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笔者在市场服务过程中发现,许多种鸡场在接种新城疫、传支等活苗时一直沿用饮水、滴鼻、点眼等传统方法。他们认为喷雾免疫对鸡群有一定的干扰,往往会加重慢性呼吸道疾病和气囊炎,且喷雾免疫要求技术太高,操作不当时达不到预期的免疫效果甚至免疫失败,导致严重的疫苗反应。其实喷雾免疫的诸多优势很多技术人员还不了解,如对呼吸道有亲嗜性的疫苗(鸡新城疫IV系弱毒疫苗和传染性支气管炎弱毒疫苗等),喷雾免疫效果特别好;喷雾免疫是模仿最初的病毒感染方式,产生局部免疫的保护时间比饮水和点眼来得快(喷雾免疫只需要3天,饮水免疫需要9天,点眼免疫则需要7天);早期用粗颗粒的鸡传染性支气管炎弱毒苗(Ma5株)喷雾免疫,可大大降低肾肿问题;应用喷雾免疫时不仅可刺激黏膜产生分泌型的IgA等,形成局部免疫力,而且可引起全身性的免疫应答,形成体内广泛而有效的免疫保护作用。由此可见,喷雾免疫法是一种值得推广的免疫方法。
一、喷雾免疫注意事项
1.在孵化场进行鸡传染性支气管炎弱毒苗(Ma5株)喷雾免疫时,一般在鸡盒上方约1米处喷雾,喷后3秒钟再把鸡盒盖上。如果喷雾后立即盖上盒盖,光线变暗会导致雏鸡缩脖,水珠就落到了鸡身上,特别是在冬天,运输时雏鸡很容易受凉。这个问题孵化场应加以重视。
2.降低舍内粉尘含量和增加湿度。舍内粉尘会黏附在疫苗雾滴上,并随之进入呼吸道,这样不但会引起呼吸道疾病,而且也降低了疫苗效力。因此,喷雾免疫前应加大通风量并保持3~5分钟,以降低鸡舍粉尘含量,保证舍内空气清新。在舍内干燥时(尤其是厚垫料平养肉种鸡时),在喷雾免疫前可先喷两遍水,水应喷成雾状,高度在1.7米左右,以沉降舍内空气中的粉尘,提高舍内湿度,同时结合试喷掌握合理的喷雾免疫速度。
3.减轻鸡群应激。避免在鸡群刚吃完料和饮完水后进行喷雾免疫,若出现应激惊群,对鸡群产生的损伤比空腹时更严重。喷雾不能与称重、转群、更换饲料等操作同时进行,并避免在天气突变时进行喷雾免疫。喷雾免疫必须在鸡群健康时进行,有减料、腹泻、降蛋等异常情况出现时应推迟免疫。对患病鸡尤其是感染呼吸道疾病的鸡只,可采用其他免疫方法免疫,否则不但不能产生理想的免疫效果,而且可能加剧呼吸道疾病的发生。
4.注意鸡群的日龄。日龄过小的鸡不宜进行喷雾免疫,因其免疫系统发育不健全,容易出现免疫副反应:20日龄前多是严重的呼吸道症状和一定数量的死亡,20~50日龄多是严重的呼吸道症状,50~90日龄表现一定的呼吸道症状,90~110日龄可能会有轻微呼吸道症状。产蛋期以后,基本没有呼吸道症状且对产蛋率的影响很小。随着鸡日龄的增加,喷雾免疫越来越安全。
5.免疫间隔和用药。喷雾免疫与其他免疫操作要相隔1周,尽量避免不同疫苗相互干扰。在喷雾免疫前、后7天内不得在饲料或饮水中投喂抗病毒药物,以免造成免疫失败。在喷雾免疫前、后1天内不能进行带鸡消毒,不可供给含消毒剂、清洁剂的饮用水。喷雾免疫前、后1天应给鸡只饮用0.1%维生素C或速溶复合维生素,同时添加抗菌药物如硫氰酸红霉素、氧氟沙星、氟苯尼考等,预防呼吸道疾病。
6.喷雾设备保养和人员保护。喷雾免疫设备要专用,不能兼作他用,特别不能用于喷雾消毒。机器用后用清水冲洗,擦拭干净,晾干后再存放起来。每次使用机器前一定要调试(/),尽量避免工作中途出现故障。在喷雾免疫操作过程中操作人员可能会吸入灰尘和疫苗,对人的呼吸系统造成伤害,所以必须戴好口罩。此外,为了防止手直接接触疫苗,还要戴好手套。
