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奶牛副结核病是一种能造成重大经济损失,需要采取严格控制、扑灭等措施防止扩散的疫病。本病的潜伏期长短不等,少则6个月,多则15年以上。所以奶牛感染副结核病后,在一定的时期内不出现临床症状,较多是在产犊后体质虚弱时出现临床症状,3-岁的奶牛发病最多。奶牛感染副结核病要及时发现,及早淘汰并做出相应的预防措施。下面具体来了解一下:奶牛副结核病的临床症状奶牛副结核病的诊断与预防。
1、境内感染情况
笔者有针对性地选取了辖区内8个新旧不同的专业化规模奶牛场及1个奶牛小区进行调查。对从智利购入594头育成牛的新建牛场,在2015年8月由某公司对全群牛采血,使用ELISA检测法进行副结核检测,共检测出血清阳性牛60头,疑似牛60头,阳性率10%;据调查另外3个规模奶牛场及1个奶牛小区共检测4000份血清样品,检出血清阳性牛分别为200头、82头、77头、70头,阳性率最高的达19.1%,阳性率低的达2.3%;另通过电话了解另外新建的4个现代牧场,在5000多头奶牛血清样品中,阳性检出率最低为1.2%。且该病有呈逐年上升的趋势。
2、临床症状及危害
临床症状:根据现场观察处在潜伏期的血清阳性牛没有明显症状,体态良好,毛色光亮。据现场兽医介绍和有关资料记载,该病潜伏期长短不一,数月至数年。症状多出现在18月龄以上至2-5岁成母牛,临床表现是从间隙性下痢发展到持续性水样喷射状腹泻,腹泻物恶臭有泡沫。由于长期腹泻,发病牛会出现低蛋白血症,表现下颌、胸垂、腹部水肿,病牛体况不良,被毛干燥,后驱和尾巴及腹部两侧、肋部及臀部沾有稀粪便。产奶量下降明显或停止泌乳,患牛全身衰弱而死亡。剖检可见肠黏膜增厚并形成脑回样皱褶是其特征性病理变化。
危害:据某良种奶牛场总经理介绍目前副结核是该牧场淘汰牛最主要的原因,每年淘汰病牛80-90头,牧场因此损失近百万元。最早发现该病是在2011年,每次血清学检测阳性率在20%左右,最高时可达23%,新建奶牛场由于还没有出现临床症状的牛,因此危害表现不明显。另据资料,感染牛终身产奶量比ELISA检测阴性牛低4000kg;ELISA检测阳性牛,跛行发病率比阴性牛高5倍;乳房炎发病率比阴性牛高2倍;消化疾病和呼吸道疾病发病率比阴性牛高1.8倍,严重危害养牛业的发展。
3、小结
通过对8个牧场和1个奶牛小区奶牛副结核病现状的初步调查和了解,主要有以下几个特点。一是老牛场感染率和危害程度比新牛场要严重;二是规模奶牛场及小区感染率和危害程度比散养户要严重;三是血清学检测阳性中育成牛鲜见临床症状,成年牛及产奶牛可见临床症状,符合该病的发病特点。究其原因,副结核病虽是二类动物疫病,由于不是人畜共患病过去没有引起有关人员的重视,对该病的认知程度和防治力度不够。对该病的持续性腹泻有的牛场当成习惯性腹泻给予对症治疗,反复几次不能治愈就将牛淘汰了,这个过程又造成污染面扩大和同群牛的不断感染。有的牛场对此病有认识,但采取的防治措施有限,隔离措施很难到位,没有特效药物,缺少有效的疫苗,防治有一定困难。加之,近几年全省规模化、现代化牧场建设的推进,奶牛场规模和密度的加大,防范不严也助推了该病的发展。该病已呈逐年上升的趋势,成为降低奶牛生产性能、影响奶牛业发展的直接因素之一。
4、目前应采取的防治措施
