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(1)阴干、流水刺激法:将经室内蓄养亲贝两次挑选,选择生殖腺饱满,颜色鲜艳的成熟个体,置于室内阴干6~8小时。然后按雌雄比为3∶1搭配,分别盛入网箱中,并系上泡沫浮子放入育苗池中,注入过滤海水进行流水刺激,经一段时间后更产卵、排精,并受精发育。
(2)解剖取得精卵,然后用0.08~0.1氨海水处理,进行人工授精,受精率为60~80%。
(3)注射氢氧化铵溶液,也可引起不同程度的产卵、排精,但效果较(1)、(2)差。
(4)酵母水浸泡,也可引起不同程度的产卵、排精,但效果不如(1)、(2)。
排放时间一般都在凌晨,水温开始回升,光线由暗变亮时排放。
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(1)受精卵的处理
受精卵受精后由于精子过多,要进行洗诳2~3次,加入新鲜海水进行发育。
(2)选幼
受精卵经几次细胞分裂,进入担轮虫期后,采用虹吸和拖网法将其移入他池。
(3)日常管理
达到D形幼虫后,开始投喂叉鞭金藻和扁藻,并进行换水,充气等管理工作。D形幼虫初期1~2天采用逐渐加水方法,幼虫长至壳长100m以上时,采用对流换水或循环水换水,日换水量1/2~1,换3次。早期幼虫的铒料以叉鞭金藻为主,结合投放牟氏角毛藻,日投饵量10000~50000个/ml,壳顶幼虫阶段以扁藻为主,日投饵量3000~5000个/ml。
(4)育苗水质情况
每天测定水温2次,测盐度、pH和溶解氧、氨氮各一次,育苗期间水质变化情况为水温26.8~29.6℃、盐度24~31,pH值为8.1~8.4,溶解氧6.10~7.30mg/l。
(5)投放附着基
即将结束浮游期而进入底栖生活的匍匐幼虫壳长和壳高为510500m时,D幼经20天浮游生活后,开始出现面盘萎缩,足出现并不断地爬行,此时可投放附着基。附着基以网目1.5~2.0mm的筛绢做成采苗袋,内装少许直径2.0mm左右的粗砂作附着基;采苗效果好。也可投放塑料片、旧网衣、棕绳等附着基,均可附苗,但效果不如前者。 投放附着基后要加大换水和投饵,保持水质新鲜,因稚贝生长速度很快,15天后可达10mm,可直接将采苗袋移出海区暂养或养殖。
广东鲂受精卵孵化
(1)孵化合适条件
人工受精卵经脱粘剂处理后即可放入孵化环道池孵化。环道池的设计与家鱼的相同。最好为室内环道池。这样可以控制昼夜温差不致过大,减少畸型率。孵化的最适水温24~28℃,临界水温上限31℃、下限20℃。受精卵的密度以 80~100万粒/m 3 较合适。水流速原则上是能使胚胎半浮状流动。因广东鲂胚胎膜厚,水流速比家鱼孵化稍大。水进入环道池前需经筛绢过滤,以防桡足类等大型浮游动物进入环道池。因广东鲂仔鱼个体比家鱼更细小,更容易受水蚤等敌害所伤。
(2)环道池仔鱼的管理
仔鱼孵出后尚需在环道池经数天培育才能出池转入池塘培育(俗称出花)。由于广东鲂仔鱼十分娇嫩易死,故在鱼花阶段的操作管理与家鱼有较大的不同:
①据实验分析,广东鲂仔鱼发育过程有一个内、外源营养混合期。即在肉眼尚未能分辨仔鱼出膜点(鳔)时,仔鱼已开始摄取外源营养物(卵黄囊尚未完全消失)。这时应在环道池投喂熟蛋黄浆(经过滤),喂后不久可见仔鱼体中部出现黄点,一般投喂2~3d,早、中、晚各1次。待腰点明显后第二天才将鱼花出池(按以往对家鱼鱼花认为这是属于老花)。经这样处理的鱼花体质特别健壮,可大大降低鱼花出池死亡率;
②收集鱼花时不能用网布拉收,否则鱼花过度密集会大量死亡,而应先把环道池的水位降低些,然后用小盆将鱼花舀出一部分,待环道池鱼花密度减少后才让鱼花随水放出,流入接花池的网箱内;
