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[病例03]福建省漳州市龙海市浮宫镇一南美白对虾、罗氏沼虾混养池塘,面积5.5亩,平均水深1m,配备1台1.5kW的叶轮式增氧机、3台0.75kW水车式增氧机。2018年9月15日一次性放罗氏沼虾16万尾,18日一次性放南美白对虾(二代苗)25万尾。10月30日盖冬棚。养殖到2019年1月12日,罗氏沼虾平均规格达45尾/斤、南美白对虾平均规格达120尾/斤。
2018年11月15日,南美白对虾开始出现问题,少量虾到水面吃泡沫,游水。
2019年1月份以来,该地区以阴雨天、雾天为主。
1月5日,养殖户查料时从料台中发现有南美白对虾偷死虾,随后南美白对虾开始大量偷死,两天后罗氏沼虾开始出现偷死,截止1月12日,南美白对虾偷死40斤左右,罗氏沼虾偷死30斤左右。发病期间,用过多种改底、调水及消毒药,效果均不明显,养殖户开始陆续抓虾。
1月12日下午1点到该养殖池塘现场调查,当天死亡南美白对虾约5斤,罗氏沼虾约3斤。测定水温22.7℃,水质指标:pH值8.7、氨氮测不出、亚硝酸盐0.05mg/L、溶解氧6.75mg/L。从塘中的料台取4尾罗氏沼虾及6尾南美白对虾,外观发病虾多数发蓝,个别虾体色微微发红,罗氏沼虾额剑基部下方组织有“白点”症状。从所采取的4尾罗氏沼虾的肝胰腺接种进行细菌分离培养,并取罗氏沼虾和南美白对虾分别用95%酒精和波恩氏固定液固定保存,带回实验室做病毒检测和组织病理切片分析。
结果:采取的4尾罗氏沼虾未分离到病原菌。利用实验室建立的PCR方法进行检测,采集的10尾虾白斑综合症病毒(WSSV)、罗氏沼虾诺达病毒(MrNV)均呈阴性,虾血细胞虹彩病毒(SHIV)都呈阳性。组织病理切片结果显示肝胰腺轻度萎缩,腺管崩解,个别样品水肿、淤血,有增生,可见胞质包涵体;肌肉萎缩、断裂,个别坏死;鳃组织淤血、出血,轻度水肿。
1月12日当天用地笼抓虾120斤,随后几天陆续出虾,池塘中养殖虾密度降低后,死虾逐渐减少,到1月18日,基本无死虾。
分析:1、罗氏沼虾和南美白对虾混养池塘,两种虾先后发病死亡,从病虾的症状和实验室诊断结果初步诊断都是虾血细胞虹彩病毒病引起的(见【病例488】)。
2、本病例中放养密度大以及该地区长期阴雨天,导致池塘水质不稳定,可能是该病的诱发因素,降低密度后死亡量下降。
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[每周一例]池塘总硬度高引起南美白对虾“长毛”
[病例535]福建福州福清市江镜镇俞老板,有一南美白对虾养殖土塘(图1),面积2亩,水深80公分左右,最深处可达1米。2019年5月初,放养虾苗20万尾,至11月初对虾规格约35尾/斤。
11月8日,晴,上午10点30分客户带水、虾上店检查,使用水质简易试剂盒测得池塘水质指标:pH值8.8,氨氮0,亚硝酸盐0.1mg/L,总硬度1800mg/L。镜检水中以裸藻为主,少量硅藻和绿藻。病虾体表手感粗糙,其头胸甲、附肢等部位均有白色物质附着(图2、图3),镜检鳃部和附肢等均可见不透明沉淀物(图4),当地俗称“长毛”。客户反映:昨天并未出现这种情况,今天上午对虾体质差,摄食慢,有少量趴边,体表均大量附着白色物质,增氧机的固定绳上也有附着。据了解,在江镜河区、农场芦华区等区域,也有许多池塘出现类似的情况。
当天上午使用“碧水安(加强型)1kg”3亩/瓶,下午使用“氧速保”8亩/瓶,同时配合使用“利菌多Ⅲ”6亩/瓶+“三环活力源(净水型)”3亩/包。
11月10日,客户反映:对虾表面附着的白色物质均已消失,附肢沉淀物明显减少(图5),池塘中白色物质也基本消失。
分析:1、福清地区水体总硬度高,加之近半年来当地降水量小,多数池塘水质较浓,遇到大晴天后,藻类光合作用强,使得水中碳酸根离子增加,与钙、镁离子形成沉淀,附着对虾体表后形成“白毛”。
2、“碧水安”为多元有机酸,可与碳酸盐沉淀反应,有效溶解白色沉淀;“氧速保”可清洗虾身,促进蜕壳,增加“白毛”的处理效果;“利菌多Ⅲ”+“三环活力源(净水型)”富含大量有益菌,可有效控制藻类数量,降低pH值,减少碳酸根形成。(利洋水产药店江镜店靳坤坤提供2020.03.12)
[每周一例]“白便”南美白对虾感染虾肝肠胞虫,“慢食”、死亡
