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在生产季节分离出好的小球藻种类，然后接种在培养基上保藏。培养基有固体和液体两种，但以固体最为常用。固体培养基的制作成分有营养液、凝固剂和杀菌剂。营养液的配方及配制方法见后面介绍，但使用浓度应高1倍。凝固剂为琼脂，使用量为1%～5%。杀菌剂多用抗生素，如青霉素、链霉素等，使用量一般视保种时间长短而定。制作方法是按上述要求量取定量的营养液，再加注过滤海水(盐度16左右)到额定配制量，放于大三角烧瓶中，用电炉烧开，然后加入定量的琼脂溶解，分装于试管、小三角烧瓶或克氏扁瓶内。装好后用医用棉或锡纸封口，高压杀菌。待却冷后在无菌条件下接种(接种前加入杀菌剂)。
接种有喷雾接种和接触接种两种。喷雾接种将配制好的藻种母液用杀菌处理后的小喷雾器均匀喷到培养基表面即可；接触接种可用接种环沾取少许藻种母液用划线法均匀涂于培养基表面。所有操作过程严格控制无菌作业。接种后立即密封，进行保种培养。保种培养根据保种时间确定保种培养条件，主要 为温度和光照。若在5仁的低温和弱光下保存，其保藏时间可长达1年多。
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真鲷开口饵料的种类及投喂量
真鲷仔鱼开口至全长15毫米这一阶段的培育以轮虫作饵料效果最佳，但轮虫应有所选择，而且在投 喂前要经过营养强化。轮虫应选择其》 部长在200～260微米大小的种类。强化培育的方法是在投喂前24 小时用面包酵母和脂肪酵母强化，具体做法随后介绍。
当仔鱼孵化3天后，长到全长3毫米时马上投喂轮虫。初期投喂量为每立方米育苗水体内有8个轮虫即可，每天投喂2次，早8～9点和下午16～17点各1次。每次投喂前取育苗池水样，用显微镜检查残饵量。做法是每次取水样50毫升，用电磁搅拌器搅拌1～2分钟，然后用1毫米移液管取1毫升水样全部滴于玻璃培养皿上，连续移3次，3毫升水样每毫升1滴，3滴分离，最后每滴水样上滴上少许碘酒固定，用显微镜观察，并用计算器计数。计算出每毫升水样中的平均残饵量，再换算出每立方米育苗水体内的残饵量。在下次投饵时，将每毫升水样内的轮虫密度补充到5个即可。当仔鱼长到5毫米左右时，每天投饵次数由2次增加到3次，上午8点、中午11点、下午17点各1次，每次投饵量保持在每毫升育苗水体10个；做法如前。当仔鱼长到12毫米以上时，除按原量投喂轮虫外，另外加投卤虫无节幼体，每次保持每毫升育苗水体0.5个；做法与轮虫相同。当仔鱼全长达到15毫米时，应为出池转入稚鱼培育作准备。人工饵料用磷虾或野杂鱼肉加添加剂，用绞肉机制成鲜肉末，每天早晚各投喂1次。做法是每次取少许，约10～15克抹于医用纱布制成的小纱网上，吊于池内即可，每平方米水面吊1个纱网.