③装运鱼花时不能在吊花网池中密集鱼花用小杯等过数,否则鱼花因缺水密集而很快大量死亡,只能带水装入尼龙袋充氧运输,这是很重要的一环。
受精卵在水温24~28℃条件下,28~37小时孵化出膜。当鱼花能活泼游动,腰点明显,就可进行鱼花运输和鱼苗培育。广东鲂鱼性娇嫩,鱼花更甚,很易死亡。出鱼花时要谨慎操作。据笔者实践做法,当鱼苗刚出腰点,就应在环道中投喂蛋黄,1天2-3次,以增强体质,可大大提高鱼花出池成活率。出鱼花时,不宜密集,这与家鱼花的处理有很大的不同。
斑点叉尾鮰的受精卵孵化
斑点叉尾鮰受精卵的发育要比鲤科鱼类缓慢得多。水温在25.5~29℃时,出膜时间需115小时25分钟,从仔鱼到稚鱼期结束约需10天左右。受精卵要进行流水孵化,常用设备有环道、孵化槽和流水孵化水泥池等。目前我国常采用孵化槽。
孵化槽是一种长方形的带搅拌装置的孵化工具。该设备是根据天然水体中斑点叉尾鮰繁殖习性而设计的,采用水车式搅水器、转轴上带螺旋式叶片分布,转速每分钟28~30转,使槽内水体波动,借以增加溶氧及使卵块轻微摆动,还使水体内有机物随水波动向溢流管外排,并不断从进水阀中以10升/分的流速加注新水。孵化时要把卵块用12目左右铝丝网布编制的孵化篓盛装,悬挂水体中,每只孵化篓能容纳1500克左右的卵块。
孵化水温为20~30℃,最适水温为23~28℃,要求溶氧为6毫克/升以上,pH在6.5~8.0之间,孵化槽流速为10~15升/分,流水水泥池为20~25升/分。
孵化过程中要防止阳光直接照射鱼卵,应在环道和流水水泥池上盖上竹席、草席等,孵化槽应放在室内或工作棚内。卵块超过500克重时,应分开卵块,以免中间的卵粒缺氧窒息死亡,死卵、未受精卵要及时剔除,防止发霉。受精卵块的药物消毒是一项必不可少的工作。在眼点出现之前,每天上午要进行消毒一次。方法是将消毒液放入1个容器内,然后将盛有卵块的孵化篓放入液中浸洗,消毒后用新鲜水清洗一下后放回孵化槽中继续孵化。斑点叉尾鮰鱼卵消毒用药及时间为:细菌病用3毫克/升的高锰酸钾浸洗10~15秒;霉菌病用100毫克/升的福尔马林浸洗240~300秒。
鳖卵的收集及受精卵的鉴别方法
1.寻卵穴插标记:在亲鳖产卵季节,应由专人负责寻找卵穴。根据鳖的产卵习性,在黎明前后大都已产完卵离岸回到水中。所以,在日出前到产卵场和产卵沙盘及其周围寻找卵穴。亲鳖刚产卵埋过的卵穴,周围有新鲜沙土及放射状的爪印,卵穴上方经腹甲压实较平整,同时雌鳖自池中爬上爬下留下水湿的痕迹,由此即可确定卵穴的位置。上午8~9时经太阳照射后水湿痕迹就会消失,或者由于刮风下雨将雌鳖产卵的痕迹除掉,所以,一定要把握住寻找卵穴的时机。卵穴确定后要做好标记,以便集中采卵。
卵穴位置确定后不要急于挖卵,因刚产出的鳖卵,卵胚尚未固定,卵的动物极与植物极不易分清,过早的采卵震动影响胚胎发育。鳖卵产出后,应待8~30小时(视气温高低而定),鳖卵两极能够明显地辨别时再行移动。
2.采卵:采卵一般在当天下午5时以后开始。首先按标记将卵穴上层盖土扒去,将卵轻轻取出,再按动物极(卵顶有白点的一端)向上,植物极向下放入采卵箱,采卵箱(或盆)底铺2~5厘米厚的细沙或稻壳,用以固定鳖卵,在箱中排列整齐,注意动物极与植物极不要倒置,鳖卵之间要留空隙,不可堆叠,以免使卵受压,影响胚胎形成。当天的鳖卵采集完毕后。应随即将卵穴填平压实,清理平整后,再适量洒水,保持泥沙湿润。
采卵时注意不要把卵壳碰坏,如有卵壳碰坏的应即拣出。
