土鸡养殖的鸡舍。
探讨鸡舍环境内积尘真菌的生物多样性和空间分布规律。采集封闭式鸡舍内4个不同高度(距地面0、75、150、225cm)的积尘样品进行真菌的生物多样性及分布规律研究.采用PDA和RBC2种真菌培养基进行分离、纯化、鉴定。从封闭式鸡舍中共获得507株15种类群的真菌,其中包括黄曲霉(3.13×104cfu/g),镰孢菌(8.61×104cfu/g),酵母菌(3.53×104cfu/g)等3种优势菌真菌属。积尘中真菌总浓度达2.03×105cfu/g.2种真菌培养基比较表明,无论从分离的种类还是分离的数量,PDA的分离效果都好于RBC.研究还发现,积尘中的真菌浓度随着高度的上升而下降.该研究为鸡舍的日常管理及由真菌引起的流行病的防治提供了重要理论依据.下面具体来了解一下:鸡舍环境中细菌的种类和数量的研究。
1、材料和方法
1.1培养基与培养皿
营养琼脂培养基,按常规方法制备,将营养琼脂平板置于37℃恒温箱中培养24h,无菌生长者方可应用。培养皿直径约90mm,面积约63.6cm2。
1.2稀释液
选用0.9%的生理盐水作为样品稀释液,每支试管中装液量为10mL,高压蒸气灭菌后备用。
1.3样品采集、处理与培养
1.3.1采样地点
黑龙江省牡丹江市某鸡场的母鸡舍。
1.3.2采样时间
第1、5、10、15、20天,上午(7点)、中午(12点)及下午(17点30分)三个时间段采样。
1.3.3空气样品的采集与细菌培养
取5个营养琼脂平板,将平皿盖打开置于鸡舍内离地面1.5m的地方(鸡舍四周及中间各一个),5min后盖上平皿盖,于37℃恒温箱中培养48h。
1.3.4墙壁样品的采集
选择三面墙壁(东、西、北墙).每面墙壁分取5个点作为一个样品,将中心有一正方形孔(2cm×2cm)的铝片贴在所选择的点上,用蘸有无菌生理盐水的棉拭子在墙壁的取样点上涂擦几下,每个点用一支棉拭子,最后把5个棉头剪下放入含10mL灭菌生理盐水的试管中,室温浸泡30min,作为待检样品。
1.3.5鸡体表样品的采集
选择鸡舍不同位置的三只鸡,每只鸡取体表5个不同部位(背部,腹部,翅膀外侧,翅膀内侧,腿部)作为五个样品,每个样品采3只鸡。将中心有一正方形孔(2cm×2cm)的铝片贴在所选择的点上,用蘸有无菌生理盐水的棉拭子在鸡体表的取样点上涂擦几下,每个点用一支棉拭子,将3只鸡的同一部位的棉头剪下放入含10mL灭菌生理盐水的试管中,室温浸泡30min,作为待检样品。
1.3.6样品的处理与培养
将待检样品用灭菌生理盐水做10倍的倍比稀释,选择适当的两个相邻稀释度,各取O.1mL稀释液滴加到营养琼脂平板中,每个稀释度用2个营养琼脂平板,用L型玻璃棒将液体轻轻涂布均匀,平板置37℃恒温箱中吸附2h,翻转平板培养至48h,进行菌落计数。
1.4菌落计数
1.4.1空气中菌落的计数方法
先直接数出5个平板中所有菌落总数,然后取平均值,再按照以下公式计算每立方米空气中的细菌总数。
空气的细菌总数(个/m3)=N×100/A×5/T×100=50000N/AT
A:平板面积(cm2)
N:平均菌落数
T:平板暴露于空气中的时间
1.4.2墙壁及鸡体表菌落的计数方法
首先选择平均菌落在30-300间的平板,然后数出每个平板的菌落总数,再按稀释度根据以下公式计算每平方厘米的细菌总数。
墙壁的细菌总数(个/cm2)=菌落数×稀释度×A×B/C
体表的细菌总数(个/cm2)=菌落数×稀释度×A×B/D
A=10,表示涂抹棉头所放在的10mL生理盐水;
B=10,表示每个稀释度取O.lmL涂抹平板;
C=20,表示每个样品的面积(2×2×5);
D=12,表示每个样品的面积(2×2×3)。
1.5染色与镜检
认真观察各菌落的形态,对不同培养性状的菌落进行涂片、革兰氏染色及镜检,区分出革兰氏染色阳性(G+)菌、革兰氏染色阴性(G)菌、球菌及杆菌。
2、结果
由表3可以看出,鸡体表细菌数量的分布规律是:背部腿部翅膀外侧腹部翅膀内侧。
2..4环境中细菌的形态
选择典型菌落进行涂片和革兰氏染色,显微镜检查,镜下多见葡萄状球菌、短链球菌、散在的短小杆菌、有芽孢的杆菌及棒状杆菌等。
3、小结与讨论
鸡舍空气中细菌的数量以上午最多,因清粪时间通常安排在早上,清扫地面时使尘埃大量漂浮在空气中,故增加了空气中的细菌量。而中午温度最高,空气干燥,所以细菌数较少。对细菌的革兰氏染色和镜检结果表明,空气中以革兰氏阳性球菌最多,革兰氏阳性杆菌次之,革兰氏阴性菌所占比例低于2.5%。球菌中,以葡萄球菌多见;杆菌中,以芽孢杆菌为主。
鸡舍墙壁上的细菌数量以西墙最多,东墙次之,北墙最少。经现场观察,这是由于鸡舍的窗户分别设在南墙和北墙上,故北墙受风面大,较干燥,细菌也较少。而西墙最阴暗,故菌数最多。鸡体表细菌数量的分布规律是:背部腿部翅膀外侧腹部翅膀内侧。
分析表明,由于空气中的尘埃最容易降落到鸡的背上,故此部位细菌数最多;而腿部经常接触到黏在铁笼上的粪便,故细菌数也较多;翅膀内部羽毛较少,加之常合拢于鸡体两侧,污染物较少,所以细菌数也最少。
