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【名称】沙门氏菌病(Salmonellosis)
本病是主要由鼠伤寒沙门氏菌和肠炎沙门氏菌引起的一种以败血症和急性死亡、并伴有下痢和流产为特征的疾病。以幼兔和怀孕母兔的发病率和死亡率最高。
病原鼠伤寒沙门氏菌(Salmonellatypltimurium)和肠炎沙门氏菌(Salmonellaenteridis)为革兰氏阴性、短杆状(24m0.5m),具有周鞭毛并常有菌毛,不形成芽胞。本菌为需氧和兼性厌氧,能在不添加特殊生长因子的特定培养基上生长良好,能利用枸掾酸做为唯一碳来源。本菌一般都能产气,不水解尿素,不发酵乳糖。在普通培养基上菌落圆整、光滑、湿润而凸起,呈半透明。在肉汤中一致混浊。本菌对四磺酸盐或亚硒酸盐有选择性的利用能力,因此用这些化合物作为增菌培养基,就能从高度污染的标本中将少数沙门氏菌分离出来。为了分离沙门氏菌已设计出多种特殊配方的鉴别和选择性培养基。同前最常用的是亮绿、麦康凯琼脂和亚硫酸铋琼脂。本菌最适生长温度是370C,但在43。C也能生长良好,这是常被利用于在有严重污染的标本中分离本菌时减少杂蒲生长的一项指标。
沙门氏菌具有3种抗原,即O(菌体)、H(鞭毛)和Vi(毒力)抗原。O抗原的特异性取决于细胞膜上的脂多糖结构与组成;H抗原在其构为上不同于O抗原,它由蛋白质组成,不耐热;Vi抗原存在于伤寒沙门氏菌菌体上。以上抗原可用于本菌的鉴定。
本菌抵抗力中等,在干燥环境中可以存活一个月以上,常用消毒剂,如石炭酸和来苏儿溶液可以在几分钟将本菌杀死。
流行病学从粪至口是兔沙门氏菌病的最重要传播方式,此类细菌对许多种动物都能致病,在某些动物群中其感染循环比较复杂。
幼兔比老年兔对沙门氏菌病更加易感。由于本菌是脊椎动物肠道的寄生菌,当不卫生的环境、拥挤、恶劣天气、分娩、妊娠、寄生虫病、运输、病毒感染的并发等因素都能诱发临诊的沙门氏菌。
饲料经常由于混和饲料蛋白质添加剂而污染。此外,野生啮齿动物和苍蝇也是本病的传播者。
从发病学角度看,较为常见的是肠道病,也可出现败血症或菌血症而牵涉到其他系统而造成全身性疾病。沙门氏菌性肠炎的发生有三个阶段。首先是本菌在小肠后段及结肠内定居,在正常情况下覆在大肠上皮粘液层中的固有梭状菌,能产生挥发性有机酸以拟制沙门氏菌的生长,并且肠道的正常菌丛也能阻止沙门氏菌附着在肠上皮表面。那些能破坏正常菌丛的因素和抗生素治疗、饮食及水分的缺少大大地增加了宿主对肠型与败血型沙门氏菌病的易感性,此外肠蠕动的减弱,尤其是小肠部分,也能增加沙门氏菌的定居力并大量繁殖。然后沙门氏菌穿过刷状界面进入到上皮细胞,细菌在细胞中繁殖并感染邻近细胞或转入固有层继续繁殖,此时被局部淋巴细胞所吞噬或限制,并伴有中性粒细胞的侵入,最后由入侵的沙门氏菌引起炎症反应并释放出前列腺素而可能激活腺苷环化酶,从而使细胞液外溢,迅速发展成一种肠道炎症,其特征为绒毛中心有广泛的中性细胞浸润,并有急性回肠炎和结肠炎出现。败血型沙门氏菌病的发生,似乎与菌体释放的内毒素有关,沙门氏菌的内毒素活性存在于细胞壁的脂多糖中。内毒素引起宿主发烧,粘膜出血,白细胞减少继之以增加,同时血小板减少,肝糖原枯竭并导致长期低血糖和休克或导致动物死亡。