蚯蚓粪与卵茧分离的方法
蚯蚓在箱养和大型养殖床中的蚓粪与卵茧需要分离，分离方法有以下几种。
1，框漏法
对经过几次加料，成蚓密度大，卵茧数量多，饲料已基本粪化的养殖床，把蚯蚓和粪粒一起装入底部有1．2厘米X1．2厘米的铁丝网的大木框，利用蚯蚓避光的特性，在光照下，蚯蚓会自动钻到下层，然后用刮板逐层把粪粒和卵茧一起刮人料斗车，直至蚯蚓通过网眼、钻人下面新饲料为止。然后，把粪粒和卵茧移人孵化床，在适宜温、湿度条件下，经3040天，卵茧全部孵化，并长成幼蚓后，再继续采用上述框漏法，把幼蚓与粪粒分离，幼蚓进入新养殖床粪粒经风干、筛选、化验和包装成为有机复合肥料供应市场或白用。
2．饵诱法
当养殖床基本粪化后，采取以下方法：
(1)停止在表面加料而在养殖床两侧添加新饲料；
(2)将成蚓诱人新饲料中，待绝大部分诱出以后，再将含有大量蚓茧的老饲料床全部清出，然后再把老床两侧的新饲料和蚯蚓合并，清出的蚓茧和蚓粪，移在放有新饲料的养殖床表面进行孵化；
(3)待幼蚓孵出后，进入下层新饲料层采食，然后把上层的蚓粪用刮板刮出，进行风干，过筛包装作有机肥料。
3．刮粪法
利用光照，使蚯蚓钻人下方，然后用刮板将蚓粪一层一层刮下，刮到最后蚯蚓集中在养殖床地面。取出的蚓粪和卵茧移人孵化床进行孵化培养。幼蚓孵出后，用同法再进行分离。
甲鱼的饲料及种类
甲鱼养殖主要吃的植物饲料包括玉米、小麦、大豆、小米、稻谷、各类饼、青饲料中的瓜果、蔬菜、水生植物等。建议在甲鱼饲料中添加一些可以提高促增长、提高免疫力的饲料配方，海肽宝是一款专门针对甲鱼养殖的效果非常不错的饲料配方，海肽宝产品是北海群林生物工程有限公司利用发酵技术，以海洋鱼类、优质豆粕为主要原料，通过发酵酶解有效地降解蛋白质为小分子蛋白和小肽，最大限度地消除大豆蛋白中的脲酶、胰蛋白酶抑制因子、凝血素、大豆球蛋白、－伴球蛋白、植酸等抗营养因子，并可产生大量益生菌、乳酸、未知生长因子等物质。具有适口性好、消化吸收快，促生长的功效，是高效、经济、绿色、环保的饲料原料和饲料添加剂。
海肽宝是一种高级的饲料浓缩料。加入海肽宝后，可以达到如下效果。第一、诱食性极佳。第二、促进消化提高饲料的利用率。第三、提高抗病能力。第四、改善水质。第五、促进生长，降低养殖成本。
海肽宝的添加量和使用方法
1、添加量建议在1-10%，目前很多用户添加1%效果已经很明显了，有些客户为了增强甲鱼的抵抗力，加大效果。添加量在5%以上。总的来说，添加量大一些。效果更好一些。
2、使用方法
拌料，替代的方式加入，如添加量是1%，则100斤饲料中有1斤海肽宝，99斤商品饲料，搅拌均匀后投喂。
说明：有些养殖户只喂商品饲料，有些则只喂小鱼虾，有些是喂一些小鱼又加点商品饲料，无论您是喂什么原料，只要在原料饲料中按一定的比例加入海肽宝即可，如添加量是5%，则100斤饲料中含有5斤海肽宝就对了。
以上效果及使用方法是经过大量的养殖户使用后得出的结论。如果您有兴趣使用我们的海肽宝，欢迎对比。另外，海肽宝可以替代一半的进口鱼粉，如果您是饲料生产企业，欢迎把海肽宝作为一种原料加入到配方中生产，这样养殖户不用拌料。省时，效果还很好。相信您的饲料能大卖。
机制配合饲料
这种由国内外各个厂家生产并标有营养成分含量的机制饲料，因其配比量以高蛋白鱼粉为主，粗蛋白含量较高。机制饲料的优点是蛋白质较稳定，制作精细，易保存、运输，营养基本能满足某阶段生长的需要。缺点是许多添加物不明确，维生素性质不稳定，盐度略高，单独使用不能满足特殊生长阶段的需要。