通过对鸡舍墙壁上及鸡体表的细菌形态学观察,发现革兰氏阳性菌多于革兰氏阴性菌,球菌多于杆菌;与空气中的细菌类型相一致。
实际工作中,要做好鸡舍环境卫生,及时清扫鸡粪,注意通风换气。要根据鸡舍中及鸡体表上细菌的数量和类型,选择有效的消毒药物,建立科学合理的防御措施,减少疾病的发生,提高经济效益。
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泥鳅放苗前一定要清塘改底。清完塘消好毒后,在泥鳅入塘前4~5天,用生物有机酸或硫代硫酸钠进行解毒,6~8小时后,全池泼洒浓缩芽孢杆菌、EM菌或光合细菌,分解池塘内的各种生物尸体,避免发生二次污染,提前消除病原隐患。
许多养殖户有一个误区:水质越浓越好。所以他们平时不喜欢换水,水面上封闭着一层粘粘的泥皮,水质显得特别浓厚,蓝藻、裸甲藻易暴发,引起泥鳅发生中毒现象或不断发生气泡病引起大量死亡。养殖户必须要养成定期换水的习惯,最好换底层水,连换2~3天,换完水后及时全池泼洒VC应激灵,全池干撒全效底改、底确良或增氧底改王+解毒活水灵,搅拌成小颗粒干撒入塘底,解毒改底的效果很显著,让这些底改沉入池底氧化底部的饵料、粪便,3天后再用芽孢杆菌配合红糖活化2~3个小时后全池泼洒,或将EM菌、光合细菌等有益微生物活化后拌沙土干撒也可以。
雏鸡舍内空气环境如何控制
1育雏温度
1.1温差育雏法
采用育雏伞作为育雏区域的热源进行育雏。前三天,在育雏伞下保持35℃,此时育雏伞边缘约有30~31℃,而育雏舍其它区域只需要有25~27℃即可。这样,雏鸡可根据自己的需要,在不同温层下进进出出,有利于刺激其羽毛的生长,将来脱温后雏鸡将很强壮并且很好养。随着雏鸡的长大,育雏伞边缘的温度应每3-4天降1℃左右,直到三周龄后,基本降到与育雏舍其它区域的温度相同(22~23℃)即可。此后,可以停止使用育雏伞。
雏鸡的行为和鸣叫声将表明鸡只舒适的程度。育雏期内雏鸡过于喧闹,说明鸡只不舒服。最常见的原因是温度不太适宜。雏鸡受冷应激时,会堆挤在育雏伞下;如育雏伞下温度太低,雏鸡就会堆挤在墙边或鸡舍支柱周围。雏鸡也会乱挤在饲料盘内。雏鸡受热应激时,会俯卧在地上并伸出头颈张嘴喘气。雏鸡会寻求舍内较凉爽、贼风较大的地方,特别是远离热源沿墙边的地方。雏鸡会拥挤在饮水器周围,使全身湿透。饮水量会增加。嗉囊和肠道会由于过多的水分而膨胀。
1.2整舍取暖育雏法
与温差育雏法(也叫局域加热育雏法)不同的是,整舍取暖育雏法采用锅炉作为热源,在舍内通过暖气片(或热风机)散热供暖;或者采用热风炉作为热源供暖。因此,整舍取暖育雏法也叫中央供暖育雏法。由于不使用育雏伞,鸡舍内不同区域没有明显的温差,所以利用雏鸡的行为作温度指示有点困难。这样雏鸡的叫声就成了雏鸡不适的仅有指标。只要给予机会,雏鸡愿意集合在温度最适合其需要的地方。在观察雏鸡的行为时要特别小心。雏鸡可能集中在鸡舍内的某个地方,显示出成堆集中的现象,但别以为这就是因为鸡舍内温度过低的缘故,有时候,这也可能是因为鸡舍其他地方太热了。一般来说,如果雏鸡均匀分散,就表明温度比较理想。
在采用整舍取暖育雏时,前三天,在育雏区内,雏鸡高度的温度应保持在29~31℃之间。温度计(或感应计)应放在离地面6~8厘米的位置,这样才能真实反映雏鸡所能感受的真实温度。以后,随着雏鸡的长大,在雏鸡高度的温度应每3~4天降1℃左右,直到三周龄后,基本降到21~22℃即可。
2相对湿度
整栋雏鸡舍加热,特别是同时使用乳头式饮水器时,相对湿度可能低至25%。当然在大多数使用传统的燃气育雏器结合钟式饮水器的鸡舍,相对湿度就较高,通常能超过50%。为了减少雏鸡的脱水程度,前3~4日龄的相对湿度应至少控制在70%,最好在80%。此后相对湿度允许在50%~60%之间。
如果鸡舍装有夏季高温期间降温的喷雾器,可以借以提高育雏舍的相对湿度到所需要的范围。如果没有喷雾器,在加热器附近放置水盘,也可将相对湿度提高到70%~80%之间。还可以在鸡舍中间的走道上定期洒水,来增加鸡舍内的湿度(注意:不能往育雏垫料上直接洒水,或把水洒到鸡的身上)。雏鸡饲养在相对湿度适宜的条件下不易脱水,而且可为提高均匀度提供良好的开端。
随着种雏鸡的生长,相对湿度应当降低。18日龄以后,如果相对湿度过高,会导致垫料潮湿并引发其他问题。随着种雏鸡体重的增加,可以采用通风和加热系统控制相对湿度。
3温度和湿度的相互作用
所有的动物都会通过消化道和皮肤蒸发水分、散发体内热量。在高湿的情况下,蒸发量减少,导致动物的体表温度增加,动物对温度的感觉来源于干球温度和相对湿度,过高的相对湿度增加体表温度。相反,相对湿度低就会降低体表温度。应掌握在不同的相对湿度下达到标准温度所需要的干球温度,并应用在处于不同湿度范围内的环境中。如果相对湿度不在标准范围内,鸡舍内雏鸡所处位置的温度应达到相应的标准。在所有的时期,应该观察雏鸡的行为对温度的反映是否正常,以确保种雏鸡得到合适的温度。如果以后的行为表明雏鸡太冷或太热,就应当把鸡舍的温度控制在适当的范围。