[病例525]广东珠海斗门区横山一南美白对虾养殖池塘(图1),池塘面积6.5亩,水深1.5米,水源为地下水,盐度为2‰-3‰,配备6台1.5kW叶轮式增氧机。2019年6月26日,放养“一代苗”39万尾。
进入三伏天以后,连续有10-15天闷热,7月30日左右,发现有白便漂浮于水面。出现白便前增氧机附近水浑,池塘边上水较肥,虾规格约100尾/斤。
8月2日,下雨,泼洒1瓶“优肽”,1kg“低聚糖500”拌料60-80斤料内服,连续5天。
8月4日,水浑浊度下降,逐渐变肥,由于下雨降温,连续3天浮便少一些,但仍有浮便。
8月5日,开始升温,白便又增多,虾吃料减慢。
8月6日,持续高温,白便继续增加,早上虾吃料明显变慢。抛网刮虾观察,有10%-20%的虾出现异常症状。肉眼观察健康虾肠胃都饱满(图2);轻微发病的虾空肠不空胃(图3);发病严重的虾空肠空胃,体色发黄或微红(图4),零星几尾出现“白肠”,肠道有白色粪便(图5)。解剖见:健康虾肝胰腺形状完好,与周围组织界限清晰;发病虾肝胰腺发白,不成型、“一汪水”的样子。
从池塘取虾样44尾,其中肉眼观察健康虾13尾,轻微发病虾13尾,严重发病虾18尾。分别从虾样的肝胰腺、肠、胃组织分离细菌,划线接种于胰蛋白胨大豆琼脂培养基(TSA培养基),室温条件下培养24h;取鳃、肌肉、肝胰腺组织,用95%酒精固定,送实验室进行PCR检测;取肝胰腺、肠组织用波恩氏液固定做组织病理切片观察。
结果显示:培养24h后,接种肠胃组织的培养基长出大量的优势菌落,接种肝胰腺组织的培养基几乎无菌落长出(图6)。普通PCR检测健康虾样组肝肠胞虫(EHP)的检出率为30%,轻微发病虾样组为69%,严重发病虾样组为94%;白斑综合征病毒(WSSV)、传染性皮下及造血器官坏死病毒(IHHNV)、虾血细胞虹彩病毒(SHIV)均呈阴性。观察虾样从健康到严重发病的组织病理变化为:肝胰腺组织由正常或轻微萎缩到严重萎缩;腺管崩解、腺管间细胞增生数量由少到多;肝胰腺组织中观察到肝肠胞虫数量由零星可见至大量可见(图7);肠道组织未见明显变化,部分轻微增生,部分肠上皮增生,有的虾肠腔内有疑似肝胰腺脱落的肝肠胞虫(图8)。多数对虾肌肉、肝脏、心脏等组织可见大小不等的气泡。
8月16日,连续几天均为高温天气,虾吃料慢,死虾增多,但白便现象增加不明显;塘主担心继续养殖死亡量更大,提前卖虾。
分析:1、本病例根据外观症状人为把检查的对虾分成三组即健康、轻微发病、严重发病,普通PCR检测结果肝肠胞虫(EHP)的检出率与健康状况密切相关;组织病理切片观察肝胰腺内肝肠胞虫的数量变化和病变严重程度也密切相关,说明肝肠胞虫感染与对虾发病有相关关系,感染率越高或强度越大,发病越严重。
2、本次调查的白便虾与之前调查的白便虾组织病变特征有所不同(见【病例218-220】),肠道组织并没有出现明显的细胞增生,水面漂浮的白便也不多,提示虾肝肠胞虫可能可以引起南美白对虾发生“白便”,但并不引起肠道病变,也没有引起严重的白便症状,更主要的是对肝脏的直接损伤。
3、本案例细菌分离培养结果与之前研究结果都显示白便虾肝胰腺鲜有细菌分离培养出来,肠胃组织中的细菌无明显的规律性,细菌在本案例中起到的作用还不明确。(研究所一室戚瑞荣刘健全技术部唐绍林王林锁张吉鹏2019.10.31)
今年市场普遍反映白便严重,造成大量养不成的情况。我们起初是抱着调查白便的目的去调查,药店也认为是池塘发生了白便,实际结果很少的白便虾,水面很少的白便,不是以前调查的典型的白便病理特征,通过实验室检测和病理观察而是肝肠胞虫造成的危害。
因为本次调查彻底颠覆了我们对肝肠胞虫危害的认知,会连续发3个调查相关病例,有不同的亮点,揭示其在目前对虾养殖中的危害,对我们认识目前土池塘“白便”高发、养不成功的原因,以及今后如何健康养殖有参考价值。
组织病理切片观察见到“多数对虾肌肉、肝脏、心脏等组织可见大小不等的气泡”,气泡病(已经发生了形态结构的变化,可以称为病)已经成为对虾养殖的常态,严重程度不同、发生频率不同,对具体的案例的危害程度不同,在这个案例中起到什么作用,难以确定,可能加重了肝肠胞虫病对虾(体弱、身软、瘪瘪瞎瞎、干干巴巴)死亡。
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