二、喷雾免疫时需控制的环境条件
1.保持舍内适宜的温湿度。当舍温超过30℃后疫苗的蒸发量加大,很多雾滴在到达鸡的头部之前就被蒸发,鸡群吸收的疫苗剂量不足,造成浪费较多,达不到理想的免疫效果;同样湿度过低会导致舍内灰尘量增加,灰尘与雾滴结合并迅速沉降至地面,也会影响免疫效果。因此,喷雾免疫时应使舍内的温度保持在18~24℃,相对湿度保持在70%左右。若湿度达不到理想要求,应先喷水补湿。在夏天炎热季节免疫,应选择早晨或晚上比较凉爽时进行,或采取降温措施后再进行。一般不要在环境温度低于4℃的情况下进行免疫。
2.关闭舍内门窗和通风系统。喷雾免疫时要关闭舍内门窗和通风系统,如在通风情况下进行免疫,空气流动势必影响疫苗吸入量,且大量疫苗雾滴会随风飘出鸡舍。喷雾免疫后15~20分钟开启通风系统,以保证鸡舍通风。
3.关闭照明系统。关闭风机后鸡舍内会突然变得安静,此时多名操作人员的进入和喷雾产生的噪声会使鸡群惊恐,造成严重的应激,甚至会造成鸡只踏压致死,所以喷雾免疫前要先关闭照明系统,先在鸡舍一端喷清水,待鸡群对机器的声音适应后,操作人员手拿应急灯并将灯调暗或遮暗光线后缓缓进入鸡舍。操作人员动作要轻,切忌发出大的声响,更不能在鸡舍内大声喧哗或跑动。平养鸡舍的喷雾免疫最好在晚上进行,喷雾结束后应及时开灯让鸡散开,防止压死鸡只。
三、喷雾免疫的具体操作方法
1.控制喷雾速度。喷雾速度与所使用的机器、免疫用水量和免疫操作人员的熟练程度有关,也决定着所用疫苗的剂量、疫苗分布的均匀程度以及鸡只能否获得足量的疫苗剂量。喷雾速度的控制是确保免疫效果的关键环节,是比较难掌握的,必须提前试喷。试喷时,先将1栋鸡舍的鸡分成几组,先对其中的1组参照疫苗剂量用清水缓慢、匀速地试喷,要求较慢、匀速地喷两遍,且刚好喷完。根据试喷情况,确定人员行进的最佳速度。喷雾时由鸡舍的一端开始,边喷边向另一端缓慢移动,往返1次,使鸡群在免疫后头背部羽毛略潮湿。对同一栋舍内的鸡只,要在同一天内完成免疫。
2.疫苗和稀释液的使用量。喷雾免疫的疫苗剂量应比肌内、皮下注射或点眼、滴鼻等接种方式多2倍左右。稀释液的用量,则应根据饲养方式、鸡的日龄和雾滴大小来确定,以1000只鸡为例,10周龄以内使用400~500毫升,10周龄以上使用600~700毫升。在冬季舍温低于10℃时,注意控制喷雾用水量,防止过量的水喷在鸡身上,造成鸡感冒。
3.疫苗的稀释。疫苗稀释最好选用无菌蒸馏水,没有蒸馏水的养鸡场可以用桶装矿泉水替代,切不可用生理盐水,以免造成疫苗失效。为防止喷出的雾滴迅速蒸发,可在蒸馏水中加入3%~5%中性甘油。稀释疫苗时,加入0.1%~0.3%脱脂奶粉可起到保护疫苗的作用。冬天喷雾免疫时,稀释液温度应在20~30℃之间,避免鸡群产生冷应激。稀释疫苗时,要用干净的玻璃棒充分搅拌均匀,使疫苗充分溶解。盛放疫苗的器具尽可能用塑料或玻璃器具。稀释后的疫苗应在1小时内用完。
4.选择合适的雾滴。雾滴的大小是影响免疫效果的重要因素,要坚持小鸡大雾滴、大鸡小雾滴的原则,同时,雾滴的整齐性也很重要,要求机器产生的80%雾滴在标准范围内。8周龄以内的小鸡进行喷雾免疫,雾滴应在80微米以上,不致吸入呼吸道而引起疾病;8周龄以上大鸡喷雾免疫时要求用30~40微米的小雾滴,以产生好的免疫效果。
5.保持合适的喷雾高度。平养鸡在鸡头上方1米左右处喷雾,笼养鸡在每层笼正上方10厘米高处平行喷雾。喷雾高度如掌握不好,很难产生理想的免疫效果。