4通风管理
在育雏期间,虽然雏鸡不需要太大的通风量,但同样需要适当地补充氧气、排除湿气、氨气、二氧化碳等有毒有害气体。因此,育雏舍在做好保温的同时,应定期适当地通风,引入新鲜的空气。
家禽发酵床养殖环境对病原微生物的防控作用研究
应用发酵床技术养禽是近年来发展的新型绿色养殖模式,可实现环境中无臭味、无苍蝇、无污染、零排放的生态目标。通过接种某些有益微生物至垫料中,微生物可以发酵分解鸡粪中的有机物,实现禽类粪便的有效降解。鸡粪便可被发酵床中的微生物分解为菌体蛋白,补充鸡的营养摄人量,减少饲料的饲喂量。鸡舍环境卫生极大地影响着鸡的生产力,良好的禽舍环境能够保证动物的健康状态,提高动物生产性能。病原菌是养禽业中最主要的生物危害因素,细菌不仅可以导致禽群发病,甚至死亡,造成巨大的直接经济损失,而且污染的病原微生物对禽肉制品的下游生产加工也具有较大的影响,特别是在屠宰加工和储藏运输时被污染,严重威胁着国家食品安全。肠道病原菌是最常见的环境污染微生物,大肠杆菌和沙门氏菌可以反映环境卫生状况及禽类群体的健康动态。笔者采用发酵床饲养鸡和饲养鸭,以常规的大棚养殖模式作为对照,检测垫料中大肠杆菌和沙门氏菌的数量,同时对发酵床和普通养殖环境中动物肠道内2种细菌的数量进行对比,并系统分析了环境中和动物肠道中主要病原微生物的变化规律,旨在为发酵床养殖技术的科学评价和技术革新提供重要参考依据。
1 材料与方法
1.1 发酵床棚舍选择蚌埠某养殖场作为试验基地,建设4栋棚舍,分别为发酵床养鸡舍组、普通养鸡对照组、发酵床养鸭舍组和普通养鸭对照组。禽舍建设采用钢管大棚式,四周砌30 cm厚的砖墙,覆盖塑料裙膜,棚顶为单侧天窗结构。禽舍长度35 m,宽度9 m,高度3 m,发酵床面积315 m2,舍内饲养鸡和鸭数量分别为900只。
1.2测试时间2013年2~3月。
1.3培养基伊红美蓝琼脂培养基和木糖赖氨酸脱氧胆酸钠琼脂,购自上海盛思生化科技有限公司。
1.4仪器与设备GNP一9270BSIII隔水式恒温培养箱,购自上海新苗医疗器械制造有限公司;zHJHC1209B垂直流超净工作台,购自上海智城分析仪器制造有限公司;立式压力蒸汽灭菌器,购自上海申安医疗器械厂;电子分析天平,购自梅特勒一托利仪器上海有限公司。
1.5测试指标和方法
1.5.1 发酵床垫料中病原微生物检测。
(1)样品采集。在饲养的中期和后期对发酵床禽舍和对照组垫料分别无菌采样。选取禽舍内的3个不同区域,每个区无菌采集5个点的垫料样品,每个点取样100 g,混合为3份样品送检。饲养末期屠宰不同养殖环境中的鸡和鸭,无菌采集肠道内容物,准确称量25 g,每组采集3只,分别接种选择性培养基,检测病原菌数量。
(2)垫料中大肠杆菌CFU检测。对GB/T 188692002饲料中大肠菌群的检测方法稍作修改,测定来自发酵床禽舍和对照舍的垫料中大肠杆菌CFU。称量采集的垫料25 g,分别溶于100 ml的无菌生理盐水中,10倍梯度稀释后接种伊红美蓝选择性培养基,于37℃温箱中过夜培养,统计大肠杆菌CFU总数。
(3)垫料中沙门氏菌CFU测定。参考GB/T 130912002饲料中沙门氏菌的检测方法,并略作修改,测定采自发酵床禽舍和对照舍中垫料沙门氏菌的CFU总数。首先对采集的垫料准确称量25 g,将其溶于100 ml无菌生理盐水中,然后10倍梯度稀释,分别接种木糖赖氨酸脱氧胆酸钠选择性培养基,于37℃温箱中过夜培养,统计沙门氏菌CFU总数。
1.5.2 动物肠道病原微生物检测。
(1)大肠杆菌CFU检测。参考GB/T 47892003食品中大肠菌群的检测方法,对采自发酵床禽舍和对照舍的动物肠道大肠杆菌数量进行测定。首先称量25 g内容物,于无菌采样袋中加入灭菌的生理盐水混合溶解,10倍梯度稀释后,选择2个稀释度,分别接种200出至伊红美蓝培养基中,于37℃温箱中过夜培养,统计大肠杆菌CFU总数。
(2)沙门氏菌CFU检测。参考NY/T 5502002动物和动物产品中沙门氏菌的检测方法,对采自发酵床禽舍和对照舍的动物肠道沙门氏菌数量进行测定。首先称量25 g内容物,于无菌采样袋中加入灭菌的生理盐水混合溶解,10倍梯度稀释后,选择2个稀释度,分别接种200斗l至木糖赖氨酸脱氧胆酸钠选择性培养基中,于37℃温箱中过夜培养,统计沙门氏菌的CFU总数。
2 结果与分析
2.1发酵床养鸭对环境中病原菌的抑制由表1可知,2组垫料以3种不同的稀释度接种大肠杆菌和沙门氏菌的选择性培养基,发酵床组均较相同稀释度下普通对照组显著减少,下降幅度约为1.5倍。2组发酵床在相同稀释度下的CFU基本处于相同水平,表明试验重复性较好。
2.2发酵床养鸡对环境中病原茵的抑制由表2可知,2组垫料以3种不同的稀释度接种大肠杆菌和沙门氏菌的选择性培养基,发酵床组均比相同稀释度下普通对照组显著减少,下降幅度约为1.5倍,且发酵床组稀释至100倍以上时几乎检测不到病原菌的生长。2组发酵床在相同稀释度下的CFU基本处于同一水平,表明试验重复性较好。