针对该病笔者请教了国家有关权威部门专家、学者,也查阅了相关资料和法律法规,目前国内没有合法有效的疫苗,国家也没有批准引进国外的疫苗防治该病。根据现实情况,提出以下防治措施。对有临床症状的成母牛,副结核菌素或血清学检测阳性的要及时淘汰,肉尸和内脏按照《畜禽病害肉尸及其产品无害化处理规程》(GB16548-1996)进行高温处理。目前国家对该病还没有补贴,现只能通过在保险公司参保方式给予一定赔偿。
对血清学检测阳性但未出现临床症状的牛进行标记,注意观察,一旦出现临床症状要立即采取隔离、消毒、淘汰措施;加强平时的消毒工作,对发病牛的排泄物要严格消毒处理(据有关资料1头牛的排泄物可以污染50头牛),用3%火碱水进行清理消毒,避免污染环境及饲草饲料;培养阴性后备牛群,4月龄以下犊牛严格与成母牛隔离饲养,产后初乳不能喂犊牛,常乳也要经过消毒或发酵才能喂犊牛。副结核分支杆菌易在酸性土壤环境下存活和繁殖,因此改变牧场土壤的酸性环境,尽量将其维持在偏碱性水平。牧场要进行灭鼠工作,因为老鼠可以通过污染饲草饲料传播该病。已经污染的牧场有条件的每年春秋检疫时可以同时进行结核和副结核的皮内变态反应试验,剔除阳性牛;对牧场15月龄以上牛用ELISA方法进行体检筛查,检出阳性进行标记,连续检测2次均为阳性并有临床症状的牛必须淘汰处理。
1、奶牛副结核的症状
本病早期症状为间断性腹泻,体温正常,与其它腹泻疾病在临床症状上不易区分,经对症治疗后或者妊娠时可以短期控制症状,但当遇到产犊、气候剧变、饲草饲料改变等应激反应情况时又会马上出现临床症状,经几次反复发作后,变为顽固性的腹泻,2~3周的间歇性下痢很快恶化成持续性下痢,在下痢粪中含有明显的血液、气泡、粘液并伴有恶臭味,严重者呈喷射状下痢,对药物治疗不再敏感。症状也逐渐加重,被毛脱色、颌下和腹部出现水肿。常见下颌及胸垂处水肿,被毛脱落,增重慢,并出现明显消瘦,泌乳量和乳汁质量下降或泌乳停止,空怀期延长。眼球下陷,有一定的饮欲,食欲减退,甚至废绝,不爱吃精料,重度消瘦至“皮包骨”,出现间歇热,肌肉萎缩、流泪、和血液红血钾、血钙、白细胞减少、贫血等症状。最后不食,不能站立。染疫群体死亡率每年可达成10%。
2、奶牛副结核病的预防
本病重点在于预防,在引进奶牛时,进行副结核病检疫,确认健康后方可引入,对本地感染的病牛进行及时检出、及时淘汰,对新生犊牛进行疫苗免疫注射等。
2.1全部奶牛进行检疫,及时淘汰感染病牛早期症状不十分明显,易与其它腹泻疾病相混淆,因此要结合临床症状进行实验室诊断,及时诊断。以便于发现病畜,尽早对其淘汰处理,不使其排出的细菌感染其它健康牛。因此每年至少要对全体奶牛进行两次副结核免疫。现阶段主要有两种检测方法,细菌学诊断和变态反应诊断,我们较常用的诊断方法为变态反应诊断方法。
(1)材料:剪毛剪、游标卡尺、5毫升注射器及针头、75%酒精棉球、记录本等。
(2)药品:副结核菌素,由中国兽药监察所制造。
(3)操作方法:将被检动物编号,在颈侧1/3处中部的皮肤剪毛,直径约10厘米,用卡尺测量原皮厚,并作好记录,局部用酒精棉球消毒。将副结核菌素以灭菌注射用水稀释至0.5毫克/毫升,皮内注射0.1毫升,如注至皮下或溢出,应于离原注射点8厘米以外远处补注一针。
(4)结果判定:注射后72小时观察反应,检查注射部位有无热、肿、痛等炎症,并以卡尺测量注射部位的皮肤厚度。阴性反应:注射部位迟发型过敏反应时间或炎性反应不明显,皮厚差≤2.0毫米。
阳性反应:局部有炎性反应,皮厚差≥2毫米判为阳性;局部炎性反应不明显,皮厚差2.1-3.9毫米,可视情况在3个月后复检,于注射部位对侧的相应部位进行相同的操作,72小时后皮厚差仍≥2毫米,则判为阳性,应立即淘汰处理。