四、适时进行抗体监测
抗体监测也是衡量喷雾免疫效果的重要手段。喷雾免疫当天就要进行抗体监测,以掌握免疫前鸡只的抗体水平,便于确认免疫效果。喷雾免疫后10~15天对大群鸡按5的比例抽测进行抗体监测,发现抗体上升不理想时应及时补免。另外,笔者在服务中发现,小鸡早期用新支二联活疫苗喷雾免疫后,需要间隔7~10天再加强免疫1次,因为首免的雾滴比较大,免疫效果也大打折扣,需要用相同的疫苗及时加免。
(作者联系地址:韩文格河北飞龙家禽育种有限公司邮编:050091;严兆杰青海省平安县畜牧局邮编:810600;阎俊霞河北省崇礼县畜牧办公室邮编:076350)
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规模化猪场的防疫方法 规模化猪场的主要防疫措施
近年来,一些规模化养猪场的猪群情况令人堪忧,部分猪群逐渐向亚健康状态演变,甚至有的已是亚健康状态,更有正处于高致病状态发生.猪群的健康状态面临着前所未有的挑战.人们对所面临的问题充满了困惑.本文将对此问题进行探析,并就规模化养猪提出相应的防控措施。下面一起具体了解一下:规模化猪场的防疫方法规模化猪场的主要防疫措施。
1、疫病防控理念
疫病防控理念在规模饲养场中具有很重要的作用,可是截止到现在,大部分猪场管理者还是仅仅停留在防疫层面或生物安全上。所以,饲养场通常只是消灭一种或几种特定的传染源,却忽视了对于猪群本身的重视,即仅仅重视特异性免疫,忽视非特异性免疫。其实,非特异性免疫在猪群中的作用更加重要。所以,要将猪群防疫作为整体的系统工程对待。将生猪生产的各个环节掌握好,明确工作方向,继而制定符合本场切实可行的免疫方案。
2、疫情处理
目前,我国针对不同的传染病都有相应的处理法规和流程,在生产中,如果具体到每个猪场,流程都不同。个别饲养户或者是饲养场,为追求片面的利益,将病、死猪销往市场或是抛到野外,并没有按照规程进行无害化处理,导致疫病的流行。这是近几年来疫病快速流行,甚至是反复流行的原因所在。所以,必须严格执行病死猪只的无害化处理。
3、饲料营养与药物的使用
很多饲养者会购买保健类药品,然后添加到猪只的饲料中,却忽视了对于原料或者饲料质量的要求。氨基酸、微量元素、维生素等,对猪只的生理代谢具有很重要的作用,对于特异性免疫和非特异性免疫作用很大。但是也应该重视如水、碳水化合物以及蛋白质这些基本的营养物质的供给。生产中,许多猪场的栏舍中,因为饮水器安装的位置或者是方向不合理,导致猪群饮水不充分。还有饲养者在饲料中添加脱霉剂,正确做法应该购买质量好的玉米,特别是技术含量高档的预混料。猪群发病大多因为营养不良,导致抵抗力低,易感染疾病,即使采取治疗措施也很难康复,随着病程的延长,猪只体内的微生物也越来越多。
病原体特别容易发生变异,所以药物频繁接触病原体之后,就会发生变异,导致药物的敏感性降低,甚至逐渐转变成耐药性菌株或者是超级细菌;如果在猪只的饲料中加入药物类添加剂,那么,机体内某些代谢细胞可能会受到刺激,从而处于很活跃的状态,促进猪只的生长速度。随着时间的累积,这些代谢产物会加重肝胆的负担,严重的会遭到损害,最终会抑制猪只生长。
所以,要求猪场的管理人员树立绿色理念,给猪只尽量少打针、少用药,重视环境卫生和营养的供给,确保猪群健康。
4、疫苗免疫