如温室的甲鱼种暴长期，因钙磷不足和维生素不稳定而出现裙边卷、腹甲下陷、背甲弯曲和互相撕咬等现象。所以机制饲料可作人工配合饲料时的基础饲料添加比为50%-80%，并定期添加保健剂及多维矿物质，确保营养之均匀完整及代谢吸收。
活饲料
鲜活动物饲料包括肉联厂分离的动物内脏、各种海鲜、淡水鱼及人工培养的黄粉虫、蚯蚓、大型水蚤、蚌类、蝇蛆、蚂蚁、猪牛肉和鲜蛋类等，只要是鲜活无毒的，都可用为甲鱼的饲料。鲜活动物饲料的优点是适口好，易消化吸收，且活性蛋白能促进性腺发育和卵细胞的生长发育。
在以机制饲料为主的甲鱼饲料中，添加一定比例鲜活动物饲料，可降低机制饲料的盐度和某种有害成分的浓度。缺点是不易保存，易变质，帮用时必须现采现用。鲜活动物性饲料在我国城乡都能采购到，且价格较机制饲料便宜。所以这类饲料在甲鱼饲料中的配比地位十分重要，配比比例一般为10%-50%。鲜嫩植物饲料包括无农药污染的农家蔬菜、鲜嫩的水生、陆生饲草和一些瓜果野菜。这灯饲料中不但有丰富稳定的维生素，还有抗病防病的药用功能。
如柑橘汁在甲鱼苗发病期结合其他药物治疗时，因其含稳定的维生素C成分起到很好的协助作用。还有温室甲鱼苗长期添加适量的苹果或胡萝卜汁对其生长有很好的促进作用。这类饲料易采购，有条件的地方也可种植。配合比例一般为5%-20%。
牛奶的保藏温度与细菌变化规律的结果与分析
为了研究牛奶的保藏温度与细菌的变化规律,笔者将鲜牛奶、煮沸牛奶和市售消毒牛奶保存于室温及4～8℃冰箱条件下,对其进行细菌总数、大肠菌群最可能值(MPN)及pH值的测定.下面一起来了解一下：牛奶的保藏温度与细菌变化规律的结果与分析。
结果表明，以市售消毒牛奶保存时间最长（4～8℃冰箱中72～96h，室温下36～18h）；煮沸牛奶次之（4～8℃冰箱中／18～72h，室温下18～2／1h）；鲜牛奶最短（4～8℃冰箱中2／1～36h，室温6～9h）。
随着社会的进步和生活水平的不断提高，牛奶及乳制品已逐渐成为人类生活的基本需要。“一杯牛奶，强壮一个民族”，即是牛奶及乳制品营养作用在人类生活中地位的最好体现。同时正是凶为牛奶及乳制品营养丰富、配比合理，使之成为各种微生物生长的良好基质。微生物在牛奶及乳制品中生长发育，既有可能改善这些食品的质量，也可造成其腐败变质，甚至可能传播某些疾病，对人类的健康造成危害。因此，牛奶及乳制品在生产过程中，尤需注意微生物的变化情况及其保藏温度，防止其变质。为了探讨鲜牛奶、煮沸牛奶及市售消毒牛奶在不同保存温度下细菌总数、大肠菌群最可能值(MPN)及pH的变化规律，进行了本项研究。现报告如下。
1、材料和方法
1.1鲜牛奶的采集与处理
鲜牛奶来源于动物科学系基地的牛场。2016年2月20日下午2点挤乳，先挤去前部分的乳汁，采集后部分的乳汁，混匀过滤，分装于灭菌的三角瓶中，塞上棉塞，包扎，带回实验室。分别置于4～8℃冰箱中及室温条件下保存，待检。
1.2煮沸牛奶的采集与处理
来源于动物科学系基地的牛场。把刚挤回的鲜牛奶加热到沸腾，分装于灭菌的三角瓶中，塞上棉塞，包扎，分别置于4～8℃冰箱中及室温条件下保存，待检。
1.3市售消毒牛奶的采集与处理
由超市购得某奶牛公司生产的消毒软包装牛奶，其配料为鲜牛奶和白砂糖，经巴氏杀菌法消毒，生产日期为2016年2月20日。带回实验室后分装于灭菌的三角瓶中，塞上棉塞，包扎，分别置于4～8℃冰箱中及室温条件下保存，待检。