3讨论
随着我国养禽业的快速发展,人们大多依赖抗生素抑制或杀灭消化道内的有害微生物,以提高动物的生产性能,但是在饲料中添加抗生素有许多副作用,如导致禽体内菌群失调,产生抗药性以及药物残留对人类健康的影响等H1。许多国家已经越来越多禁止使用抗生素作为饲料添加剂。微生态制剂作为抗生素的替代品在养鸭业中的应用越来越广泛,并取得了良好的经济效益。
发酵床零排放健康养殖关键技术是利用EM菌将秸秆粉、木屑、米糠等有机物经发酵处理制成垫料层,由有益微生物组成的复合茵群以动物排泄物为基础营养迅速繁殖,菌群的繁殖过程中发酵产生高温使各种病原微生物被杀灭抑制,为动物的生长发育提供了良好的养殖环境,提高禽舍温度,同时粪尿也被消化分解,禽舍无臭味,实现零排放。笔者检测了发酵床养鸡和发酵床养鸭舍中病原性微生物的污染状况,可为发酵床养殖技术的推广应用和技术革新提供重要数据。依据国标方法,分别采集了发酵床组和普通饲养舍中垫料样品,利用选择性培养系统对大肠杆菌和沙门氏菌进行了比较分析,发酵床养鸡和养鸭舍中的病原微生物水平均显著低于普通饲养舍的水平。然后,也分析了不同饲养条件下动物肠道中病原微生物的携带水平,结果也表明发酵床养殖环境可以较好地抑制病原微生物对动物的侵害。笔者利用微生物培养技术分析了微生物的污染,技术相对粗放,且容易受环境中其他微生物的影响。有些学者通过分子生物学技术分析病原微生物的相关基因分布,以体现相关微生物的污染水平,具有一定的先进性,但研究成本相对较高。该研究从环境和动物体内2个方面系统分析了发酵床养殖环境对病原微生物的抑制作用,对进一步研究发酵床养殖技术有较好的促进作用。笔者尝试对发酵床养鸡和养鸭环境中病原微生物污染水平进行研究,在这方面国内少有报道。该试验表明,发酵床养禽环境可以有效地对垫料环境中的病原微生物产生抑制,尤其对肠道菌的效果比较明显。发酵床养禽也能有效防御肠道病原菌对动物的侵害,用养殖生态的策略控制了动物常见传染病的扩散。
参考文献
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水蛭的炮制方法研究
传统的水蛭临床应用,除以活水蛭用于吸吮患部瘀血外,多为粉、丸、煎剂入药。诸多医药论著还强调,水蛭必须经炮制后方能入药。近代以来,除入药的剂型有所拓展外,还主张水蛭生用。对于水蛭入药是生用好,还是炮制后再用;用什么方法炮制能保持其最佳疗效等问题,多年来一直看法各异,至今仍有一些问题需作进一步的探讨。
一、传统的炮制方法及理论依据
水蛭炮制后入药,首载于《伤寒论》,抵当汤(丸)方中所用水蛭均为熬。《金匮要略》中大黄廑虫丸所用水蛭为砂烫。此后,千余年间所记载的水蛭炮制方法约20余种,如焙、清炒、砂烫、石灰炒、滑石粉烫、米炒、米泔水炒、油炙、蜜炙、醋炙等。而且其炮制技术也在不断演变,如汉代《金匮玉函经》中水蛭用熬法炮制,但因直火不易控制,所以宋代《伤寒总病论》中则将水蛭的炮制方法改为米炒法,炒后去米不用。虽经多次演变,但水蛭炮制入药的古训则沿袭下来了。
古代水蛭炮制后入药的理论依据,概括起来主要有四点:
一是防止水蛭入腹生子为害。明李时珍所修《本草纲目》中记载此物极难修治,须细锉,以微火炮,色黄乃熟。不尔,入腹生子为害。宋代《类证活人书》中也说水蛭应熬,不然水蛭入腹再生化,为害尤甚。
二是降低毒性。古代诸多药著中均称水蛭有毒,如《本草纲目》中谓水蛭有毒,《本草经疏》中更言其有大毒,于是都在寻求用各种炮制方法来降低其毒性,正如明代《医学入门》中所言凡药用火炮、汤炮、煨炒者去其毒也。
三是矫味。干燥水蛭腥味甚烈,令患者难以承受,因此便将炮制作为矫味的一种措施。早在汉代医书中就记载,水蛭用暖水洗去腥。
四是易碎。水蛭为虫类药,研末甚难,经炮制后则易于粉碎为末。以上四点中,前两点是古人视为最重要的依据。因此,水蛭炮制后入药,才得以在千余年间沿袭下来,并少有违之。
二、对传统炮制方法及理论的不同见解
纵观祖国医药史,对水蛭炮制理论及方法的不同见解早巳有之,有些见解颇具胆识,令人耳目一新。尤以近代名医张锡纯先生的论述颇深刻、全面。他在《医学衷中参西录》中明确的对水蛭传统炮制理论中两个支柱性观点提出了异议。一曰近世方书多谓水蛭必须炙后方可用,不然则在人腹中能生殖若干水蛭害人,诚属无稽之谈。二日水蛭最善食人之血,而性缓善入。迟缓则生血不伤,善入则坚积易破,借其力以消既久之滞,自有利而无害也。凡破血之药,多伤气分,惟水蛭味咸专入血分,于气分丝毫无损。张氏认为水蛭不伤气、血,因而无需炮制降低其毒性。张氏的观点从根本上否定了水蛭必须炮制后入药的理论依据。与此同时,他还进一步强调,炮制有损于水蛭药用之疗效,故最宜生用,甚忌火炙。并以亲自收治的病例说明水蛭生用与炙用的功效之差。他曾收治一女患者,月经正常,但始终不孕,诊断为少腹有症瘕,于是单用水蛭一两,香油炙后研为末,每服五分,每日两次,服完无效。后改用生水蛭,如前服法,一两未服完,症瘕消尽,逾年便生一男孩。当然,张氏亦承认水蛭不炙,为末甚难,若轧之不细,晒干再轧或纸包置炉台上令干亦可。