生产中给猪只接种疫苗常常存在许多错误和误区,类似于药物滥用的情况。第一,应该明确疫苗并不是对所有的疾病都有效,而是在特定的条件下,或者是针对特殊疫病能够发挥作用,但是不会彻底地把疫病消灭掉。第二,疫苗发挥作用,需要机体配合产生相应的反应,但是在疫苗的实际使用过程中,主要存在以下4种误区。第一种误区,认为猪只接种过疫苗,就一定会产生免疫。可是在实际的临床生产中,发生不免疫的情况还是存在的;第二种误区,认为给猪只注射的疫苗量和免疫效果成正比,也就是注射剂量越多效果就越好,所以给猪只接种了很多份疫苗;第三种误区,个别猪只饲养场给猪只注射疫苗时,一般都是将多种疫苗同时使用,或者在短时间内进行频繁注射;第四种误区,把疫苗和兽药的作用混淆,存在疫病流行时,就给猪只接种疫苗。
5、应激与抗应激
猪只饲养的流程中,对周围环境以及管理方式存在应激与抗应激的情况。所以饲养户要重视这个问题,提高猪场的生产水平,并且提高生产效率,同时对于疫病的防控能够发挥作用。应激主要是指机体受到应激原的刺激而产生的一系列神经内分泌反应,以及因此而产生的机能与代谢的变化。
6、员工培训
猪场正常运行的关键是员工的素质。加强员工培训,树立正确积极的工作态度,提高专业水平和工作效率,明确工作目标和方向,更加熟悉工作方法和程序。疾病防控过程中,并不是技术员和兽医对各种知识和程序了解就能做好猪只饲养工作。实际生产中的影响因素有很多种,所以,要求生产中的每位参与者都对整个流程以及本职工作非常明确。要加强对员工的培训工作,提高工作效率,增强工作能力,让其按自己的意愿和行动工作,对于整个猪场的运营有益。培训时,要重视常态化和制度化的控制,确保猪场产品的同时还能培养出饲养人才。
养猪场是怎样防疫的
1、引种要严格检疫
猪传染病发生的原因很多,但引种不检疫是把外地疫病引到本省、本场的主要原因之一,甚至通过引种把国外一些猪的疫病也引到我国来,这种实例在生产中并不鲜见,不少养殖场或养殖户希望能得到质量好的猪,往往从多个猪场购进母猪,选购种猪时几乎不作严格的检疫,结果把多个猪场的猪病都带进自己的猪场,再加上抗猪病的免疫程序不完善,有的仅免疫猪瘟,有的只给猪免疫注射三联苗(猪瘟、猪肺炎、猪丹毒),这种免疫方式已远远不能适应当前猪传染病发生的实际情况和猪病发展的新动向。例如,在有的地区和猪场通过血清流行病学调查表明,猪细小病毒的感染率高达50-80%以上,有的猪群里的猪附红细胞体病的阳性率也很高,其它若干病毒性传染病的情况也类似,这样,有的人就误认为“天下乌鸦一般黑”,国内、国外情况也差不多,随波逐流,听之传之,只要购进的母猪不死就算成功,殊不知祸要已被埋下,迟早会发生问题。据此,建议从国外或从外地购进种猪时慎重,要严格检疫,更不能从多个猪场购进种猪。通过检疫搞清楚种猪的情况,即使检出呈阳性反应的猪只也不怕,也可以制定出相应的根除计划,以控制传染病的传播和蔓延。
2、制定正确、合理的免疫程序
依据各场的实际情况,要制定相应的免疫计划,不能千篇一律,用三联苗对公、母猪一年进行2次免疫。防止母猪繁殖障碍性疫病,用伪狂犬病疫苗和细小病毒疫苗,对后备公、母猪于配种前30天免疫,头胎、2胎母猪于产后1周免疫,妊娠母猪于产前30天免疫。控制猪传染性萎缩性鼻炎,可用猪萎鼻二联苗,孕猪产前30天免疫,乳猪于1周龄和4周龄各免疫注射1次,公、母猪1年2次。防止猪瘟最好用猪瘟弱毒疫苗,猪病三联苗不如单苗,因免疫期较短,乳猪在3周龄和6周龄用猪瘟弱毒苗各免疫1次,母猪1年2次,母猪在妊娠期间不宜注射猪瘟疫苗。4周龄仔猪注射链球菌疫苗,5周龄注射副伤寒疫苗,妊娠母猪于产前3周用黄白痢苗注射1次。总之,使用疫苗要按疫苗说明执行,不得随意改变剂量和使用方