1.4细菌总数的测定
先将待检的乳样摇匀，用灭菌生理盐水按10倍递增法进行稀释。鲜牛奶选择10-5和10-6两个稀释度，煮沸牛奶选择10-2和10-8两个稀释度，消毒牛奶选择10-2和10-3两个稀释度。各取1mL上述稀释度的乳样于90mm平皿中，每个稀释度作了2个平皿，稀释液移人平皿后，即时将凉至45℃的营养琼脂培养基倾注入平皿内约15mL，并轻轻转动使其均匀，待琼脂凝固后，倒置于37℃温箱中培养48h，取出，计算菌落数，并求得两组的平均数，最后换算成活细菌总数(个／m6。
1.5MPN的测定
1.5.1
MPN的测定程序（见图1）
1.5.2培养基的制备
乳糖胆盐发酵管（单料）、伊红美蓝琼脂平板、乳糖发酵管等按常规方法制备。
1.5.3乳样处理
鲜牛奶取10-1、10-2、10-3三个稀释度进行MPN试验，煮沸牛奶及市售消毒牛奶取原液、10-1、10-2三个稀释度进行MPN试验。
1.5．4结果判定
根据证实为大肠菌群阳性的管数，查MPN检索表，并依据表内所查得的数值报告每100mL大肠菌群的最可能值。
1.6酸度的测定
通过pH值的高低来反映，摇匀后可直接取样，用pH试纸测定。
1.7试验设计
1.7.1鲜牛奶
将其保存于室温和1～8℃冰箱中，于O、3、6、9、12、18、24、36、48、72、96、120、168h等时间点测定细菌总数、MPN和pH值。
1.7.2煮沸牛奶
将其保存于室温和4～8℃冰箱中，于O、6、12、18、24、36、48、72、96、120、168h等时间点测定细菌总数、MPN和pH值。
1.7.3市售消毒牛奶
将其保存于室温和_～8℃冰箱中，于O、12、24、36、48、72、96、120、168h等时间点测定细菌总数、MPN和pH值。
2.、结果与分析
2..1鲜牛奶
鲜牛奶的细菌总数、MPN及酸度测定结果详见表1。
国家标准规定：生牛乳中每毫升的细菌总数≤106个，每100mL的MPN≤500个，pH值的正常范围是6.5～6.7。
由表1可见，鲜牛奶在室温下保存6～9h后就变质；而在4～8℃冰箱中，可保存2／1～36h。
2..2煮沸牛奶
煮沸牛奶的细菌总数、MPN、及酸度测定结果详见表2。
国家标准规定：煮沸可直接饮用的鲜牛奶每毫升的细菌总数≤3×101个，每100mL的MPN≤90个，pH值的正常范围是6.5～6.7。
由表2可见，煮沸牛奶在室温下保存18～24h后就开始变质，而在4～8℃冰箱中则可保存／18～72h。2.3市售消毒牛奶
市售消毒牛奶的细菌总数、MPN及酸度测定结果详见表3。
国家标准规定：消毒牛奶中每毫升的细菌总数≤3×101个，每100mL的MPN≤90个，pH值的正常范围：6.5～6.7。
由表3可见，市售消毒牛奶在室温下可保存36～／18h，而在4～8℃冰箱中则可保存72～96h。3小结与讨论
本试验对鲜牛奶、煮沸牛奶和市售消毒牛奶等三种不同的奶样进行研究。结果表明，市售消毒牛奶无论在室温还是在4～8℃冰箱中，其保存时间均是最长，这与其软包装的特点和要求有关。
新挤出来鲜牛奶一般含菌数较少，但受不同挤乳用具、容器、牛体及牛舍空气等不同程度的污染，凶此混合乳中细菌数变化很大。本次试验的鲜牛奶来源于动物科学系基地的牛场，挤乳前先用温水刷洗乳房，挤乳桶清洗的干净，牛舍环境较好，故该牛场出售的鲜牛奶污染较小，细菌总数(1×105个／ml.)、MPN3)及pH值均符合国家标准。