现代科学研究已经证明,张氏认为服生水蛭会导致入腹生子为害诚属无稽之谈的观点是正确的。在pHo.95的环境下能杀死70%的水蛭。人的胃液的pH为o.9一l,5,加上消化酶的作用,又处于缺氧状态,不要说已经死亡晒干的水蛭药材,就是活水蛭进入胃中也无法生存,更何况药材水蛭的细胞已经死亡,不可能死而复活,也就谈不上入腹生子为害了。
关于张氏认为水蛭无毒的问题,则源于《本经》。噻本经》中记载:水蛭气味咸,平。未言有毒。现代临床应用中也未见毒副作用,加之对一些水蛭制剂进行毒理试验,其结果也表明这些制剂无毒副作用。关于这一点,本书在水蛭的毒副作用一节里还将专门阐述。总之,对传统的水蛭炮制的理论依据应予以重新认识。目前看,传统方法的前两个观点依据不足,唯矫味、易碎两个作用是可取的。
三、不同炮制方法对水蛭氨基酸含量的影响
水蛭是虫类药,富含各种氨基酸,所含氨基酸在人体内直接参与合成各种酶和激素,在治疗疾病中发挥着特殊功效。同时,水蛭所含主要抗凝血成分水蛭素是蛋白质肽类,水解后也生成氨基酸。因而测定水蛭氨基酸的含量变化对水蛭效价是有重要作用的。
实验表明,不同炮制方法对水蛭氨基酸含量有着很大影响。
用水蛭(Hirude山pponiraWhitman)按规定的清炒、砂炒和滑石粉炒等方法炮制,然后进行氨基酸含量分析。分析方法为:取水蛭生晶与经清炒、砂炒、滑石粉炒后水蛭样品,分别以蒸馏水淋洗,在70~C烘箱中烘干2小时,放冷,研粉,各取50mg,精密称重,各加入6mol/LHCllOml/于安瓿中,充氮气,封口,置恒温箱中,加热110度,水解24小时,滤过,滤液移至蒸发皿中,水分挥干,加0.02mol几HCl10mi,定容至lOml容量瓶中,以HPl090Liguidchromatograph(中国惠普公司制造)测定。
结果表明,水蛭经清炒、砂炒后氨基酸总量较生晶水蛭大为降低,分别为生品24。88%,清炒晶8.65%,砂炒品5.18%;而滑石粉炒水蛭的氨基酸总量则高于生晶,为66.68%。必需氨基酸总量清炒晶、砂炒晶也低于生晶,滑石粉炒晶则高于生品。可见不同炮制方法对水蛭所含氨基酸有很大影响。因此,如水蛭必须经炮制后入药,应选用滑石粉炒法,无特殊要求时,一般在生产水蛭制剂和临床应用时以水蛭生晶为宜。
来源:图书水蛭的临床应用
影响母猪产仔数量的原因以及改善的措施
在以前的内容里,我们多次提到了许多母猪高产的案例,一胎生十几到二十只,大大提高了猪场的效应,而在评论里也有很多猪友们抱怨为什么我们家的猪没有这么高产?下面我们就告诉大家是什么原因,一起来了解一下:影响母猪产仔数量的原因以及改善的措施。
1、能量
在生猪养殖过程中,提高产仔数的重要举措之一就是提高母猪配种前后的营养水平。能量是机体的第一营养需要,其对繁殖的影响可发生在任何阶段,在生长阶段低能量水平将推迟性成熟,为了催情,应在母猪发情前适当补料。在母猪的空怀期、妊娠中期和哺乳后期多喂粗料,适当喂给青料;母猪妊娠后期能量水平低将延迟产后发情,产后低能量则影响受胎率,其影响的阶段和损伤程度取决于能量的缺乏程度。能量水平长期不足不仅会推迟后备母猪的初情期,而且还会导致成年母畜产后乏情,使母猪的平均产仔间隔延长,繁殖率降低。
能量水平主要体现在蛋白质、碳水化合物、脂肪等三大营养物质中,是一切生命活动的热力基础。能量供给不足将影响母畜卵泡的生长发育和卵母细胞的成熟,大量的脂肪在卵巢组织沉积同样影响卵泡的生长发育和卵母细胞生长成熟。蛋白质是种猪繁殖的必须营养物质。哺乳期母猪蛋白质和氨基酸的摄入量对母猪体况和泌乳量尤为重要,而瘦肉型母猪在哺乳期需要摄入足够的能量以满足母猪自身和泌乳的需要。
2、舍内环境
环境因素中对窝产仔数影响最大的是温度,母猪舍温度控制在20℃以下时,可提高母猪产仔头数,舍温在35℃以上时,不但影响受精卵的发育,胚胎着床困难,而且还容易造成胚胎死亡。所以,母猪舍适宜温度应在17~20℃,妊娠母猪适宜温度应在11~15℃为佳。高温高湿可以降低母猪的窝产仔数、窝产活仔猪数和初生窝重。要给母猪提供一个相对稳定的生活环境,尽可能地减少转群、驱赶、打架等外界刺激。母猪的营养状态显著影响母猪的生理状态,受精、胚胎着床、胚胎发育等生理过程都离不开良好的营养状态。这些生理过程又是影响窝产仔数的主要因素。青年母猪应至少在配种前10天开始饲喂高质量日粮,自由采食,可以最大限度地增加排卵率和窝产仔数。如果在配种后2~3天内给青年母猪饲喂过多,又会降低胚胎存活率。猪的胚胎中富含精氨酸,妊娠40天时特别明显,此时,精氨酸对胚胎发育与存活起着至关重要的作用。
3、后备母猪的饲养管理