症状除了个别病例突然死亡外,动物一般呈腹泻、体温丹高、厌食、精神沉郁。母兔从子宫及阴道内流出脓样排出物,阴道粘膜水肿、充血,孕兔常发生流产并引起死亡。流产后康复兔将不易受孕。
病变病变因病程长短而不同。突然死亡的病例呈败血症的病理变化,大多数内脏器官充血和出血斑点,胸、腹腔内有多量浆液或纤维性渗出物;肝脏、脾脏出现针尖大小的坏死病灶,肠壁表面的淋巴结肿大,有些出现坏死。偶尔可见肠粘膜充血、出血、粘膜下层水肿,并有大量的纤维素和白细胞浸润。肠系膜淋巴结也有充血和水肿病变。怀孕母兔或已经流产的母兔,出现化脓性子宫炎,子宫粘膜表面溃疡。
诊断该病的诊断主要根据细菌学和血清学的化验结果。在急性病例,可以从血清中分离到细菌,也可以从肝脏、脾脏、淋巴结(特别是肠系膜淋巴结)分离出细菌。在肠炎和子宫炎症的病例可以从阴道或子宫分泌物内分离到细菌。
慢性或带菌病例的粪便或其它器官分泌物的新鲜材料接种于四磺酸钠或亚硒酸钠增菌培养基,予37℃培养812h后,再接种于SS或麦康凯选择培养基。将所分离到的细菌作血清学和生化反应加以确诊。另外,可用沙门氏菌多价诊断抗原与待检家兔的血清进行玻片凝集反应。
防制本病的控制主要防止易感兔与传染源的接触。一旦发现本病,应立即检出病兔隔离治疗或淘汰,兔笼和用具应彻底消毒,并可用凝集反应普查带菌兔,对阳性者最好进行淘汰,面对阴性兔,可应用本场所分离到的沙门氏菌制成死菌苗进行预防注射,用以控制本病的流行。
目前,许多沙门氏菌菌株已对多种抗生素产生了抵抗力,从而严重地降低了抗菌疗法的效力。因此使用抗生素一定要慎重,如果使用已有抗药性的抗生素以后,则会破坏已定居的、能对宿主提供保护力的固有菌区系,使微生态系统受到破坏,造成沙门氏菌无限制地增殖,通过血液循环系统而导致败血症。
当病兔出现菌血性或败血性情况时,注射氯霉素、庆大霉素以及三甲苄磺胺嘧啶合剂对全身性沙门氏菌病有效。
相关知识
兔放线菌病(兔)病的症状、诊断和防冶方法
【名称】放线菌病(Actincmycosis)
本病是以放线菌引起家兔的骨髓炎和皮下脓肿为特征的疾病,引起家兔疾病的主要是牛放线菌。
病原
本组织内的硫黄颗粒中,放线菌形似一团缠结的菌丝,围有一团嗜酸性的包膜物质。本菌为革兰氏阳性染色,亦可用普通碱性染料着色。当将压碎颗粒染色镜检时,菌体为多形态,如有混合感染,则菌体呈球状的或大小不同的杆状、分枝及螺旋形.
本菌可在10%15%二氧化碳的密闭容器中生长。将菌体在固体培养基内作震荡培养时,该菌不在培养基表面生长,其最适宜生长层是在表面下约为lmm处,但在整个培养基中常见分散的菌落。如果试管密封,使内部空气中二氧化碳浓度增加,本菌有时也会在培养基表面生长。
本菌为一种嗜血清的微生物,因能在血清琼脂培养基上生长,而在普通培养基内几乎不生长。本菌缺乏过氧化氢酶。本菌最佳生长温度为37℃。放线菌不液化明胶,能发酵葡萄糖、果糖、麦芽糖、半乳糖、蔗糖和水杨苷,不产气。其发酵产物是乙酸、甲酸,乳酸和琥珀酸.本菌对碘敏感。
流行病学
本菌属于口咽和消化道的正常寄生菌,当齿槽和齿龈受到各种损伤后,放线菌可乘机进入组织内繁殖,引起骨髓炎和软组织的炎症。
症状
本菌可侵袭下颌骨、鼻骨、足、跗关节、腰椎骨、造成骨髓炎。病兔表现下颁骨或其它部位骨骼的肿胀,采食困难。与此同时受害的皮下软组织出现炎症,肿胀、甚至形成脓肿或蒂囊肿,随着病程的延长,结缔组织内出现增生形成致密的肿瘤样团块。病变的组织中可充满脓汁,最后由于组织破溃形成瘘管,使脓汁从瘘管内排出。主要的病变多见于头、颈部。