如考虑有感染结核病的可能,可以在做副结核变态反应的颈部另一侧做结核菌素的变态反应试验,72小时后判定结果,皮差较大的变态反应侧为病牛所患疫病,即副结核变态反应颈侧皮差较大则此病畜感染的是副结核病。
一旦检疫出副结核奶牛,应及时淘汰,对现场及该牛粪便、牛舍、饲槽、用具、及运动场等进行彻底的卫生消毒。
2.2犊牛注射免疫疫苗
奶牛副结核防治的核心主要是防止新生犊牛感染。因此对牛场新生犊牛要进行免疫接种。免疫方法:在犊牛出生后一周内,于胸垂部剪毛消毒后,皮下注射一头份疫苗,可有效预防本病的发生。
3、其他预防措施
除了以上的预防措施外,还应予以以下辅助措施:加强饲养管理,增强抵抗力,尤其是对幼年牛更要给予足够的营养;对疑似动物进行粪便检菌;及时清理畜舍;分娩后立刻把犊牛同患病母牛分开并隔离饲养;不喂给病牛牛奶,喂健康牛奶或经灭菌的牛奶。
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肉牛副结核病的临床症状与防治措施
肉牛结核病是由于感染牛型结核分支杆菌而导致的一种消耗性、慢性传染病.病猪临床上的主要病变是多个组织器官形成结核性结节,发生干酪样坏死以及钙化.该病全年任何季节都能够发生,一般是舍饲肉牛更容易发生,主要是由于饲养管理条件恶劣、过度疲劳以及挤乳操作不正确等引发,应注意加强防控.下面我们就一起来看看肉牛副结核病的临床症状与防治措施。
1、流行病学
病原特性。副结核分枝杆菌是一种短杆菌,具有多种形态,部分呈球杆状,部分呈短棒状,往往呈纵对排列,菌体没有鞭毛,不能够自行运动,且不会形成荚膜和芽孢,经过革兰氏染色呈阳性,经过抗酸染色也呈阳性。该菌是一种需氧菌,适宜生长在37.5℃的温度下,pH适宜控制在6.8~7.2。该菌具有生长缓慢的特性,往往很难进行原代分离,需要在接种的培养基内添加适量的草分枝杆菌素抽提物,通常培养6~8星期才能长出小菌落。
易感动物。反刍动物是该病的自然宿主,如牛、山羊、绵羊、骆驼以及鹿等都会该菌具有易感性,且通常母牛容易感染,特别是处于妊娠期或者泌乳期的母牛最容易感染。
流行特征。该病全年任何季节都能够发生,其中在春秋两季更容易发生。该病具有较长的潜伏期,通常能够达到6~12个月或者更长,往往呈散发,有时也会呈地方性流行。
2、临床症状
肉牛副结核病是一种典型的慢性传染病,病牛主要特征是体温没有发生明显变化,发生顽固性下痢,体质明显消瘦。发病早期,病牛体温基本正常,发生间歇性腹泻,时重时轻,排出稀薄粪便,散发恶臭味,并混杂黏液块和气泡,在临床症状上较难同其他类型的腹泻疾病进行区分,如果此时采取对症治疗能够得到有效控制。随着病程的进展,病牛逐渐出现顽固性下痢,发生几次反复的腹泻后,对药物治疗敏感性减弱,严重缺乏营养,最终由于全身衰弱而发生死亡。发病后期,病牛主要表现出精神沉郁,眼窝下陷,被毛粗乱,拒绝走动,卧地不起,伴有慢性、卡他性肠炎,且长时间呈现循环性腹泻,体质逐渐衰弱,并发生脱水等,机体严重消瘦,但体温依旧没有发生明显变化。
3、实验室诊断
活体取样检查。检查者带上一支塑料长臂手套进行直肠检查,即将手伸入到直肠内,手指弯曲后掏空存在于直肠内的粪便,接着用手指在肠黏膜表面略微用力刮蹭,然后将手臂退出,立即将长臂手套翻过来,确保刮取到的肠内容物处于手套内,接着立即送到实验室进行检查。对于病死牛,可取回盲瓣附近的肠黏膜或者回肠末端以及附近肠系膜淋巴结,进行实验室检查。