后备母猪要求肢蹄强健、背线平直、阴户自然下垂、奶头分布均匀在6对以上、腹部不能收得太紧,尽量挑选高长、健康无疾病、一栏中的猪只;6月龄前自由采食,6~7月龄适当限饲,每天控制在1.8~2.2千克/头,配种前2星期比正常喂料量要多出1/3。自由采食期间,需要尽量让后备母猪多吃料,比如可以采取喂湿拌料、增加喂料次数,从之前的每天2餐改为每天4餐。当然,在饲养的过程中有问题的母猪及时挑出治疗,同时进行大小分群,保持猪群的均匀度。在后备母猪150天龄左右时开始诱情,采用一年以上的、性欲较强的公猪进行诱情,每天诱情2次,使后备母猪初次发情越早越好,同时对发情母猪打上耳号,写好母猪卡,方便第2、3次的发情记录。
4、适时配种
地方品种猪配种在6~7月龄,引进的优良品种猪要在8~9月龄配种为宜。最好选择在4~5月份配种,9~10月份再配种,并反复循环,这样能使母猪在春秋两季配种产仔,避开寒冷和炎热的冬夏环境。配种最佳时期是在母猪发情开始的19~30小时为宜。待母猪的阴门红肿刚开始消退,并有丝状粘液流出,按压母猪后躯呆立不动时适时配种,初产母猪要在7~8月龄、体重100千克以上时,开始配种。采用这种方法适时配种可提高产仔率16%~18%。猪最好在春季4~5月配种;8~9月产仔;9~10月再配种,第二年1~2月产仔;2~3月再配种,反复循环,可使母猪多在春秋两季产仔,避开寒冬和酷夏季节,又能提高母猪繁殖率和仔猪成活率。
青年母猪初配时的体重可以明显影响第1窝的产仔数、仔猪出生重、成活率和断奶重。配种选择在母猪排卵前12小时最佳,一般控制在0~24小时内,可得到最多的窝产仔数。为了根据排卵来确定配种时间,应了解母猪和青年母猪的发情持续时间,应在70%发情期进行配种。
如果成年母猪人工授精和自然交配都做得很好,二者所得的窝产仔数没有差别。母猪断奶7天后发情比例的增加会导致分娩率和窝产仔数降低。至少85%的母猪应在断奶后第4~6天返情。
一、配种季节
1~4月配种的母猪窝产仔数相对较多,6~9月配种的母猪窝产仔数较少。窝产仔猪数量就会受到季节的影响,建议猪场一定要保持适当的通风和适宜的温度,尽量使猪场内的小气候能满足猪的需求。
二、品种原因
产仔数的多少与不同品种的繁殖能力分不开,如:皮特兰、杜洛克等,本身繁殖能力就不强,想要提高产仔数也就非常困难,养猪朋友们在选育种猪时,不能只注重猪种的体型和瘦肉率,而忽视了繁殖能力,尽量避免产仔数少的品种的血缘。
三、饲料搭配
1.要配合营养饲料
有的猪友认为母猪不用或少用添加剂,以免造成母猪的过度肥胖,这种想法是不正确的,必须加以纠正,有些饲料公司也认为母猪的饲料不重要,做配方不认真,不全价,偷工减料,造成养猪者加不加添加剂效果不明显,造成思想误区。
2.喂给发霉变质的饲料原料
玉米的黄曲霉超标,豆粕的尿素酶偏高,对麸皮的质量不重视,母猪对矿物质的消化力不强,造成钙、磷无法吸收,氟含量超标,均影响母猪的产仔数及产活仔数。
四、年龄的影响
猪的年龄及胎次影响产仔数的多少,同时影响产活仔数的多少。怀胎1—2胎的母猪繁殖性能低,排卵数少,产仔数少;3—5胎繁殖性能最好,产仔数及产活仔数最高,6胎以后的母猪繁殖性能有所下降,产仔数及产活仔数下降。并且由于体力的影响,产仔过程易产生疲劳,时间过长,造成死胎比例过大,在生产中应加强低胎次和高胎次猪的助产,减少产仔的间隔时间。
五、猪场管理
1.后备母猪配种体重过低及月龄太小,由于现在猪的品种生长速度太快,配种过早,没有达到体成熟,造成产仔数减少,后备母猪的配种月龄应该在7月龄以上。
2.没有控制配种前的膘情,后备母猪没有限饲,造成配种时体重过大过肥,产仔数减少。基本母猪断奶后过瘦,流产和返情母猪过肥,影响母猪的排卵数,从而影响产仔数。
3.配种前没有短期优饲,为了增加排卵数,后备母猪和断奶母猪配种前4—5天要短期优饲,喂给优质全价的饲料,增加饲喂量,以提高排卵数。
4.妊娠期间饲喂量不合理,妊娠前期每天饲喂1.5—2公斤,中期适量每天饲喂2—2.5公斤,后期每天饲喂3—3.5公斤,同时要视母猪的个体体况随时调整饲喂量。
六、其它原因
1.疫苗接种时间不合理,母猪在妊娠期间,尽量减少疫苗的注射,除大肠杆菌、红痢外,其他疫苗都应在配种前注射,减少因疫苗注射对胎儿的影响。
2.疫病的影响,很多疫病都能造成繁殖障碍,引起产仔数下降,死胎、木乃伊胎比例增加。如:蓝耳病、猪瘟、伪狂犬病、细小病毒病、乙脑、口蹄疫、猪丹毒、链球菌病和猪流感等。传染病造成的母猪产仔数及产活仔数减少的原因复杂,症状相互重合,不做血清学检查很难判断。
在母猪的饲养管理过程中,应注意以下几点:
1.加强防疫工作,减少外来野毒的感染。
2.减少外引种猪的地区,因为各地区的种猪健康状况不同,减少地区就减少了感染的机会。减少引种次数,不要从疫区引种。引种后要隔离检查,防止传染病的引入。
3.定期对母猪群进行血清学检查,针对猪群的健康状况进行各种疫苗的免疫工作。
4.加强饲养管理,减少由于管理的原因造成产仔数的减少。
5.引种时选择繁殖性能高的猪种,提高母猪的生产效率。
灵芝的生长环境
说到灵芝也许很多人并不是特别的熟悉,其实在电视里面我们经常可以看到用灵芝救人性命的场景,因此灵芝在很早的时候,就已经被广泛的应用了。而且它的药用价值非常的高!