鲜牛奶在室温下保存，从O～6h这一时期，细菌总数有着较慢的增长。刚挤ILIJ的鲜乳存在细菌抑制物质，在一定时期内细菌数增长慢；而到了9h时，鲜牛奶中的细菌便迅速增殖，细菌总数已超过国家标准，鲜牛奶开始变质。在一定时期内，室温下保存的鲜牛奶的MPN逐渐增大，到了12h时达到了繁殖高峰期（140个/100mL）；从18h开始到168h，MPN又慢慢减少；鲜牛奶的酸度，在O～6h内，pH值均≥6.5，属于正常范围，从9h开始，pH值下降，酸度升高，而当pH值下降到一定程度又开始慢慢回升，这是凶为在乳的真菌期，乳中酸性环境被中和，乳由酸性变为中性或弱碱性。
煮沸牛奶是把刚挤ILIJ来的鲜牛奶加热到沸腾，而市售消毒牛奶经过了巴氏消毒，热敏感菌被杀死，故细菌总数显著减少，保存期延长。市售消毒奶的MPN-直是小于3个／100mL，这是凶为经过巴氏消毒后，大肠菌群全部死亡。
本试验仅选用了两个不同的保藏温度（室温和4～8℃冰箱）。保存于室温中，温度适宜，有利于各种细菌的繁殖；保存于4～8℃冰箱中，适于室温下繁殖的细菌被抑制或生长缓慢，而嗜冷菌数量又非常少，故鲜奶腐败变质的速度比较缓慢，保存期长于室温。试验结果也充分证明了这一点。
综上所述，保藏温度对细菌生长的影响很大，而保藏前的处理也很重要。延长保存时间，防止牛奶变质，最佳的方法就是先把刚挤回来的鲜牛奶热处理，冉进行消毒杀菌，尽可能减少所含细菌数，并在最快的时间内放置于4～8℃冰箱中保藏。
犊牛腹泻病中细菌的分离鉴定与药敏试验
犊牛腹泻是一种常见的犊牛病症、引起犊牛腹泻得病因有多方面，有管理因素（喂初乳过晚，喂犊牛的奶温过低，喂奶不经稀释直接喂牛犊，喂奶没有定量，环境以及气温突变）。根据对洛阳地区牛场的调查，在排除其它病因后，对腹泻犊牛进行细菌的分离与鉴定，并做了药敏试验，以便挑出敏感药物，进行针对性治疗。菌株分别取自白马寺、升升乳业、洛宁王村、偃师、伊川高山等地养殖场犊经过病原菌的分离鉴定，发现有一头牛是大肠杆菌和沙门氏菌的混合感染，其它七头为大肠杆菌感染，有两头为非细菌性感染。分析的原因有两点：一，由于养殖户的知识有限，他们不能科学合理的使用抗生素；二，由于细菌本身发生了变化，特别是它们能够获取其它耐药菌株的耐药基因。
一、大肠杆菌的生物学特性
大肠杆菌是肠杆菌科中一组革兰氏阴性，无芽胞，除少数例外为周身鞭毛，能运动，兼性厌氧，发酵葡萄糖，分解乳糖的细菌。本菌是一切温血动物肠道后段常在菌。肉食兽与杂食兽肠道中携带本菌的数量，远比草食动物多。部分菌株具有致病性和条件致病性，引起肠道疾病或肠道外感染。
大肠埃希氏菌大小为1.1-1.52.0-6.0，两端钝圆，有的近似球杆状，不行成芽孢，有鞭毛，运动或不运动，多数菌株有荚膜或微荚膜。一些菌株的菌体表面有一层具有黏附性的纤毛，黏附性纤毛是一种毒力因子。
1.犊牛腹泻病
近年来，随着奶牛业的快速发展，犊牛腹泻病已经成为关系到奶牛业兴衰的一种疾病，犊牛腹泻指的是正在吃奶的小牛出现腹泻的一种病症，一般在出生一个月内发病最高，多侵害出生后两周内的犊牛，一年四季均可发生，本病是造成犊牛生长发育不良和死亡的主要疾病之一，是新生犊牛的杀手，约占犊牛发病率的80%。
2.犊牛腹泻病的危害
洛阳地区的牛厂为洛阳市民和周边人民提供优质的牛肉和牛奶，犊牛的健康率和成活率直接影响着人民的健康和农民的增收，这段时间犊牛的腹泻发生率明显上升，给养殖户带来了很大的经济损失，本文旨在确定发病原因，测定分离细菌对药物的敏感性，筛选出敏感的抗菌药物，从而为洛阳地区的犊牛腹泻病的有效防治提供科学的依据。