3.受精卵的鉴别:卵绝大多数呈真球形;极少数呈椭圆形。刚产出的卵洁白,表面平滑,具有光泽。受精卵产出数小时后,卵壳顶上出现一圆形的白色亮斑,并不断扩大成白色的亮区。即是动物极,其胚胎正在发育,卵壳下部呈杏黄色。未受精的卵不出现亮斑,或仅出现亮斑但不再扩大,48小时后整个卵壳失去光泽,显得较粗糙,逐渐变成杏黄色。由于鳖卵是体内受精,只要卵子成熟较好,一般受精率达90%~100%。
由于亲鳖个体大小不同,性成熟的年龄和体质强弱不同,以及环境条件、饲养条件的不同影响,即使同一母体产出的一窝卵,受精率也有差别。所以,一定要注意反复观察每一个卵,是否受精,是未受精或受精发育不良的卵,应予拣出。否则未受精卵在孵化过程中会发生腐败,而影响受精卵的孵化。另外,应及时标记取卵时间,以便按时间分批孵化。
黄鳝受精卵的人工孵化技术
刚产出的卵呈黄色或橘红色,比重比水稍大,无黏性。卵吸水膨胀后,直径3.8~5.2毫米,卵重35毫克左右。成熟较好的卵吸水后呈球状,卵黄集中底部,吸水40分钟后,胚盘清晰可见。而成熟不好的卵,吸水后不呈球状,有的形成巨形卵,卵黄与卵膜界线不清,卵内可见不透明雾状物。
人工孵化最好在孵化缸或孵化瓶中进行。一个容积为0.25立方米的孵化缸可放入受精卵20万~25万粒。黄鳝受精卵的比重比水大,在天然条件下。受精卵借助于亲鳝吐出的泡沫浮于水面孵化。所以在人工孵化时,水流从孵化器底部进入,从上部溢出,使卵不致于沉入孵化器的底部。水温保持在25~30℃,温差应控制在±3℃以内。孵化期间,卵在孵化器中要避免堆积,以免被压在下层的受精卵窒息死亡。
胚胎在25℃水温下经18~22小时发育后,进入原肠期,便可观察卵的受精情况。但由于鳝鱼卵的卵黄丰富,若不经任何处理,很难用肉眼或显微镜看清,所以要待鉴别液透明后再置于显微镜下观察。鉴别液的配方是:福尔马林5毫升,甘油6毫升,冰醋酸4毫升,用蒸馏水配至100毫升即可。观察时,取出鳝卵,在鉴别液中浸泡3分钟后于显微镜下观察,如囊胚向下延伸,原肠形成,即可判断卵已受精。
在25~30℃的条件下受精卵经6天左右可孵化出膜。刚出膜的仔鱼,体长10~20毫米,侧卧于水底,出膜后5~7天,体长达到25~30毫米时,卵黄囊基本消失,色素布满头部,胸鳍、腹鳍退化消失,仔鱼开始正常游动和摄食,即可转入幼鳝池进行人工培育。
对于农村小规模的养鳝户来说,这是一种获得鳝苗的好办法。在每年的5~8月份是黄鳝的繁殖季节,稻田、沟渠、湖泊浅滩杂草丛生的地方及成鳝养殖池内,常可见到一些泡沫团状物漂浮于水面,即是黄鳝产卵的孵化巢,此时可用瓢、勺或桶等容器将其轻轻捞起,装在带淡水的桶中运回家中,在水缸、大木盆或其他大容器里进行静水孵化。孵化期间水温保持在25~30℃,并保持水质清新,6天左右可孵化出苗。
史氏鲟受精卵运输及孵化技术
一、材料和方法
1.孵化工具:采用筛网式淋水孵化器进行孵化,该孵化器由尤先科孵化器经适当改装而成,共4台,孵化槽规格为380厘米×60厘米×30厘米,内设4个孵化箱,每个箱内有一筛网盛卵箱,箱内可收容受精卵10万粒,每个盛卵箱上面有一个淋蓬喷头。外箱低处有一进水口,另一侧高处为出水口,进排水量为每分钟50~60升,箱底部设有自动拨卵装置,每分钟拨卵一次,每台孵化器可一次孵化受精卵40万粒。
2.受精卵包装:采用尼龙袋双层包装后置泡沫箱中,用胶带包扎封口。尼龙袋规格为口径15厘米×底径38厘米×长边77厘米×短边60厘米×厚8微米;泡沫箱规格为29厘米×39厘米×59厘米,侧壁厚2.5厘米,顶和底层厚3.0厘米。每袋装运密度为3万~5万粒。
3.水源、水质:孵化用水采用经充分曝气后的深井水,取水水层距地平面以下186米,将水泵入蓄水池,经蓄水池中配置的2.5千瓦增氧机连续增氧曝气后再引入孵化器。