什么是灵芝
灵芝又称林中灵,以林中生长的为最佳,药效最高。目前也有人工大棚种植,主要生长在较湿润的地方。灵芝属高温性菌类,在15~35℃之间均能生长,适温为25~30℃。子实体在10~32℃的范围内均能生长,但原基分化和子实体发育的最适温度为25~28℃。低于25℃,子实体生长缓慢,皮壳色泽也差;高于35℃,子实体会死亡。灵芝生长需要较高的湿度。随着昼夜温差的增大,菌丝长满袋的时间延长。
灵芝的生长环境
菌丝生长期,要求培养基含水量为55%~60%,空气相对湿度为70%~80%。子实体发育期,空气相对湿度要求在90%~95%。如果低于80%,子实体会生长质量不良,菌盖边缘的幼嫩生长点将会变成暗灰色或暗褐色。
灵芝是好气性真菌,它的整个生长发育过程中都需要新鲜的空气。尤其是子实体生长发育阶段,对二氧化碳更为敏感。当空气中二氧化碳含量增至0.1%时,子实体就不能开伞,长成鹿角状分枝,含量达1%时,子实体发育极不正常,无任何组织分化,形成畸形。
灵芝在生长发育过程中对光线非常敏感,光线对菌丝生长有明显的抑制作用,无光黑暗条件生长速度最快,当照度增加到3000勒克斯时,生长速度只有全黑暗条件下的一半。子实体生长发育不可缺少光照,在1500~5000勒克斯,菌柄、菌盖生长迅速,粗壮,盖厚。
灵芝的品种选择
1、赤芝:赤芝是灵芝属中的代表种,野生菌盖一般可达5厘米x10厘米-12厘米x20厘米,厚度达1-2厘米,红褐色稍内卷,菌肉黄白色。菌柄侧生,高达5-10厘米,色与菌盖相同,子实体蜂巢状,菌盖下面有菌管层,菌管长约1厘米,菌管内壁为子实层,着生担子,担孢子子卵型。
2、紫灵芝:紫灵芝的菌盖及菌柄均有黑色皮壳,菌肉锈褐色,菌管硬,与菌肉同色,管口圆,每平方毫米约5个。
3、薄盖灵芝:薄盖灵芝又称薄树芝,其子实体皮壳具有深紫红色,菌盖比前两种为薄,近菌管处浅褐色,菌管为肉桂色,每平方毫米4-5个,菌盖为7-11厘米,厚0.5-1.0厘米,成熟的菌盖肉卷明显,菌盖背面菌管近白色,木栓质含量少,孢子含量高,药用成分高,药效好。
灵芝的功效与作用
1、保肝解毒:灵芝对多种理化及生物因素引起的肝损伤有保护作用。无论在肝脏损害发生前还是发生后,服用灵芝都可保护肝脏,减轻肝损伤。灵芝还能促进肝脏对药物、毒物的代谢,对于中毒性肝炎有确切的疗效。尤其是慢性肝炎,灵芝可明显消除头晕、乏力、恶心、肝区不适等症状,并可有效地改善肝功能,使各项指标趋于正常。所以,灵芝可用于治疗慢性中毒、各类慢性肝炎、肝硬化、肝功能障碍。
2、治疗糖尿病:灵芝降血糖之原理是由于促进组织对糖的利用。服用灵芝后可取代胰岛素抑制脂肪酸的释出,可改善血糖、尿糖等症状。灵芝中的水溶性多糖,可减轻非胰岛素依赖型糖尿病的发病程度。
3、改善心血管系统:动物实验和临床试验均表明,灵芝可有效地扩张冠状动脉,增加冠脉血流量,改善心肌微循环,增强心肌氧和能量的供给,因此,对心肌缺血具有保护作用,可广泛用于冠心病、心绞痛等的治疗和预防。对高血脂病患者,灵芝可明显降低血胆固醇、脂蛋白和甘油三脂,并能预防动脉粥样硬化斑块的形成。对于粥样硬化斑块已经形成者,则有降低动脉壁胆固醇含量、软化血管、防止进一步损伤的作用。并可改善局部微循环,阻止血小板聚集。这些功效对于多种类型的中风有良好的防治作用。
4、肌肤美白:李时珍在《本草纲目》中就指出灵芝有增智慧,好颜色,灵芝是一种具有抗皱、消炎、清除色斑、保护皮肤。灵芝含有抑制黑色素的成分及多种对皮肤有益的微量元素等,这些成分能够通过减少人体自由基,加速细胞的再生,增加皮肤的厚度并增加胶原质,达到丰润皮肤、消除细纹与皱纹的效果。其中的多糖成分能够通过保持和调节皮肤水性,恢复皮肤弹性,使皮肤湿润、细腻。
灵芝的功效有很多,它对人体的很多疾病都有非常好的疗效,因此随着人们对灵芝的认知越来越多,对它的需求也越来越大,因此灵芝的市场前景是非常不错的。
宠物兔的种类
世界上的兔子品种超过150种,就像不同人种有不同的特徵,不同品种的兔子也有不同的模样,兔子有很巨大的、也有小巧迷你的,有长毛的、也有短毛的,还有毛像缎子般柔顺的,更有许多不同的毛色与不同的眼睛颜色、耳朵长短特徵不同、头型体态各不相同。下面主要介绍宠物兔的种类。
荷兰兔
别名:霍兰兔、道奇兔、老鼠兔、猫熊兔
英文名:Dutch
品种:白色+黑色、蓝色、巧克力色、灰色、黄色、海龟绿和铜铁色等颜色搭配的品种。
原产地:荷兰
体形:体重2kg左右;体长40cm左右
荷兰兔脸部有V字形的白色区块。体型小,耳朵也比较短,鼻子四周和脖子到前脚为白色,其他部分为其他颜色搭配。身上的短毛柔软有光泽。荷兰兔具有高度想象空间的模样,使它成为欧、美、澳洲,非常流行的宠物兔。
荷兰垂耳兔
英文名HollandLop
毛色有纯色、刺鼠色、杂色、铜铁色、橙色宽条纹等。
原产荷兰
体形尺寸体重2~2.5kg,最恰当的体重大约是1.4kg。
荷兰垂耳兔天生性情温驯,是最迷你、超可爱的垂耳兔,身圆骨重、多毛。据悉是由荷兰的AdrianDeCock先生发展出来的。在1949年,他以迷你兔(侏儒兔)与英国垂耳兔所生的后代,与法国垂耳兔交配,生产出荷兰垂耳兔。
历史:1949-1950年间,荷兰人将法国垂耳兔语荷兰侏儒兔配种,产下的个体之后再和英国垂耳兔交配,经过多次改良,与1964年公开发表体重2公斤的个体。荷兰垂耳兔在欧洲地区广受欢迎,并与1976年引进美国。
个性:文静温和,对饲主顺从且和蔼可亲。从饲养者经验中可大致分为三种性格,包括喜欢来回不断走动不沉着、爱撒娇喜欢被饲主抱合沉静不太爱走动。
荷兰侏儒兔
