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人工授精是用器械采集公羊的精液,经过精液品质检查和一系列处理后再将精液输入发情母羊的生殖道内,从而达到使母羊受胎的目的。它与自然交配相比有以下优点:①扩大优良种公羊的利用率和使用年限。②大量节省购买和饲养种公羊的费用。③提高母羊的受胎率。④减少疾病的传播,人工授精时公、母羊不直接接触,而且所用的器械经过了严格消毒,大大降低了发病率。
一、采精前的准备
采精前,应做好各项准备工作,如采精器械和人工授精器械的消毒,种公羊的准备和调教,台羊的准备,假阴道的准备等。
1.凡是可能与精液接触的器械均应消毒处理,输精器械用2%碳酸氢钠或1.5%碳酸钠溶液反复冲洗后再用清水冲洗2~3次,最后用蒸馏水冲洗后置于室内,自然干燥;毛巾、台布、纱布、盖布等用肥皂水洗涤后,再用清水冲洗几次;最后再用高压蒸汽灭菌。假阴道用棉球擦干,再用70%酒精消毒,连续使用时可用96%酒精棉球消毒。集精瓶、输精器先用70%酒精消毒,再用0.9%氯化钠溶液冲洗3~5次,连续使用时先用2%碳酸氢钠溶液洗净,再用开水冲洗,最后用0.9%氯化钠溶液冲洗3~5次。玻璃器械用蒸馏水洗净后,于120℃左右的烘箱中烘干消毒。开膣器、镊子、瓷盘等可用酒精火焰消毒。
2.种公羊的准备与调教。配种前30~45天,一方面要排除公羊生殖器中长期积存的衰老、死亡和解体的精子,促进种公羊的性机能活动,产生新精子;另一方面要对公羊精液品质进行检查,及时掌握精液品质状况,如发现多次采精精液品质均较差的情况,及时采取其他补救措施。最初每天可采精1次,以后每两天采精1次,每次均应取样进行品质鉴定。初次采精的种公羊,在配种前30天左右开始有计划地进行调教,方法是把发情母羊的阴道分泌物涂抹在公羊鼻上或把公羊牵到发情母羊的围栏外刺激其性欲,加强饲养管理,坚持每天按摩其睾丸,并保持适当运动量。
3.台羊的准备。对公羊来说,台羊是重要的性刺激,是用假阴道采精的必要条件。台羊应选择健康无病、体格较大的发情母羊。如果是经过多次采精训练的公羊,没有发情的母羊也能引起其性欲。采精前,先将台羊固定在采精架上。
4.假阴道的准备。安装假阴道之前,首先检查所用的内胎有无损坏和砂眼,确认完整无损后先放入开水中浸泡3~5分钟。新内胎或长期未用的内胎,必须洗净消毒后方可使用;工作人员要剪短并磨平指甲,以免划破内胎,再用酒精棉球消毒双手。安装假阴道时,先将内胎装入外壳,内胎光滑面朝上,露出外壳的两头要求等长,然后将内胎的一端翻套在外壳上,同样的方法套好另一端,注意不要使内胎发生扭转,也不要拉得太直太紧,两端再分别套上橡皮圈固定。用酒精棉球由内向外彻底消毒内胎,待酒精挥发后再用生理盐水擦拭。在假阴道一端安装消毒过的集精瓶。安装好假阴道后,左手握住假阴道的中部,右手用烧杯将温水(水温50~55℃)从外壳的灌水孔注入,水量约为外壳与内胎间容积的1/2~1/3(竖立假阴道,水位达灌水孔即可),再装上带活塞的气嘴,并将活塞关好。随后,用消毒过的玻璃棒取少许凡士林,由内向外在内胎表面均匀涂抹一薄层,涂抹深度以假阴道长度的1/2为宜。最后,从气嘴吹气,用消毒过的温度计插入假阴道内检查温度,以采精时40~42℃为宜。温度适宜后吹气加压,使假阴道口呈三角形,松紧适度。
二、采精
牵引公羊到采精现场后,人为控制其几分钟后再让其爬跨台羊,这样不仅可以增强公羊的性反射,也可提高射精量和精液品质。采精步骤如下:①采精人员右手紧握假阴道,用食指、中指夹好集精瓶,使假阴道气嘴活塞朝下,蹲在台羊的右后侧。②待公羊爬跨台羊且阴茎伸出时,采精人员用左手轻拨公羊包皮(勿触龟头),将阴茎导入假阴道(假阴道应与地面呈35)。③若假阴道内的温度、压力和润滑感适宜,公羊很快就会射精。当公羊后躯急速向前一冲,表明已经射精。此时,顺公羊动作向后及时取下假阴道,并迅速将假阴道竖立,安装有集精瓶的一端向下。④打开活塞上的气嘴,放出空气,取下集精瓶,用盖盖好并保温(37℃水浴),待检查。