二、结果
1999~2001年三年中,共引进史氏鲟受精卵247.2万粒,实际成活230万粒,运输平均成活率为93%,孵化出苗195.5万尾,平均孵化率为85%。
三、讨论
1.关于史氏鲟受精卵运输问题
(1)用于长途运输的史氏鲟受精卵的受精率必须在85%以上,受精率较低的受精卵,在运输过程中极有可能因死卵破裂或霉变,污染水质和波及好卵,导致成活率降低,即使是受精率较高的受精卵,也应在运输前剔除死卵。
(2)准确把握好运输时机,一般说史氏鲟受精卵,从史氏鲟胚胎发育至第四卵裂后,到破膜前这段时间均可运输,但必须在破膜前到达目的地,防止在运输过程中胚胎破膜引起水质变坏,且鱼苗脱膜后,对水质环境要求较高,运输过程中极易死亡。
(3)史氏鲟受精卵在运输过程中伴随着胚胎发育,而胚胎发育的适宜温度在14~22℃,因此,史氏鲟受精卵运输应将温度控制在这一范围,低于或高于这个温度范围均会影响到后期的孵化效果。
(4)为保证运输质量,一般应在运输中途设立中转站,将史氏鲟受精卵由产地运到哈尔滨机场时,途中时间已达12小时以上,氧气袋中的氧气消耗量已经很大,且水质也受到了一定的污染,此时,将氧气袋打开换水冲氧重新包装,这样可取得最佳运输效果,但应注意内外水温应保持一致,操作时应小心谨慎,以免破坏卵膜。
(5)受精卵到达目的地后,必须作“缓卵”处理,即先将受精卵包装袋放入孵化器用水中进行水温调节,约半小时后将受精卵连同原水缓慢倒入容器中,并缓缓加入孵化用水,在进一步调节水温的同时,着重调节水质,使受精卵适应新的水体环境。缓卵的时间根据温差及水质情况而定,一般不应超过3个小时。
2.关于史氏鲟受精卵孵化问题
(1)水温控制:史氏鲟受精卵胚胎发育低于11℃发育缓慢,在发育中大多已停滞;高于24℃时,胚胎发育加速,但畸形率高,最终导致全部死亡。因此,必须调节孵化过程中的水温,使水温保持在14~22℃之间,并且要求在某一温度区间保持相对稳定。
(2)水量控制:水量控制的原则是保证孵化用水中有足够的溶氧,及时排出胚胎发育过程中的废弃物,同时还应确保拨卵器的定时动作。不同孵化器的供水量的要求各不相同,淋水式孵化器供水量一般要求每小时3米3左右,孵化前期,胚胎的呼吸量小,随着胚胎的进一步发育,呼吸量不断加大,到出膜前期最大,因此,水量的调整,应根据胚胎发育过程中的实际需要,由小到大逐步调整。
(3)霉菌控制:孵化水温正适合水霉发生、发展的需要,水霉的着生地是死卵,孵化过程中如出现死卵,必须及时将其清理出去。清理的方法,一是采用虹吸吸出法,盛卵糟内由于水流的作用,死卵会集中在上层的某一部位,此时可用虹吸法将这一部位整体吸出到容器中,进行二次挑选,将其中活卵再挑回到孵化器中;二是采用漂浮去除法,将盛卵槽整体移出,浸到苗种培育槽中进行漂洗,待绝大部分死卵和着菌卵漂浮出去后,再将漂出好卵挑回到孵化器中,此方法适用于水霉发生比较严重的情况。其次,应进行定时消毒处理,一般采用停水消毒法,孵化开始后,每6小时,用亚甲基蓝消毒一遍,消毒时关闭供水系统,将亚甲基蓝均匀泼洒到盛卵槽中,使水浓度为3毫克/升,并保持15~30分钟后,开启供水阀门,重新供水,必须注意,当胚胎发育至心动期后应停止用药。
(4)出苗管理:受精卵经过80~100小时左右的孵化时间(因孵化水温高低而不同),开始陆续出苗,及时收集出膜仔鱼是采用淋水式孵化器孵化过程中的重要环节。当槽中出现仔鱼时,应用小碗或小抄网及时捞出,同时应注意整个出苗期应有较充足的水量,而且较平时要大些。此时卵、鱼的呼吸量都增大,要有较大量的氧气补充。此外水流量大也有利于鱼苗的收集。