病变
受害的骨骼出现单纯性骨髓炎,周围软组织也形成化脓性炎症。病变部位的脓汁无特殊的臭味、粘液样、坚韧。脓汁内含有直径为34mm的千酪样颗粒,它是本菌的集落,通常称为硫黄颗粒,在显微镜下可见辐射状的、肥大的棍棒样菌丝。在结缔组织内不但含有特征性的肉芽组织,并含有这种颗粒。
诊断
本病的诊断主要依据临床症状,病变和病变组织中硫黄颗粒一的染色,可做出初步诊断。
取病变部位的脓汁,从中选出颗粒,洗涤,放在清洁载片上压碎,作革兰氏染色,可见革兰氏阳性的短杆状、菌状和分技状的放线菌。
治疗本菌对碘敏感,可静脉注射碘化钠,也可肌注青霉紊。口服土霉素对口颈放线菌病有一定的疗效。
兔土拉菌病的症状、诊断和防冶方法
【名称】土拉菌病(Tularemia)
本病又叫兔热病(Rabbitfebriledisease)、鹿蝇热.它由土拉杆菌引起,是一种广泛分布千啮齿动物中的传染病,也能感染家兔,其它动物和人类。其特征为体温升高,肝脏、脾脏肿大、充血和多发性灶性坏死或粟状坏死。淋巴结肿大井有针尖大干酪样坏死灶。
病原1912年由Mccoy在加里福尼亚的土伦县,从地松鼠中分离到病菌,称为土拉杆菌(FranCisellaTularensis)。本菌为革兰氏阴性,0.21ml3m,不形成芽胞和荚膜,不能运动,呈杆状或多形态(从球状到长丝状),可被常用的染料着色,有时出现两极染色。本菌属于需氧菌,在普通培养基上不生长,在含有胱氨酸或半胱氨酸(或添加鸡蛋黄、硫甘醇酸、葡萄糖、血液等)的培养基上生长良好;如在鸡蛋黄培养基和鲜血琼脂中再加入少量胱氯酸,则生长特别良好,初次分离要经过25d,有时需要5--7d才开始生长,形成灰白色、粘稠而似露珠状的小菌落。也可接种子鸡胚绒尿膜或卵黄囊内。大量培养可采用添加血红素的乳蛋白水解物培养基。不液化明胶,仅分解葡萄糖、左旋果糖、麦芽糖和甘油。本菌产酸,不产气。本菌的鉴定主要依据对生长的需要,检查该菌特有的谷氨酰胺酶、天冬酰氨酶、在蓖麻酸钠中的溶解度和特异抗血清的凝集反应。土拉杆菌对热和化学消毒剂抵抗力弱,但在尸体和皮革中能生存40--133d,在水中可生存达7个月之久。本菌在牛虻体内48h之后仍具有传染性,在蚊子体内可生存2350d之久。小鼠和豚鼠对此菌敏感,症状常呈急性过程,一般在感染815d之内,死于败血症,此时可见肝脏和脾脏有针尖大小的坏死点,该菌只有一个抗原型,与鼠疫杆菌和布氏杆菌有共同的抗原决定簇,可出现交叉凝集反应。
流行病学在自然界中啮齿类是本菌的主要携带者及传染来源,最大保茵宿主是野兔群。在许多国家都有本病的流行,多呈地方性流行。当兔群受各种环境因素影响,饲养管理不当,使兔体抵抗力降低时易引起大流行,造成严重的损失。该病的主要传染途径可通过消化道、呼吸道伤口、完整的皮肤和粘膜而发生感染,细菌通过排泄物、污染饲料,水源和用具以及吸血节肢动物,如螨、蜱、蝇、蚤、蚊和虱等进行传播。本菌可在一些吸血节肢动物体内增殖,通过叮咬或分泌物而感染动物。通过这种传播方式把病菌从患病动物传染给健康动物,也可以传染给人。人的感染通常是与病兔直接接触所致。
症状有些病例由于感染后,病原菌很快进入循环系统,以致来不及产生明显的临床症状而迅速以败血症的形式死亡。仅有个别病例在濒死前表现精神沉郁、拒食和运动失调。