种公羊每天采精次数以4次为宜,上、下午各两次,一般不能超过5次。连续采精时,第一次与第二次应间隔5~10分钟,第二次与第三次应间隔30分钟以上,让公羊有一定的运动时间。()初配公羊每天采精次数不应超过两次。采精应在喂完料、运动1小时后进行。连续采精5~6天应休息1天。
三、精液品质的检查
精液品质的检查,是保证人工授精效果的一项重要措施。主要检查项目和方法如下:
1.射精量。用一次性注射器或带有刻度的输精器测量。羊的射精量一般为0.5~2毫升,平均为1毫升左右。每毫升精液中精子数量为20亿~50亿个。
2.活力。精子活力是指精液中直线运动的精子所占比例。一般采用五级评分的办法:全部精子做直线运动,则评为五级(1);80%左右的精子做直线运动,评为四级(0.8~0.9);60%左右的精子做直线运动,评为三级(0.6~0.7);40%左右的精子做直线运动,评为二级(0.4~0.5);20%左右的精子做直线运动,评为一级(0.3以下)。在人工授精中,鲜精的活力低于四级,一般不能用于输精。
3.密度。通常与精子活力同时检查。精子密度一般分为密、中、稀三级。在200~600倍的显微镜下观察,如精子密布整个视野,精子之间无空隙,即为密;精子之间有明显的空隙,距离为1~2个精子的长度,即为中;如果视野中只有少数精子,精子之间的空隙超过2个以上精子的长度,即为稀。在视野中没有看到精子的,用无标记。一般用于输精的精液,其精子密度至少是中级。
四、精液的稀释
稀释倍数根据精子的活力、密度和待配种母羊的数量而定。稀释后的精液,每毫升有效精子数不得少于7亿个。精液与稀释液的温度必须保持一致,以防精子因温度的剧烈变化而死亡,可将精液与稀释液同用30℃左右的温水预热5分钟左右。稀释时,用消过毒的带有刻度的注射器将稀释液沿着精液瓶缓慢注入,然后用玻璃棒缓慢搅动以混合均匀,切忌把精液倒入稀释液中。稀释后要进行精子活力检查,若活力较差要分析原因。
稀释液应能抑制精子活动,减少能量消耗,延长精子寿命,常用的有:①生理盐水稀释液。用经过灭菌消毒的0.9%氯化钠溶液作为稀释液,优点是简单易行,缺点是稀释倍数不宜过高,保存时间不能太长。②葡萄糖、卵黄稀释液。于100毫升蒸馏水中添加葡萄糖3克、柠檬酸钠1.4克,溶解后过滤,蒸汽灭菌,冷却至室温,再加新鲜鸡蛋黄20毫升、青霉素10万单位、链霉素10万单位,充分混匀。稀释液要求现配现用。
稀释好的精液根据各输精点的需要分装于安瓿瓶中或分装成细管精液,用数层纱布包好置于4℃左右的冰箱中保存,但精液稀释后要及早输精,以保证受胎率。
五、输精
1.准备工作。在人工授精前,应做好适当的准备工作,保证输精过程快速、准确、连贯,尽量缩短精液在羊体外存留的时间。①输精器械的准备。输精所有可能用到的器材如玻璃输精器、开膣器、输精管等,均要消毒灭菌。②输精人员的准备。输精人员穿工作服,剪短指甲,双手洗净擦干后用75%酒精消毒,再用生理盐水冲洗。③授精母羊的准备。把发情母羊牵到输精架上保定,并将其外阴部擦洗干净、消毒。生产中,可采取一人背对羊头骑于母羊背上,抬起母羊的两后肢,其余人帮助固定好母羊以便输精。④精液的准备。常温或低温保存的精液,要在温水中升温到35℃左右,并在显微镜下检查其活力,符合要求才能输精。
2.输精。输精人员按母羊阴门的形状和生殖道的方向缓慢插入开膣器,然后转动90打开开腔器。借助手电光线寻找母羊的子宫颈口,将输精器前端缓慢插入子宫颈口内0.5~1.0厘米,用拇指轻轻推动输精器的活塞,注入精液。一次输精的有效精子数应保持在7500万个以上,因此需要原精液0.05~0.1毫升或稀释精液0.1~0.2毫升。输精后的母羊应休息10分钟左右,不要立即驱赶或放牧,并注意观察是否有精液倒流。
