发病虾多数发蓝，个别虾体色微微发红，罗氏沼虾额剑基部下方组织有“白点”症状。从所采取的4尾罗氏沼虾的肝胰腺接种进行细菌分离培养，并取罗氏沼虾和南美白对虾分别用95%酒精和波恩氏固定液固定保存，带回实验室做病毒检测和组织病理切片分析。
结果：采取的4尾罗氏沼虾未分离到病原菌。利用实验室建立的PCR方法进行检测，采集的10尾虾白斑综合症病毒(WSSV)、罗氏沼虾诺达病毒(MrNV)均呈阴性，虾血细胞虹彩病毒(SHIV)都呈阳性。组织病理切片结果显示肝胰腺轻度萎缩，腺管崩解，个别样品水肿、淤血，有增生，可见胞质包涵体;肌肉萎缩、断裂，个别坏死;鳃组织淤血、出血，轻度水肿。
1月12日当天用地笼抓虾120斤，随后几天陆续出虾，池塘中养殖虾密度降低后，死虾逐渐减少，到1月18日，基本无死虾。
分析：1、罗氏沼虾和南美白对虾混养池塘，两种虾先后发病死亡，从病虾的症状和实验室诊断结果初步诊断都是虾血细胞虹彩病毒病引起的(见【病例488】)。
2、本病例中放养密度大以及该地区长期阴雨天，导致池塘水质不稳定，可能是该病的诱发因素，降低密度后死亡量下降。
河蟹塘套养青虾气泡病大量死亡一例
江苏省苏州市东山镇张老板一口60亩河蟹套养青虾塘，平均水深60cm，环沟水深80cm左右。无增氧机（见图1）。四周环沟面积约35亩，种植伊乐藻并有部分老塘草；中间田坂面积约25亩，围圈种植轮叶黑藻，圈里没有放养青虾、河蟹。2017年1月6日放养河蟹6万只,平均规格40只/斤，套养青虾1300斤，平均规格3cm/尾。
2017年3月26日，阴天下雨，气温15℃，上午10点测得其他塘的水温13℃左右。
3月27日，天气转晴，张老板巡塘，未发现异常。
3月28日，天气晴朗，气温18℃，张老板未到塘口巡查。
3月29日，天气晴朗，气温20℃，张老板下午3点在塘口发现大量死虾（见图2），伴有上网、游边的现象（见图3）。到塘边用简易测试盒检测水质指标：pH值9.0、氨氮无、亚硝酸盐0.05mg/L；在死虾较多的下风口（西南角）测得溶氧16.36mg/L，氧气饱和度170%，水温17.5℃（见图4），下风口可见大量白色泡沫（见图5）。池塘东南角测得溶氧12.04mg/L，氧气饱和度123.6%（见图6），死虾相对较少。镜检青虾，发现头胸甲和步足中有气泡（见图7、图8）。
3月29日晚上建议养殖户加水，并使用“碧水安”解毒。
3月30日，阴天转雨，水温14.4℃，测得溶氧9.10mg/L，饱和度83%（见图9），用简易测试盒检测水质指标：pH值8.2、氨氮无、亚硝酸盐0.05mg/L观察青虾死亡量减少，游边减少。利洋技术人员建议割草，张老板采纳。
3月31日，小雨转晴，气温13℃，青虾零星死亡，上网、游边现象明显减少。
分析：1.种草养蟹模式，养殖早期天气变化大、水位浅，雨过天晴，水温骤升，老塘水草生长旺盛，光合作用产氧能力强，水体溶解气体过饱和，导致青虾体内形成气栓，大量死亡。
2.加水降低了水体溶解氧的饱和度，割草有助于减弱水草的光合作用，并搅动底泥消耗一定量的氧气。加之下雨，水温降低，气体溶解度升高，饱和度降低，青虾死亡数量明显减少。（利洋水产药店吴中店杨峰许先翔提供2017.04.13）
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