3.犊牛腹泻病的主要病因
目前知道引起腹泻的病因是多方面的，有管理因素（喂初乳过晚，喂犊牛的奶温过低，喂奶不经稀释直接喂牛犊，喂奶没有定量，环境以及气温突变）。有生物性因素（细菌性因素，包括大肠杆菌和沙门氏菌等等），寄生虫因素有绦虫、蛔虫、球虫；还有营养性因素，Va缺乏引起下痢。但是，总体来说在生物因素引起的犊牛腹泻在临床上占的比重相对较大。
二、临床表现
精神沉郁，食欲减退或废，全身被毛粗乱，腹部紧缩，尾根及后驱被粪便污染，排稀便。长期腹泻者，两侧肋部凹陷，极度消瘦，步态蹒跚，起立困难，脱水，粪便成水样，腥臭，有时附加黏液或血液。
三、诊断
诊断原则：根据流行病学，临床症状和剖检变化可做出初步判断；确诊需要实验室检查，用实验室病原检查方法，在排除其它病原感染（病毒、细菌、寄生虫等）经鉴定为致病性大肠杆菌，也可认为是原发性大肠杆菌，在其它原发性疾病中分离出大肠杆菌时，应视为继发性大肠杆菌。
四、预防
引起大肠杆菌的因素很多，比较复杂，大量临床资料表明：环境因素不良、饲养管理不善、混合感染是当前大肠杆菌病流行的重要因素，因此，需要采取综合性的措施。
五、治疗
大肠杆菌主要经消化道感染，而且耐药菌株广泛存在，所以针对性的选折一种吸收好，无耐药性的抗菌素是确保治疗效果的关键。目前较为简单和有效的药物筛选程序如下：从牛的粪便中分离致病大肠杆菌，进行增殖培养；选着多种吸收率高的抗菌素制备药敏片；利用分离的大肠杆菌进行药敏试验，选出抗菌性最高的一种或多种药物，进行单个投药试验，确定最佳治疗药物和方案，选择合适的用药途径投药。药酶抑制剂是目前解决耐药性大肠感染的有效途径，在做积极的临床药物筛选的同时，适宜的选择含有药酶抑制剂产品可以发挥事半功倍的作用。
六、结果与分析
1.病犊牛症状
精神委靡，食欲废绝，体温高达39.5℃-40.5℃，全身被毛粗乱，腰拱起，走路摇摆，腹部紧缩，尿量减少，肛门外翻，周围粪便污染，排稀便，灰白色，腥臭。
2.致病性试验结果
把分离菌的肉汤培养物腹腔接种给小白鼠，分十组，每组两只小白鼠，接种A1A2C1的三组小鼠共6只，在24小时内死亡；接种B3aE1E2的三组小鼠共6只在72小时内死亡；接种D1D2的二组小鼠共4只，在72小时后死亡；接种B1B2的二组小鼠没有死亡。对照组小鼠则安全无恙。无菌采取病死小鼠的心、血、脾肝进行细菌分离鉴定，涂片、镜检，可见革兰氏阴性的杆菌。接种腹水的营养琼脂培养基上，生长的菌落形态基本符合大肠杆菌的形态特征。说明从腹泻犊牛的粪便中分离的大肠杆菌为致病性大肠杆菌。
3.药敏试验
将分离的大肠杆菌，经麦氏比浊法确定1毫升菌液中含有3亿个杆菌。取菌液0.3毫升（相当于一亿个杆菌）均匀涂布与平板上，用镊子将药敏片平放在平板上，并轻压，使其紧贴在平皿表面，37℃培养18小时，观察结果。
七、讨论
通过对不同地区采集的五个牛场的10头腹泻犊牛粪便进行细菌分鉴定，得到了十株疑似大肠杆菌和一株疑似沙门氏菌，经形态特征、染色特征、培养特征、生化鉴定等综合分析，确定分离菌株为大肠杆菌和沙门氏菌。致病性结果表明：强致病性大肠杆菌毒株有3株，中等毒力有3株，低致病性毒力菌株有2株，分别占分离菌株数的30%、30%和20%。另有两株为非致病性大肠杆菌，这两头牛也许是病毒感染或寄生虫等非细菌性感染，由于时间和目的的要求，没有做进一步的试验。