(作者联系地址:重庆市荣昌县观胜种羊场邮编:402460)
相关知识
蜂王人工授精技术
蜂王人工授精技术是一种借助器械给蜂王进行人工配种的技术,运用此项技术不但可以准确无误地使处女王和选定的雄蜂交配,而且还可进行在自然状态下根本不可能发生的交配行为,如母子回交、父女回交、单雄授精等。蜜蜂人工授精技术广泛用于原种保纯繁育,培育近交系,杂交制种以及品种的提纯复壮等方面。
一、雄蜂和处女王的选择
雄蜂的质量关系着授精后蜂王的质量,与发育充分,体质健壮,无病害等优质雄蜂受精后,蜂王不但开产的时间早,而且产卵旺盛,维持正常产卵的时间也长。捕捉雄蜂的时间最好在中午12时之后至15时之前,在蜂群的巢门口选参加婚飞归巢的雄蜂。性成熟的雄蜂行动敏捷,进巢迅速,因此,须在巢门口设置隔雄栅等障碍,才易于捕捉,凡腹部坚实又较小的,多数是性成熟雄蜂。腹部松软的,较大的,多未成熟。婚飞归巢的雄蜂兴奋度较高,捕捉时若指力过大或受到压挤,其体内阳茎则立即外翻并射精,所以要注意轻拿轻放。
授精前要对处女王进行选择,一般是以个体大,腹部硕长,行动稳健活泼的处女王为佳。适宜处女王授精最佳时期为10~13日龄,也就是说处女王出房后10~13日。如果授精过早,由于处女王未到性成熟期,虽然已经授精,但精子转移到蜂王贮精囊的速度较慢,精液在蜂王输卵管内滞留时间较长,授精蜂王迟迟不能产卵,有的精液在蜂王输卵管内变质导致蜂王死亡。若授精过晚,处女王在核群及框式王笼内时间过长,影响核群及框式王笼的使用效率。
二、仪器设备及消毒灭菌方法
主要仪器设备有实验台、药品柜、蒸馏水器、体视显微镜(工作距离100毫米左右)、生物显微镜(1600)、蜂王人工授精仪、微量注射器、高压灭菌锅、雄蜂笼、酒精灯、电炉、二氧化碳钢瓶、胶管、常用玻璃器皿、注射器及日常用品。
实验室地面用5%来苏儿喷洒消毒;实验室空间则用紫外线灯灭菌15分钟。实验台面用75%酒精擦拭。耐高温的授精器械和附件用高压灭菌锅灭菌15~20分钟,不耐高温的器械用75%的酒精擦拭或灌洗灭菌。塑料注射针头等用酒精消毒灭菌后,再用无菌蒸馏水加压冲洗5~6遍。
三、采集雄蜂精液及注意事项
采集雄蜂精液前先强迫排精。当一切准备工作就绪时,在飞翔笼中捉出飞翔有力,腹部较坚实的雄蜂,通过手向腹部尾端施加压力,使腹腔的血淋巴挤压内阳茎,迫使阳茎渐次外翻。当阳茎球末端冒出淡黄褐色精液时,停止挤压。在加压时用力要稳妥,切勿操之过急,如用力过大,容易导致精液飞溅或阳茎球破裂。同时还要注意不要让外翻的阳茎球及精液接触到雄蜂体表面及操作者的手指,以及造成污染。随即用微量采精器采集球面上的精液。首先将采精器吸入一小段空气,使稀释液与精液有气泡相隔,以免精液混入大量稀释液。但吸入的气泡不能太大,如果吸入空气较大,在采集精液或以后授精过程中受到阻力时;空气会膨胀和压缩变形,给采集精液或授精带来不便,采集精液时,针尖要贴紧精液的表面,但又不能过深,以免将黏液吸入。
采集完第一只后,再采集下一只雄蜂精液时,将前一只雄蜂精液推出针尖外一少部分,使其与准备采集的精液面相接触,这样既可防止吸入空气,又可减少吸入黏液的机会。一旦发现吸入黏液要尽快排出,哪怕是稀黏液也不可以混入精液吸入针头内。因为黏液不仅会堵塞针头,如注射到蜂王侧输卵管后会凝固而堵塞输卵管,这样不仅影响精子进入贮精囊,而且还会造成蜂王死亡。采集精液结束时,针头内仍然要吸入一段空气,再用稀释液封口,以免针口因精液凝固而堵塞。
四、授精及操作要求
授精要求进针角度合适,部位准确。生殖道无损伤,操作过程无污染,授精量足,操作速度快。