3、创造安全、舒适的环境
在规模饲养条件下,兽医工作的重点是防病不是治病,要强调猪群的安全不是个体,所采取的一切措施要从群体出发,有益群体。如猪舍与猪舍之间空隙地的绿化,舍内的通风换气,冬季的保温、防湿,夏季的防暑,适宜的光照以及卫生消毒等都是为养猪创造良好的环境。但目前,由于环境控制不力,一些猪场和养殖户的养猪条件差,设施不完善,猪舍简陋,不规范,防疫卫生措施不到位或不健全等,造成一些疫病的持续存在,尤其是在高密度饲养情况下,存在着较多的应激因素,例如气候突变、高湿、酷暑、严寒、断水、断料、仔猪断奶、转群、换料、抓猪打针、投药、惊吓、沙尘、调换饲养人员等均可诱发“环境病”和其它多种疾病。因此,对猪群的健康状况要进行经常性的检查,通过良好的管理和满足全价、平衡的优质饲料,使猪具有很强的抗病力和保持良好的健康状态,发挥出最大的生产潜力。通过环境和抗体水平的检测,也可了解环境卫生状况及免疫接种效果,从而为制定科学的免疫程序和严格的防疫制度提供依据。据此,一定要创造安全、舒适的养猪环境,不断提高猪体的健康水平和生产性能。
4、有针对性地进行药物预防
有的疫病尚没有疫苗预防,特别是一些细菌性传染病,用药物预防有良好效果,但必须要针对性强,如许多猪场里不同程度地存在着猪气喘病,针对此病可用抗生素防治,对妊娠母猪分娩前2周—3周到分娩后3周—4周内,在饲料中添加土霉素来预防;猪弓形体病用磺胺类药物有防治作用;猪痢疾用抗生素或在饲料内添加一定量的痢菌净,效果十分明显;尤其在仔猪阶段或环境条件多变时,采用金霉素、土霉素和白地霉素等防病的效果很不错,虽然用抗生素能防治一些细菌性传染病,但会产生耐药性的菌株,这对人们的健康是一个威胁,因此,切切不可乱用抗生素。
主要应采取以下防疫措施:
1.猪场入口处应建立人员和车辆出入消毒室(池)。猪场内的生活区、生产区和生产辅助区要严格分开,生产区必须相对封闭。
2.不得从健康状况不明的猪场购买种猪,新引进猪只应在进入猪群前隔离检疫30~60天。
3.坚持自繁自养,全进全出的养殖模式。
4.猪场内不得养狗、猫等宠物及其他家畜家禽,并应定期除蚊、蝇和灭鼠。
5.禁止从场外购买猪内及其他屠宰品。
6.选择合适的饲料,所购饲料必须先放仓库中干燥消毒1周后方可使用。
7.所有场内使用的工具必须经熏蒸消毒后方可还入,各区域的工具严禁混用。
8.严格控制人员进出猪场,休假或外出工作人员必须经过72小时隔离,并经过常规消毒、彻底淋浴和更衣后才准许进入生产区工作。
9.定期对猪场内外环境进行消毒,执行猪舍带猪消毒措施。
10.对病猪应及时隔离、治疗,对死猪应焚烧或深埋。
11.选择合格疫苗,严格按照免疫程序对猪群进行科学合理的免疫接种,并定期进行免疫效果监测。
12.定期对猪群进行药物预防与保健。
规模化猪场和散养户猪瘟免疫效果的比较
猪瘟(CSF)是由猪瘟病毒(CSFV)引起的一种急性或慢性、热性和高度接触传染的病毒性疾病,又称“猪霍乱”,是养猪业中常见的疾病,给养猪生产和发展带来了巨大的损失。本研究采用酶联免疫吸附试验(ELISA)对永安市规模化养殖场和散养户的猪血清样品等进行检测,初步了解其猪瘟的抗体水平,比较二者之间的区别,并根据临床实践,分析造成差异的原因,为科学有效地防控猪瘟提供依据。下面具体来了解一下:规模化猪场与散养户猪瘟免疫效果的比较。并总结了猪瘟免疫效果的提高方法,以便为猪瘟控制提供依据。