细菌直接涂片检查。病牛排出的粪便中如果含有黏液,可以直接使用载玻片制成触片,接着经过抗酸染色进行镜检,通常能够发现病菌。如果病牛排出的粪便中不含有黏液,则需要采取粪便集菌,即取15~20g待检粪样,添加3倍量左右的0.5%氢氧化钠液,混合均匀后置于55℃水浴中进行30min乳化,然后取上清液以1000r/min的转速下进行5min的离心,取上清液再以3000r/min的转速进行30min离心,弃去上清液,取沉淀物进行涂片,经过火焰固定后进行抗酸染色。
抗酸染色方法。取火焰固定后的涂片,用石炭酸复红液覆盖,置于酒精灯上进行5min的加热染色,即产生蒸汽但没有沸腾,然后适当降温,弃去染色液,使用清水洗涤,然后滴加碱性美蓝液进行5min染色,经过水洗、干燥后进行镜检。通常放在10×100倍油镜下进行检查,若存在病菌,会看到呈红色的革兰氏阳性小杆菌,菌体长度在0.5~1.5μm,宽度在0.3~0.5μm,往往在视野中呈栅栏样丛状或者成堆状,但如果存在少量病原菌时,通常需要对多个视野进行镜检才能够发现病菌。因此,有时经过一次镜检无法发现病菌,此时不能说明没有发生该病,需要经过一段时间再进行一次镜检。
4、防治措施
对症治疗。该病还没有特效药物用于治疗,通常采取对症疗法。如果病牛发生严重腹泻,可采取补充葡萄糖生理盐水,每次静脉注射2000~3000mL。为抑制腹泻,可内服适量的鞣酸、次硝酸铋等,能够有效缓解病情。为避免发生酸中毒,病牛可静脉注射500~1000mL5%碳酸氢钠液或者50~100mL40%乌洛托品。另外,病牛要采取单独饲养,饲喂品质优良的干草,且骨粉添加量要适当增加,用于改善体况,减轻腹泻。
加强饲养管理。牛场最好采取自繁自养,如果需要引种则要注意不从疫区引进牛,且对于引进的牛必须采取临床检查以及变态反应检查,如果疑似患病要立即进行隔离饲养或者直接淘汰,避免环境及用具等污染有粪便等排泄物,当对全部进行检测,且呈阴性结果后才能够混群饲养。同时,牛要加强饲养管理,圈舍、粪尿以及污染的垫料和饲草要定期进行卫生消毒。另外,牛群也可采取疫苗免疫,目前常选择使用弱毒疫苗和灭活苗,但接种疫苗后无法得到完全的保护,还会导致个别牛由于接种弱毒苗而感染病菌,并会对临床诊断造成干扰,应更加注意。
肉牛感染副结核病的患病表现 肉牛感染副结核病的预防措施
肉牛副结核病是一种慢性传染病,由于感染副结核分枝杆菌而导致。病牛临床症状是间歇性或者持续顽固性腹泻,同时体质呈现进行性消瘦,引起的主要病理变化是慢性增生性肠炎。在大部分区域,无论是奶牛还是肉牛发生该病,都会严重损害养牛业的经济效益,必须加强日常防治措施。下面一起来关注依一下:肉牛感染副结核病的患病表现肉牛感染副结核病的预防措施。
1、流行特点
如果牛群感染副结核病,会在实际生产中对牛场的经济造成比较严重的影响,这就要求饲养者在临床饲养时严格的控制副结核的发生,一旦发现有牛表现感染副结核病的症状,要尽快采取有效的措施加以扑灭,以控制副结核病蔓延扩散。通常副结核病的潜伏期偏长,一般能够达到6~12个月,生产中见到最长的潜伏期超过15个月。副结核病在生产中具有典型性,属于慢性的传染性疾病,一般肉牛都是在其产犊之后表现出患病症状。平时生产过程中如果肉牛采食的无机盐不够,会增加其感染副结核病的概率,并且导致病情比较严重。所以,在临床生产中要勤观察肉牛,查看肉牛是否表现出异常的情况,争取尽早发现并且及时给予正确合理的处理措施,通常在生产中发现感染牛之后会对其进行淘汰处理,以保证经济损失轻微,避免造成严重后果。