首先把装有处女王的麻醉室固定在授精仪的麻醉室固定夹上,并调节工作距离,同时移动授精仪(或显微镜)使处女王的腹部呈现在视野中央,调节至清晰为止。待处女王通过麻醉进入昏迷状态时,移动授精仪的背、腹钩操纵杆,打开交配腔。这时,将背钩伸到蜂王螫针鞘基部,并让它嵌入基部的三角缝内。背钩嵌入后,再一次调整背、腹钩,把背腹板的距离拉开。此时即可看到交配腔中央靠近螫针鞘基部有一皱褶开口,该开口就是荫道口,移动注射器,排去针头前端的保护液及气泡,继而施动纵向导轨使针尖接近荫道口,将荫道探针插入荫道//致富经//,压住荫道瓣突,使荫道口扩张。再调节纵向导轨使针尖沿着探针的背部徐徐进入荫道,直至中输卵管,取出探针。当进针深度达1.8毫米时,略感到受到阻力后停止进针,然后将针头稍退出一点,开始注射精液。一次性授精通常注射8微升;二次性授精每次各注射4~5微升精液。第一次与第二次授精间隔时间为24~48小时。注精完毕,稍待10~15秒后退出针头,卸下麻醉室,小心退出蜂王,给蜂王作上标记,待苏醒后送回原核群。
五、授精蜂王的管理
授精蜂王的管理,是指授精后至开始产卵这段时间的管理。蜂王人工授精是人工操纵器械完成的,蜂王没有经过婚飞,虽然进行了授精,但是人工授精后的蜂王仍然会飞出巢外进行自然交尾活动。因此,必须采取相应的管理措施,防止蜂王再次自然交尾。目前控制人工授精蜂王出巢再交尾,多数是采取在小核群的巢门口安装隔王珊或脱粉片的方法,控制蜂王飞出巢外。
种鸡人工授精技术
采用人工授精是提高种母鸡受精率、种公鸡利用率和降低生产成本的最佳途径,特别是在种鸡场的生产和育种过程中发挥着举足轻重的作用。因此,种鸡人工授精已成为现代养鸡业不可缺少的一项应用技术。
一、种公鸡的挑选
采用人工授精技术,公母比例可由自然交配的1∶10降至1∶25,另留10%的公鸡备用即可。选留的种公鸡外貌、体重、体形和性成熟特征必须符合品种的要求。种公鸡配种前要进行调教,根据精液密度和质量做进一步筛选。确定参与配种的种公鸡要剪尾羽、扒转肛门周边的羽毛,以便于采精。
二、采精准备
操作工具(输精管或输精枪,枪头,采精杯等)必须清洗干净,放入消毒柜中烘干,并保持30分钟以上。操作员要换上消毒后的工作服,洗净并消毒双手,不给细菌、病毒侵入鸡体的机会。
三、人工采精
人工采精一般由1名采精员和1名辅助员共同完成。辅助员将消毒好的采精杯、棉签、输精管(或输精枪)、枪头从工具箱中取出,并用手掌盖住采精杯口,尽可能地避免室内的灰尘和污物进入杯中。采精员从鸡笼中提出种公鸡并对其肛门周边进行消毒,然后用双腿夹住公鸡的双脚,左手放在鸡体肛门位置,右手从鸡颈部顺背部向尾部按摩。辅助员将准备好的采精杯递给采精员,采精员用左手的食指和拇指夹住采精杯,右手把肛门打开并用力挤压,左手迅速用采精杯接住挤出的乳白色精液。在采精的过程中,辅助员必要时可将公鸡的翅膀拉开,以利于采精员的操作,特别注意的是采精杯内不能有粪便或其他污物侵入。
四、精液品质鉴定
种公鸡的射精量一般在0.3毫升以上,射精量低于0.3毫升或精液品质低下的种公鸡应及时隔离饲养甚至淘汰。通常用显微镜在鸡舍中现场鉴定精液,每毫升精液的精子数量要达到30亿个以上,精子活力应在0.8以上。
五、人工输精
人工输精一般需要两个翻肛员与输精员配合进行。翻肛员用右手从笼中拉出母鸡的双脚压于食指下,左手拇指与食指连翻带压将母鸡的肛门翻开并现卵巢,翻肛员身体要稍偏,以便于输精员迅速将精液用输精管或输精枪输入母鸡卵巢中。翻肛员要注意翻出的卵巢位置要正,并且放松。输精员要注意取精液量(0.03毫升)准确并迅速注入,同时要防止输精管或输精枪伤害鸡体,并确保精液不漏出。两人翻肛一人输精能提高劳动效率,在较短的时间内完成输精,使受精率更高。
总之,要提高种鸡人工授精的受精率,首先要有合理、均衡的营养基础作保障;其次要有严格的消毒措施和规范的操作程序;再次要合理使用种公鸡(每5天采精1次),以确保精液品质良好,对预留的种公鸡也要按时(每6~7天)采精废弃,保证种公鸡的生理正常;最后还要注意输精的时间要适宜,通常在14:30之后进行人工输精,并根据种鸡的产蛋时间和气候调整。
(作者联系地址:贵州省贞丰县小屯乡畜牧兽医站邮编:562205)