1、资料与方法
一般资料。在2015年3月至2016年3月期间,选取黑龙江省齐齐哈尔市10个规模化猪场(598头猪)与68个散养户(266头猪)。其中规模化猪场中能繁母猪227头,保育猪129头,育肥猪86头,后备猪156头。散养户中能繁母猪76头,保育猪65头,育肥猪125头。对864头健康猪在28-30天之前进行猪瘟疫苗免疫,并采集864份血样,对其免疫效果进行对比分析。
方法。检测需要的试剂与仪器包括:ELISA检测试剂盒、离心机、加样器、隔水式普通培养箱、快速检测仪、微量振荡器等。将采集的血样经过无菌离心吸取血清制成样品,并对每份样品做好标记,放置在冰箱中冷藏处理。并从冰箱中取出试剂盒,放置在实验室中,确保温度恢复到室温(15-26℃),并对试剂进行观察,如果试剂中出现未溶解的固体物质,需要继续回温溶解。并放置在微量震荡器中维持0.5-1min的震荡处理,并按照先后顺序摆好备用。并对阴性与阳性标准血清标记好加样位置,并对反应板符号做好标记。在反应板中加入50uL血清稀释液,并依此加入阳性与阴性血清以及待检血清样品各50uL,并对其进行震荡处理0.5-1min,贴上封板膜,并放置在25℃隔水式普通培养箱中孵育1h。之后重复清洗,加入100uL显色底物,重新孵育15min,之后加入50uL终止液,震荡30s,对其OD值进行检测。
判断标准。样品PC低于40%表示为阴性;样品PC在40%及以上表示为阳性。其中样品PC计算为:(阴性对照血清OD450nm平均值样品OD450nm值)/(阴性对照血清OD450nm平均值阳性对照血清OD450nm平均值)×100%。
2、结。。
规模化猪场中598头猪猪瘟抗体合格率为96.15%(575j598),其中能繁母猪合格218头、保育猪合格119头、育肥猪合格84头、后备猪合格154头;散养户266头猪的猪瘟抗体合格率为77.44%(206/266),其中能繁母猪合格67头、保育猪合格49头、育肥猪合格90头。
3、讨论
在规模化猪场中,能繁母猪与后备猪的抗体水平较好,其主要是与规模化猪场重视种猪健康有着密切联系。根据结果显示,规模化猪场的猪瘟免疫效果明显优于散养户猪瘟免疫效果。散养户在养殖的时候,需要充分借鉴规模化猪场的养殖经验,要不断提高免疫技术,养殖户要重视猪瘟免疫,对免疫程序进行改进,并注意饮食健康,对猪圈的环境卫生进行改善,以便提高猪瘟的免疫效果,确保疫病发生率的降低,从而促进养殖户的经济效益显著提高,降低不必要的损失。
规模化猪场需要维持现有的防疫水平,确保猪瘟免疫效果维持良好的状态。而散养户需要根据自身的实际情况,在猪瘟免疫、科学饲养以及生猪采买的时候严格把控。需要对种猪的健康进行重视,以便切断感染源头。在购买种猪的时候,避免从疫区或刚治疗好猪瘟的猪场购买。在种猪运输的过程中,需要对运输工具进行彻底消毒,购买回猪场的时候,需要对随行人员与车辆进行彻底消毒,之后将猪送往猪场的隔离区。在隔离区饲养1个月所有的时间对其进行免疫接种后,待抗体检测合格方可进入生产区饲养。
猪瘟一直以来是威胁我县养猪业的头号疾病,对于猪瘟的控制目前主要还是依靠猪瘟疫苗的免疫预防,猪瘟疫苗免疫效果的好坏直接关系到全县猪瘟防疫的效果以及生猪感染压力的大小,也关系到我县畜牧养殖业的可持续健康发展。猪场及农村散养户定期对猪瘟疫苗效果检测评估是十分必要的。目前,用于猪瘟疫苗免疫效果评估的方法很多,如何选择一种切合我县实际的检测方法是科学评估的首要问题。我们采用两种常用的评估方法(免疫金标试纸检测和正向间接血凝试验)对全县农村散养户的336份血清样品进行了猪瘟免疫效果平行对比检测试验,这对于以后我县动物疫病预防控制中心能够及时准确掌握生猪猪瘟免疫效果,具有非常深远的指导意义。