2、患病表现
如果在早期发现肉牛感染了副结核病,临床就会表现出间断性的腹泻症状,但是体温保持正常状态,所以饲养者容易误认为肉牛发生了简单的腹泻性疾病,于是采取针对腹泻症状的治疗措施,或者是肉牛在妊娠时腹泻症状会在较短的时间内消失或者表现轻微,但是如果环境中存在应激刺激,如产犊,气候、饲草饲料等改变,肉牛很快会就有临床症状表现出来,并且会经历几次反复的发病经过后转变为顽固性的腹泻症状,2~3周的间歇性下痢很快恶化成持续性下痢,在下痢粪便中含有明显的血液、气泡、黏液并伴有恶臭味,严重感染的患病肉牛呈喷射状下痢,临床中采用药物进行治疗,但是并不会收到明显的效果。肉牛感染之后的患病症状会逐渐加重,被毛脱色,颌下和腹部都有水肿的症状表现。
3、预防措施
生产中降低副结核的发病率,主要是采取严格的预防措施。牛场在从场外引入肉牛的时候,必须提前对牛群进行副结核病的检疫措施,如果被检查的牛群确认健康即可进行引种操作,而对于本场肉牛在平时也要及时进行检疫,一旦检查出患病牛要在第一时间采取淘汰措施,必须按照相关的疫苗免疫规程对新生犊牛进行疫苗接种。目前看来用于防治副结核病的药物还都不是特别有效,饲养员要根据牛场的实际情况灵活选择合理的免疫方法,正确选择有效的疫苗以发挥控制结核病的作用,防止牛场副结核病的发生,最终彻底消灭副结核病。
3.1及时检疫、淘汰病牛
肉牛感染副结核病的早期在临床并不能表现出明显的患病表现,生产中对患病牛采取实验室诊断措施的同时应该结合患牛的临床症状,对于患牛及时给出准确的诊断结果,生产中应该尽早发现感染副结核的肉牛,一旦发现就立即进行淘汰处理,否则会造成其他牛感染副结核病,导致牛场遭受更大的经济损失。所以,饲养者应该每年对整个肉牛群进行多于2次的副结核免疫接种。目前在临床实际生产中主要是细菌学和变态反应诊断两种方式,其中变态反应诊断方法是比较常用的方法。
3.2犊牛免疫
生产中对肉牛进行副结核病的防治,主要就是要实现新生犊牛不感染的目标,从而降低整个肉牛群的感染率,将牛场的损失降到最低。临床中对于牛场中的新生犊牛按照免疫程序进行疫苗免疫。一般都是在犊牛出生后的1周,将犊牛胸部的毛剪掉,同时进行消毒处理,通常是皮下注射1头份疫苗,在临床中能够收到比较理想的免疫效果。
3.3其他预防措施
实际生产中对牛群采取了上述的预防措施之外,还要注重强化肉牛群的饲养管理措施,增强肉牛的抗病能力。必须提供给犊牛营养丰富的饲料,保证营养全价不缺失;牛群中的疑似副结核病肉牛应该及时进行粪便检查;日常注重肉牛舍的卫生环境,及时进行打扫清理,保证环境清洁;母牛生产犊牛之后应该立刻将犊牛分离,采取隔离饲养的模式,避免新生犊牛采食病牛的乳汁,新生犊牛可以采食其他健康母牛的奶或者灭菌的牛奶,这样能够在垂直传播方式中减少疾病的出现。
肉牛场应该始终坚持自繁自养的饲养原则,严格禁止从疫区引入新牛,如果必须引进新牛就一定要按照相关规定遵守引入原则,而且对于新进场的肉牛采取相应的检疫隔离,避免引入其他传染性疫病;如果牛群中有肉牛表现渐进性消瘦、顽固性咳嗽等疑似副结核病的表现,要第一时间进行隔离、消毒,随后及时将情况报告给相关的动物防疫部门,便于及时对疫情进行诊断,然后还要根据具体发病情况采取相应的并且合理的防疫措施,避免副结核病的疫情扩大。
鹅结核病
疾病名称鹅结核病
疾病类型 细菌性传染病