在病程较长的病例呈现高度的消瘦和衰竭。淋巴结,特别是体表淋巴结(颌下、颈下、腋下和鼠蹊)肿胀发硬,体温升高11.5℃。
病变由于病程长短不同,所产生的病变也有差异。急性死亡的病兔多呈败血症和肺综合的病理变化,有时多伴有下述特征性病变:病程较长的病兔淋巴结显著肿大,呈深红色,有针尖大的灰白色干酪样的坏死点,脾脏肿大,呈深红色,切面有灰白色或乳白色的粟粒至豌豆大的坏死点;肝脏肿大、充血,并有多发性灶性坏死或粟粒状坏死病灶;肺脏肿大、充血,并有片状突变区;肾脏肿大,有灰白色粟粒大小的坏死点,骨髓也可能出现局部的坏死灶。
组织病理学:肝、脾、肺和骨髓有灶性坏死区和充血,由于受感染的器官出现灶性坏死,所以造成血管栓塞的形成。
诊断一般根据大体病变及组织病理学、细菌学检查可作出诊断。细菌学检查,主要采集可疑病兔的肝、脾及淋巴结,加入生理盐水研磨,离心,取上清液(1:5--1:10稀释倍数),采用皮下或腹腔注射0.51.0ml,接种豚鼠,一股于510d死亡,产生的病变与兔相同,可从病变组织内分离出士拉杆菌。
血清学诊断,常用凝集试验诊断本病。对慢性病兔和带菌兔,从耳静脉采集血液,制备血清,与土拉杆菌凝集抗原反应,当凝集效价达1:40或以上者可判断为阳性反应。康复兔可产生非常牢固或持久的免疫力,
鉴别诊断:野兔热各器官形成的坏死灶比伪结核病所产生的器官病变快而广泛,因此,不见有细胞反应和脓性融化等病变。野兔热病变多集中千淋巴结和实质器官,而伪结核特征性病变主要集r|I于蚓突浆膜下和圆小囊浆膜下。
防制1.无病兔场应防止引入本病,当引入外来家兔后,首先应进行隔离饲养,观察和查检兔的血清,阳性者应扑杀淘汰。特别是严禁输入从疫区输入的家兔。2.切断传播媒介,消灭兔场的鼠类和吸血节肢动物,驱除体内外寄生虫,防止野兔进入饲养场。3.一旦发现可疑病兔时,应立即扑杀处理,彻底消毒一切用具,对其它健康兔作凝集试验,消灭带菌兔,肉、皮、毛等产品不可利用。4.本病的治疗可用金霉素、土霉素、氯霉素肌肉注射.
牛沙门氏菌病的诊断措施
肉牛沙门氏菌病是由于感染沙门氏菌而引起的一种传染病,通常是犊牛容易发生,且具有较高的死亡率。犊牛患病后会在短时间内发生脱水,体质憔悴、消瘦,从发病到死亡通常在4h以内。妊娠母牛发病后还会导致流产,严重危害牛体健康和养牛业发展。下面一起来具体了解一下:牛沙门氏菌病的诊断措施。
病原多为鼠伤寒沙门氏菌或都柏林沙门氏菌。舍饲青年犊比成年牛易感,往往呈流行性。病犊发烧、停食、虚弱,泻出的恶臭液状粪便,常混有血丝和粘液。死亡率高者可达50~70%,一般为5~10%;不死者或出现关节肿胀。剖检可见出血性胃肠炎与败血性病变,肝、脾可能有坏死灶。成年较少发生或仅散发,但病后期可能转为内毒素性。病变多为急性出血性肠炎。孕牛常流产。
牛的沙门氏菌病比较严重,尤其是犊牛,可引起很高的发病率和死亡率。沙门氏菌病的临床症状和剖检变化没有特异性,虽然可作为初步诊断的依据,但必须通过走患病动物进行病原菌分离或尸体剖检做出确诊。
1、活菌计数