1、材料与方法
1.1材料
1.1.1被检样品采自全县12个乡镇农村散养户不同日龄的猪,其中仔猪(20~45日龄)96份,生产母猪102份,肥猪(70~160日龄)138份。散养户提供的336份血清均为猪瘟免疫首免20日龄左右,二免在65日龄免疫后18~20天所采的仔猪全血样品。
1.1.2猪瘟正向间接血凝试剂盒(包括猪瘟正向间接血凝抗原、猪瘟稀释液、猪瘟阴、阳性血清)购自中国农业科学院兰州兽医研究所,试剂盒批号:20080812。
1.1.396孔血凝板(110。V型),飞鸽牌台式离心机,精密移液器(5~50μl、20~200μl),微量振荡器。
1.1.4猪瘟抗体免疫金标试纸条,购自深圳市康百得生物科技有限公司,生产批号:20081020。
1.2方法
将336份全血样品放入离心机离心,5分钟后吸取上层血清液,置于试管架上备用。在金标检测卡的椭圆形加样孔内加入2~3滴(50~100μ1)待检猪血清。将检测卡平放在平面上,在室温下静置8~15min判定结果。加样后8~15min可与金标试纸附带的参照卡的色带滴度进行参考比较,当被检样品检测线(T)条带的色泽大于参照卡中猪瘟抗体效价为1∶16时,说明检测样品中猪瘟抗体的滴度较高,如果低于1∶16则表示被检猪的猪瘟抗体水平过低,应及时进行猪瘟疫苗接种。正向间接血凝试验操作顺序如下:加稀释液→加被检血清→在血凝板上倍比稀释被检血清、阳性血清→加血凝抗原→震荡摇匀→37℃下静置1~2h→结果判定。以50%红血球出现凝集的血清最大稀释倍数为该血清的血凝效价。血凝效价达1∶16为免疫合格,1∶16以下为免疫不合格。
2、结果与分析
从上述表格可以得知:抗体金标检测仔猪猪瘟抗体效价达到保护线的为82%,正向间接血凝检测合格的为81%;育肥猪金标检测抗体水平达到有效保护值(1∶16)的为91%,正向间接血凝为91%;金标抗体检测生产母猪免疫合格的为84%,正向间接血凝为86%。
通过数据比较表明,免疫金标试纸检测与猪瘟正向间接血凝试验的结果基本符合,试验结果可靠。
3、讨论
3.1从上述实验中可以看出,我县现有的疫病预防免疫程序中,总有一部分猪只免疫不合格,造成这种情况的因素可能与基层防疫员的技术、操作、疫苗用量、疫苗质量等有关。也可能是广泛存在的猪繁殖与呼吸障碍综合症、圆环病毒感染而破坏了猪的免疫系统,造成免疫抑制。
3.2从操作方法上,免疫金标试纸条操作简便,更重要的是检测时间很短,使我们能及时做好疾病诊断、抗体监测。间接血凝是通过血球凝集程度来判断结果的,实验员的判断力不一样,就很有可能出现不同的结果,即便对于同一操作者,每次的试验判断结果都可能有一定的偏差。
3.3从经济成本上,免疫金标试纸检测也能体现出一定的优势,它能大量成批的检测,也能单独进行检测,且不造成浪费。而间接血凝所需抗原一经开启就必须一次用完,若检测量较小的情况下,就会造成很大的浪费。
4、结论
综上所述,猪瘟抗体金标试纸检测法,凭借其操作简便,不需要技术含量很高的实验员,结果直观,反应时间短的优势,非常符合我县的实际需要。乡镇兽医站,养殖场都可推广应用,对我县应对重大动物疫病时的应急反应能力,将起到举足轻重的作用。