动物种类 鹅
疾病概述 禽型结核杆菌引起的一种慢性传染病,多在种鹅中发生和流行。
流行病学特点 鸡最易感,火鸡、鸭、鹅均可感染,但并不严重。其他鸟类,如麻雀、乌鸦、斑鸠、孔雀、天鹅及猫头鹰等,有发病的报道。禽结核杆菌也能感染猪、牛,但尚无感染发病的报道。本病多发生和流行于种鹅群。传染源为感染了结核病的病禽,它们的排泄物、分泌物中含有多量结核杆菌,排出后污染土壤、垫草、用具、饲料和饮水,当健康禽摄食后,病菌侵入消化道而感染,该病也可通过呼吸道感染。内外环境的诱发因素,能促进本病的发生和发展。
临床症状及病理变化 结核病的潜伏期很长,约2~12个月。疾病的发展很慢,早期感染多看不见明显症状。由于鹅对结核菌的抵抗力比鸡、鸭强,患病后较难察觉。待疾病发展到一定程度时,病鹅上喙部鼻孔周围有疮节状隆起,从内外渐渐发展,最后使角质层、真皮层也隆起,使喙表面溃破,溃疡面呈火山口状,内有干酪物,上喙内侧也向下隆起。病鹅表现离群独处,喜卧厌动,步态不稳,叫声嘶哑,胸肌萎缩,龙骨如刀,精神萎顿,羽毛蓬松无光,食欲减退,但喜食米糠之类精料,消瘦。病程可达数月,最后因极度衰弱而死亡。有的鹅在水中因头颈无力高举而垂入水中淹死。剖检可见:肝、脾、肠及肺等脏器表面有灰白色或黄色小结节,结节大小不一,小的针尖样,大的绿豆及至蚕豆般。将结节切开,外面包一层纤维组织性的包膜,里面充满一种乳白色干酪样物质,通常并不钙化。肺有部分肿胀,剖开也有许多结核结节,似珍珠嵌在蚌肉上。
诊断方法 根据临床症状不易作出诊断,如可疑,可选症状明显的剖检,发现特征性结核结节,可作出初步诊断。有条件的,可取病鹅肝、脾组织,制成涂片,火焰固定后用石炭酸复红作抗酸染色,如涂片中找到染成红色的结核杆菌,即可确诊。也可取病料接种于含蛋黄和甘油的培养基土,在40℃温度下培养30天,出现圆形、光滑、湿润、有闪光的灰黄色菌落。然后再作涂片染色镜检。
预防 种鹅患结核病,药物治疗没有实际价值,必须采取坚决措施,予以淘汰,宜烧毁或深埋。同时,对于鹅舍、用具等也应彻底清洗消毒。运动场应铲去20厘米厚的一层表土,让日光晒后,撒上一层生石灰,然后铺一层净沙土。最好换新场地,建立无结核病健康鹅群。
某市奶牛结核病和布鲁氏菌病普查与防治措施
结核病、布病均属于人畜共患慢性传染病,分别是由结核分枝杆菌和布鲁氏杆菌引起的,主要症状为干咳、易疲劳、贫血、体表淋巴结肿大、顽固下痢、消瘦、流产、空胎、关节炎等,可引起肉、奶等畜产品质量、产量下降,使奶牛免疫力、繁殖力降低,从而严重影响养牛业发展。此外,这两种病还会交叉感染人,危害人体健康,给国家、集体和人民群众带来巨大损失。本文对某市奶牛结核病和布鲁氏菌病进行了调查,并提出了防治措施,以供参考。
1材料与方法
1.1牛结核病的材料
牛型提纯结核菌素。
1.2牛布鲁氏菌病的材料
家畜布鲁氏菌病虎红平板凝集抗原,家畜布鲁氏菌病试管凝集抗原,布鲁氏菌病阳性血清,布鲁氏菌病阴性血清,0.5%苯酚生理盐水。
1.3家畜布鲁氏菌病血清样品
对某市所有被检奶牛尾根静脉进行采血并编号,常规分离后的血清,即为样品。
1.4设备、仪器
DK-600型电热恒温水槽,试管和试管架若干,卡尺,5ml一次性注射器,酒精棉球,工作服,口罩,记录表等。
1.5结核病的检验步骤