侏儒兔(也称Q版兔、迷你兔)
英文名:NetherlandDwarf
原产地:荷兰
体型:小型
繁殖方式:胎生
外貌特征:属于宠物兔中最小的品种之一,耳朵小而直立。成年体重1kg左右,体长30cm左右,毛色灰白相间。
这种小型兔只生活在华盛顿州的道格拉斯县(DouglasCounty),而且没有野生种类存活,目前这两只分别名为罗罗(Lolo)和布莱恩(Bryn)的母兔是仅存的纯种哥伦比亚盆地侏儒兔。
历史:英国约在1880年时,出现由道奇(Dutch)突变所生下的白毛红目小兔,从来并将这个突变种引进德国与野兔交配,进而产下荷兰侏儒兔,并与1985年被引进美国。现已是美国兔子繁殖者协会所认定的兔种之一。
在所有兔种中就属荷兰侏儒兔是最小型的品种,一般成兔的标准是1.1公斤(赛级900公克),相当迷你可爱。加上它们的大眼睛与短小可爱的耳朵,且表情生动活泼,而深受兔迷们的喜爱。
个性:动作灵活可爱是本种的特征,有些侏儒兔喜欢与人亲近,有些则较喜怒无常,饲主应耐心与其培养感情。本种相当敏感,对于周遭环境及饲主的能度会产生反应,另外在它们身上将可看到丰富多变的表情。
波兰兔
学名:Polish(波兰兔)
类型及体重:属宠物兔,标准体重为小於3.5磅,是小型兔之一。
介绍:据说他们是由Dutch发展而成,在波兰是很普遍的品种,因此便叫Polish,是纯种兔中最娇小的。
特徵:身圆头短,两只耳朵竖起及靠在一起,长度不过3吋,毛短及浓密。
狮子兔
学名:LionHead(狮子兔)
类型及体重:属宠物兔,标准体重为3.25-4磅,是小型兔之一。
介绍:他们源自比利时,是欧洲品种,但还没有被ARBA所承认。
特徵:他们和垂耳兔很相似,都是面圆身圆,鼻扁,但前脚就较长,在颈的四周都长有毛发(呈V字的围住颈部),因此令他们长得像头狮子,而耳朵则是竖起的呈叁角形,没有毛发且不长过3吋。
安哥拉兔
安哥拉兔大致上可分为五种:英国安哥拉,法国安哥拉,德国安哥拉,大型安哥拉,缎毛安哥拉。
海棠兔
海棠兔(熊猫兔)
学名:Hotot
类型及体重:属宠物兔,标准体重为8-11磅,是大型兔之一。
产地:法国
特徵:纯白色,只有围着眼睛的毛是黑色的,看似有个黑眼圈,而耳朵是呈V型,身体强壮。
侏儒海棠兔(侏儒熊猫兔)
学名:DwarfHotot
体重:体重为小於3磅。
介绍:这品种是分别在东德及西德被培育,再在1970年尾由两种交配而成,在1983年被ARBA所承认。
特徵:体型娇小,耳朵不长於2.75吋
长毛垂耳兔
学名:AmericanFuzzyLop(美种费斯垂耳兔)
类型及体重:属宠物兔,标准体重为3.5-4磅,是小型兔之一。
介绍:他们属较新的品种,在1985年才被ABRA确认,他们是由带有Angora的遗传因子的Hollandlop配种而成,有些杂了种的长毛垂耳兔
特徵:和短毛垂耳兔差不多,只是毛比较长
迷你雷克斯
历史:毛长得像天鹅绒一样浓密的本种的特征,外表像是雷克斯加上矮小遗传因子而小型化的兔子。1984年着手改良的品种,1986年ARBA初次宣布发表。
个性:不只模样讨喜,连个性也十分温和,相当受到儿童、大人的喜欢,极具有人气。
管理:迷你雷克斯与标准型的雷克斯一样,脚底的毛发稀疏,在日常管理上要小心脚底溃烂的问题。
体型:6个月以上的成熟雄兔1.4-1.9公斤(赛级1.8公斤),雌兔则约1.7-2公斤(赛级1.9公斤),体干短小结实,体型相当匀称,自侧面观察,从耳根起至腰部呈缓和的曲线,延伸至尾根处。毛极为浓密直立,1.5公斤是理想的长度。本种的毛发质感十分有光泽,摸起来就像天鹅绒的触感,具有弹力。
水蛭素的提取方法研究
这方面的实验与应用,多见于国外报道。目前国内采用不多。
1.提取水蛭素的有效部位
水蛭素主要产生于水蛭的唾液里,当水蛭吸血时,将其分泌出来,阻止血液凝固。因而,实践表明,提取水蛭素的最佳部位在头部。I.P.Baskova在比较了从水蛭头部、去头后的体部及整体水蛭中提取的水蛭素后发现,从头部得到的水蛭素活性最强,从整体得到的活性只有头部的土/3,而从去头后的体部得到的是伪水蛭素(pseudohru山n),其化学性与水蛭素相同,但无抗凝活性。
2.提取水蛭素的方法
(1)用能与水混溶的有机溶剂提取:从水蛭头部提取:即将水蛭头部剪下,切成碎片,以其10倍体积的40%丙酮一水提取2次,每次30min。合并提取液,再加1/2体积的809《丙酮一水,加冰醋酸调至pH4.34.5,离心除去沉淀,上清液用氨水调至pH6.0,在40~C下,减压浓缩至原体积的l/10。再用10%三氯醋酸调至pHl.8。最后以10倍体积的冷丙酮(5。C一0。C)将粗水蛭素沉淀析出。
从水蛭整体中提取:即将80%的冷丙酮加到磨碎的水蛭粉中,搅拌10min后,加氯化钠(0.20.5mol几)和三氯醋酸(0.10.4mol/L),使PH值达到2.53.5,搅拌3060min,倾出上清液,沉渣再用1/3体积的上述80%丙酮提取1次。合并2次提取液,加入2倍体积的冷丙酮(10~C),沉淀析出粗水蛭素。
(2)用水提取:
将水蛭磨成细粉,加入0.5mol几氯化钠液,室温搅拌3060min,调成pH2.02.5后,升温至70C,搅拌15min离心去渣。上清液调至pH6。57.0,加入l。5倍体积的乙醇,去沉淀。上清液在30~C一40~C,真空浓缩至原体积的1/20左右。向浓缩液中加入等体积的丙酮,去沉淀,再加入4倍体积的冷丙酮(5~C一0信C),将粗水蛭素沉淀析出。水蛭素的分离,多用离子交换、凝胶层析和等聚焦等方法。如作进一步研究,可以分离提到纯晶。