有肠炎症状的发病动物粪便排出大量病原菌,应进行活菌计数而非增菌培养。正因如此,应采取粪便样品而不是棉拭子取样,应在使用抗生素之前采样。从口腔分泌物和血样中也可能分到细菌,但这些样品的可靠性不如粪便培养,并且操作中必须严格防止污染。死于沙门氏菌病的动物组织中含有大量的沙门氏菌,脾脏、肝脏以及肝、纵膈和支气管的淋巴结细菌数量可超过106个/g。从回肠、盲肠、结肠壁和内容物以及相关淋巴结细菌量与此相近。样品应取自肠和其他内脏器官,以区别于死于肠炎而无败血症的动物。流产动物应采取胎儿内容物、阴道黏液和胚胎绒毛叶样本同样活菌计数的结果比较可靠,因感染都柏林沙门氏菌而引起流产的动物的胚胎绒毛叶含菌量通常在108~1010个/g。通过细菌学检查检验带菌者比较困难,必须采取一种能区分“主动”带菌者(持续排菌)和“被动”或“蓄伏携带者”(间歇排菌)的方法。在区分“主动”带菌者方面,粪便样品比拭子样品更可靠一些,粪样中沙门氏菌含量通常超过105个/g。一次分离到沙门氏茵并不能判定动物是带菌者,只有至少3次粪样检测均阴性才可以判断未感染,即便是这样,一些“潜在携带者”和一些最终能清除感染但仍带菌的动物还会被漏检。分娩牛中采样有一定的优势,但也必须小心区分“被动携带者”。传统方法是在屠宰时从膀胱、胆汁中采样来确定带菌者。然而,这些样品中并非总是含有沙门氏菌,除非同时并发肝片吸虫病,还应对消化道内容物和表皮淋巴结等多个组织进行检测。当其他组织伪阴性时,还可从瓣胃壁、皱胃壁、瘤胃壁或支气管淋巴结、肩胛淋巴结、咽后淋巴结等处分离沙门氏菌。
2、细菌培养
一系列增菌技术和分离培养基可用于沙门氏菌的培养。这些培养基可选择性促进沙门氏菌生长,而抑制杂菌生长,根据菌落形态和生化反应对细菌进行鉴定。培养基的选择取决于分离沙门氏菌的环境,常常也取决于沙门氏菌分离培养专业人员。通常需要有多种液体增菌培养基和至少两种的固体培养基才能保证大多数沙门氏菌血清型的分离。增菌培养基能满足沙门氏菌生长的需要,但为了抑制其他杂菌的生长,需在培养基中加入化学物质、染料、抗生素和提高培养温度。通常使用的培养基中都含有亚硒酸钠、联四硫酸盐和亮绿、孔雀石绿等染料,沙门氏菌对这些物质相对具有一定的抗性。
3、细菌鉴定
在经液体培养增菌后,可在固体选择培养基上分离到沙门氏菌菌落,常用的选择培养基有麦康凯琼脂、亮绿琼脂、去氧胆酸枸橼酸琼脂、EF-18、铋亚硫酸盐和沙门氏菌一志贺氏琼脂。这些培养基是基于沙门氏菌对多种抗生素、胆盐和染料具有一定的抗性,对其他杂菌有抑制作用,沙门氏菌菌落均不发酵乳糖和蔗糖,这点可与其他细菌相区别。近来有一些新技术用于沙门氏菌的诊断,包括免疫磁性分离技术(IMS)、PCR或荧光PCR技术,但这些技术目前还只限于一些研究机构使用。一旦分离到沙门氏菌,可通过生化反应鉴定到菌属,有许多快速试剂盒可进行此类鉴定。可利用玻片和试管凝集试验鉴定血清型。既然需要大量的血清型,这就需要各地实验室的共同努力。
4、血清型分类
诸如鼠伤寒沙门氏菌和肠炎沙门氏菌等重要血清型可进一步分类,常用的方法有噬菌体分型(鼠伤寒沙门氏菌有200种以上的噬菌体型,我国通常有20~30种存在,但在任何时候都只有一两种噬菌体型占主导地位)、质粒分析和一系列分子技术,包括核糖体分型技术(rRNA基因限制性酶切图谱)、PFGE(脉冲场电泳)、IS200分型(与针对沙门氏菌一个独特的插入序列(IS200)的探针杂交后比较DNA限制性酶切图谱)、DNA指纹分析技术(RFLP:限制片段长度多态性)和AFLP(扩增片段长度多态性分析)等。