稀释结核菌素:用10ml灭菌生理盐水将冻干牛型提纯结核菌素稀释为10IU/ml。于侧中上1/3处剪毛,直径约10cm,用游标卡尺测量术部中央皮皱厚度。然后用75%酒精棉球消毒术部,用2.5ml的皮内注射器吸取稀释好的结核菌素,每只牛皮内注射0.2ml。72h后观测并记录术部皮皱厚度,对两次的皮皱厚度进行比较,进行结果判定。对结果判定为可疑的牛,在术部对侧进行第二次检疫,72h后观测并进行结果判定。
1.6布鲁氏菌病的检疫步骤
1.6.1虎红平板凝集试验
先取布鲁氏菌虎红平板凝集抗原0.03ml于凝集板,再取被检血清0.03ml与其混匀,在室温下(20℃)经4~10min,记录反应结果。同时,取阴性和阳性布鲁氏菌病血清与抗原混匀,()做对照。
1.6.2标准试管凝集试验
抗原稀释:取抗原与0.5%的石炭酸生理盐水按1∶20的浓度稀释,长霉或出现凝集块的抗原不能应用。被检血清稀释度:奶牛布鲁氏菌病的实验室检疫一般采用1∶25、1∶50、1:100、1∶200这4个稀释度,当然,在大规模检疫时,只用2个稀释度,即用1∶50、1∶100,根据程序依次操作。阴性血清对照:操作步骤与被检血清相同。比浊管对照:每次试验须制备比浊管,以作为结果的依据,配制方法即以当时使用的已稀释抗原(1∶20)加等量稀释液,稀释为1∶40的抗原,全部试管充分振荡后,置37~38℃温箱中22~24h,取出并用比浊管对照检查记录结果。
2结果
2.1结核病判定标准
阳性反应:局部有明显的炎性反应,皮厚差大于4mm,记录为阳性(+);可疑反应:局部炎性反应不明显,皮厚差在2.0~4.0mm,记录为可疑();阴性反应:无炎性反应,皮厚差在2.0mm以下,记录为阴性(-)。被判定为可疑的牛,经复检后72h,观测结果仍为可疑的判为阳性。
2.2布鲁氏菌病判定标准
虎红平板凝集试验:在阳性血清及阴性血清试验结果正确的对照下,被检血清出现任何程度的凝集现象均判为阳性,完全不产生凝集现象的判为阴性,无可疑反应。试管凝集试验:牛血清凝集价在1∶100以上为阳性,1∶50为可疑。
2.3检疫结果
据以上方法,我们对江阴市万余头奶牛进行了两病的检疫,结果为:布病阳性0头,阳性率为0.00%;结核病共检出阳性牛8头,阳性率为0.08%。
3小结与讨论
我们对江阴市各大奶牛场进行两病检疫,结核病受检头数共9653头,检出阳性牛8头,布病共检测4672头,检出阳性0头。
(1)根据历年的数据可以看出,如东县每年养奶牛的头数不断增加,但总的发病率没有随着奶牛的增多而增加,整体状况比较好,布病阳性率一直为0,但仍有个别牛场有结核阳性牛。
(2)对于出现的个别结核阳性牛有以下原因。对于散户来说,由于管理的不严格,而且奶牛来源比较复杂,较容易发病。在结核菌素的选择方面,牛型结核菌素(PPD)与老结核菌素和合成结核菌素相比,还必须注意结核菌素是否过期、是否按要求保存和运输、瓶盖有无松动、提纯冻干菌素是否出现潮解和干缩、溶解后有无异物等,此外,结核菌素开瓶使用后,必须当日用完。虽然提纯结核菌素使用说明书规定了判定标准,但在实际工作中有些牛的反应不明显,导致难以判定,这就要求检疫人员不能简单的依照说明书进行,而要全面、综合的进行分析和判定。主要根据其局部炎性反应程度来判定,而且要考虑到多测的皮厚有一个误差值。被检出反应的牛,不一定在剖解时能见到病变或分离出结核菌。而另一方面,在结核污染较严重的牛群中,有些老龄病牛体质瘦弱时亦呈阴性反应。
参考文献
蔡宝祥.实用家畜传染病学.上海:上海科技出版社,1989.
李佑民.家畜传染病学.北京:蓝天出版社,1993.
蔡宝祥.家畜传染病学(第四版).北京:中国农业出版社,2001:76-77.